siRNA干扰牦牛Bmal1基因对颗粒细胞激素分泌的影响

本研究旨在探讨敲低Bmal1基因对体外培养牦牛颗粒细胞雌二醇(E2)和孕酮(P4)分泌的影响。应用siRNA技术下调颗粒细胞中Bmal1基因的表达,利用ELISA试剂盒检测细胞培养液中E2与P4含量,再通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白印迹(Western Blot)检测细胞激素分泌相关基因的表达情况。结果显示:经si-Bmal1转染颗粒细胞后,E2分泌量显著下降,P4分泌量极显著下降;在mRNA检测水平上,激素合成相关基因Cyp19a1、Star的表达量下降;在蛋白检测水平上,Cyp19a1、Star的结果与mRNA表达基本一致。综上表明,敲低Bmal1基因能通过调控相关基因的表达抑制体外培养牦牛颗粒细胞E2和P4的分泌水平,Bmal1基因参与牦牛颗粒细胞激素分泌的调控。     

GnRH主动免疫在公畜繁殖中的研究进展

本文对GnRH的结构和生物学功能、GnRH主动免疫抗原的构建、佐剂的选取、GnRH主动免疫的作用机理、在家畜生殖调控中的应用以及对GnRH主动免疫在公畜繁殖中的前景进行了综述,以期为进一步研究GnRH主动免疫在公畜繁殖中的作用提供科学的理论依据。     

初情期母牦牛血液雌激素含量及乳腺细胞大分子成分变化研究

本试验采用ELISA技术、糖原PAS法、油红O染色法以及茚三酮-Schiff法,结合显微成像技术,对初情期母牦牛在发情期内血液雌激素浓度以及乳腺大分子成分变化进行研究,结果显示:发情母牦牛血液雌激素浓度高于未发情母牦牛(P 0. 05);发情母牦牛乳腺生长发育明显,叶间导管数量多,腺泡数量多且膨胀变大,细胞中含有较多促进乳糖、甘油三酯、糖蛋白、蛋白聚糖合成的信号,由此说明,雌激素能够有效刺激乳腺细胞生长发育,并为乳汁中大分子物质提供物质基础。     

Bmal1在牦牛卵巢中的免疫组化定位

采用免疫组化技术检测Bmal1(Brain and muscle arnt-like 1,Bmal1)蛋白在牦牛卵巢中的表达定位。结果显示,在牦牛卵巢中,Bmal1蛋白主要在生殖上皮以及不同大小的卵泡颗粒细胞层中表达。根据试验结果推断Bmal1基因可能参与牦牛卵泡发育功能的调节。     

牦牛发情症状的肉眼观察

牦牛发情时,可以观察到其行为表现、阴部、排出粘液以及被毛的变化。为了充实牦牛发情的鉴定方法,笔者将肉眼观察牦牛发情的症状做以下阐述。     

生殖激素对初情期牦牛子宫生长发育的影响

采用Elisa对10头发情期母牦牛和10头乏情期母牦牛进行24h内血液GnRH、LH、FSH分泌情况检测并对子宫进行组织切片制作,观察各腺体数量,分析生殖激素对初情期牦牛子宫生长发育的影响。结果显示:发情期24h内初情期母牦牛血液GnRH、LH、FSH分泌量明显高于乏情期母牦牛(P0.001)、发情期母牦牛GnRH、LH均呈脉冲式分泌;对子宫进行HE染色后发现,发情期母牦牛子宫内膜中浅层腺体、深层腺体数量均多于乏情期母牦牛(P0.05),但是扩张腺管数量少于乏情期母牦牛(P0.05)。说明GnRH、LH、FSH能够有效的作用于子宫,促进各腺体生长发育。