采用一种新型RNAi载体培育转基因高直链淀粉马铃薯

采用PCR技术分别克隆nos终止子、烟草axi1内含子和烟草ubi.u4启动子,亚克隆部分与马铃薯Sbe1同源、部分与Sbe2同源的融合基因SIII,构建具有“ubi.u4启动子—反向SIII—反向nos终止子—axi1内含子—正向nos终止子”结构的异源3¢端UTR反向重复序列型RNAi载体pCUSNI,采用农杆菌介导法转化马铃薯品种陇薯3号、甘农薯2号和大西洋,获得了16个转基因植株,其中14个的块茎直链淀粉含量大幅度增加,表观直链淀粉含量介于53.80%~85.33%;但随着直链淀粉含量的升高,转基因马铃薯淀粉含量下降。半定量RT-PCR分析表明,在直链淀粉含量超过80%的转基因株系中检测不到Sbe1和Sbe2基因mRNA的积累。结果表明,异源3¢端UTR反向重复序列型RNAi载体pCUSNI能够高频、高效地同时抑制马铃薯Sbe1和Sbe2基因的表达,是一个优良的RNAi载体。以载体pCUSNI为基础,再以植物的其他基因为靶,只需在pCUSNI的BamH I和Sac I位点之间插入干涉片段替换SIII即可完成载体构建,而不必构建靶标基因的反向重复序列,使载体制备迅速便捷。     

诱抗剂对切花百合生长、抗病性及相关酶活性的影响

分别用DL-β氨基丁酸(DL-β-aminobutyric acid,BABA)、移栽灵(Isolane,有效成分:10%稻瘟灵,10%噁霉灵)、表油菜素内酯(epibrassino1ide,epi-BR)、水溶性壳聚糖(hydrosoluble chitosan,OS)、苯并噻二唑(acibenzolar,BTH)、脱落酸(abscisic acid,ABA)、MgO和NH4Cl浸泡切花百合种球根部与鳞片,通过盆栽、田间种植和鳞片包埋,测定其生长指标,POD、PAL、PPO等防御酶活性以及根腐病的病情指数。结果表明,各种试剂处理后,植株叶片防御酶活性增加,株高、叶片数、茎粗等生长性状得到改善,子球鳞片数增加,病情指数减小。其中OS400mg·L-1处理的百合在各个生理指标以及抗病性上明显高于对照。     

连栋塑料温室气动四联杆天窗机构优化设计与选配

在塑料温室气动四联杆天窗机构的静力学分析基础上，考虑强度条件、安装裕量、边界约束等约束条件，以气缸输出推力最小为目标构建优化模型，得到的优化结果采用标准气缸，选配机构满足稳定性要求。通过改变载荷参数和结构参数，优化模型也可用于其它塑料温室的气动四联杆天窗机构设计。运行试验表明：与原有的齿轮齿条开窗机构相比，选配的气动四联杆天窗机构天窗开度增加20°，开窗高度增加28.2%，开到最大角度只需9.3到11.7 s。     

包虫病宣传片《格桑花开》宣传效果评估

《格桑花开》是首次以情景剧形式进行人兽共患病防治宣传而拍摄的科普影片。影片开播后,各省组织农牧民,通过集中播放或自行观看等方式进行防治知识宣传。为评价《格桑花开》的宣传干预效果,播放1年后,在新疆、青海、甘肃、四川4省区抽取农牧民进行包虫病防控知识、态度、行为问卷调查。结果显示:与干预前的基线调查相比,养殖户的包虫病防治相关知识、态度和行为平均得分分别上升了8.4%、16.5%和15.2%,各调查省区干预后的平均得分均有提升。结果表明,在文化水平偏低、少数民族语言使用较多的地区,用情景剧方式对动物疫病进行防治宣传教育效果较好。     

连栋塑料温室气动天窗系统的选配与经济性评价

以节约成本为原则,在满足工作要求的前提下,对华东型连栋塑料温室气动天窗系统的驱动部件、执行机构及其连接件等进行选配,并就设备初投资、综合电耗和运行费用,与原有的齿轮齿条天窗机构进行对比分析,结果表明:利用气动天窗机构,提高了温室通风降温能力,降低了能耗,提高了经济效益.     

雪茶的观赏价值及开发利用

1 形态特征 雪茶(Thamnolia vermicularis Ach.)为地茶科植物.地农体技状,灰白色或白色,高3～7cm,多分叉,常为2～3叉或单枝上呈小刺状分叉,长圆条形或扁条形,干燥时自由弯曲,粗3～4mm,渐尖,中空.小型丛状生长.     

高油大豆如何选种

一般生产上良种的贡献率约占30-40％，而在高油大豆生产中，从商品含油率看，高油品种的贡献率可以达到80％以上。近年来，在农业部实施大豆振兴计划的带动下，我国特别是东北大豆产区已相继育成了一批高油大豆新品种。但由于产区生态条件的不同，不同高油大豆品种熟期类型差别较大，导致在不同地区和年份间产量变化也非常明显。     

龙饲一号高梁栽培技术要点

龙饲一号高梁是黑龙江省农科院育种所用母本320A和父本MR741育成的杂交种高梁,1993年2月经黑龙江省农作物品种审定委员会审定命名推广。适宜在双城、阿城、呼兰、宾县、三肇、大庆、安达、齐市、龙江、富裕、海林和东部国营农场等地栽培。它的籽实能正常成熟,产量高,是很好的精饲料,籽实成熟茎叶仍青绿,可青饲青贮。它所含无氮浸出物、钙、磷比玉米高,尤其是可溶性糖类达14％,比五米高3～4倍。龙饲一号高梁属甜茎种,茎叶是猪、牛、马、羊的好饲料,鲜喂、青贮或调整制干草均可,尤以青贮最好。甜饲料高梁经过青贮后,茎皮软化,适口性好,消化率高,是家畜优良贮备饲料。龙饲一号高梁与玉米以1:1比例青贮,饲喂效果也好。     

南芥菜花叶病毒衣壳蛋白的克隆、原核表达和多克隆抗体制备

为开发百合中南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)的血清学检测技术及研究ArMV的致病机理,原核表达ArMV衣壳蛋白(coat protein, CP),纯化并制备其多克隆抗体。以侵染东方百合杂交品种‘木门’(‘Conca D’or’)的ArMV基因组为模板,克隆ArMV CP基因全长,构建ArMV CP基因原核表达载体,转化E.coli BL21(DE3)原核表达ArMV CP蛋白,并以纯化ArMV CP蛋白为抗原制备兔抗多克隆抗体,Western blot鉴定多克隆抗体的特异性。结果表明:克隆获得百合ArMV CP序列(GenBank登录号:MT323117)全长,其长度为1 515 bp,与已知的ArMV CP基因核苷酸序列相似性最高达到93.6%,氨基酸序列相似性最高达到98.2%;SDS-PAGE表明CP蛋白在E.coli BL21(DE3)中大量表达,蛋白相对分子质量为56 ku; Western blot结果显示抗体能够特异性结合ArMV CP蛋白,具有良好的特异性。     

魔芋花叶病毒衣壳蛋白的原核表达和多克隆抗体制备

采用小RNA测序技术对甘肃省榆中县疑似感染病毒病的当归[(Angelica sinensis(Oliv.)Diels]样品进行测序鉴定,发现样品中含有魔芋花叶病毒(Konjac mosaic virus,KoMV),通过反转录PCR(RT-PCR)扩增KoMV衣壳蛋白(capsid protein,CP)的cp基因,克隆的KoMV cp基因连接原核表达载体pET-28a(+),导入E.coli Rosetta^TM(DE3)诱导表达蛋白,在Ni-NTA重力柱层析作用下纯化CP融合蛋白,并以此作为抗原免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体。序列分析表明:KoMV cp基因片段大小为840 bp,编码280个氨基酸的外壳蛋白;与GenBank已注册同源性较高的KoMV分离物相比,核苷酸序列相似性为85.58%~99.41%,氨基酸序列相似性为89.32%~99.29%;KoMV的病毒种群分布存在明显的区域性和寄主差异。SDS-PAGE显示,不同温度诱导下KoMV CP融合蛋白在E.coli Rosetta^TM(DE3)中均以包涵体的形式大量表达,融合蛋白分子量为36 ku。间接ELISA和Western blot检测结果显示,制备的多克隆抗体效价达到32 000,能够与感染KoMV的当归叶片和纯化蛋白特异性结合,具有良好的特异性。本研究成功制备了当归KoMV CP融合蛋白的多克隆抗体IgG,为开发KoMV的血清学检测技术及CP蛋白的功能研究奠定了基础。