应急饲料对甘肃高山细毛羊泌乳母羊生长性能、血液生化指标和瘤胃内环境的影响

试验旨在研究应急饲料对甘肃高山细毛羊泌乳母羊体重、血液生化指标以及瘤胃内环境的影响。选取健康、年龄相近、平均体重为(39.8±0.83)kg的甘肃高山细毛羊泌乳母羊18只,随机分成3组,每组6只,试验组A、B分别饲喂应急饲料1(EW)、应急饲料2(EC),对照组C正常放牧,试验期15 d,试验初、末测量体重,于试验末采集血样和瘤胃液。结果表明:相比对照组,①甘肃高山细毛羊泌乳母羊饲喂EW和WC的日增重、瘤胃微生物(白色瘤胃球菌、黄色瘤胃球菌、产琥珀酸丝状杆菌、真菌和原虫)相对表达量、血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶含量显著提高(P<0.05);②EW和WC对甘肃高山细毛羊泌乳母羊瘤胃液总氮、蛋白氮、氨态氮、尿素氮含量和瘤胃液pH值、挥发性脂肪酸以及血清中总蛋白、蛋白氮、尿素氮、总胆固醇、乳酸脱氢酶、血糖含量无显著影响(P>0.05)。研究表明EW和EC能够促进甘肃高山细毛羊泌乳母羊的生长性能,但对血液生化指标和瘤胃内环境无显著影响,适宜在冬季放牧甘肃高山细毛羊的地区作为应急推广。     

淅川县农业面源污染的防治与治理

随着淅川县农村经济社会的不断发展,农业面源污染不断加剧,农业生产中使用化肥、农药、农膜、农作物秸秆、畜禽养殖造成的污染,以及人粪尿、农村生活垃圾污水等废弃物对环境造成的污染,制约着农业现代化、产业化和可持续发展,影响了城乡饮用水安全和农产品质量安全。近年来,淅川县随着"南水北调"中线工程渠首县、源头县、库区环境优化及保护,城乡环境综合治理,城乡环境面貌得到了极大改善,但淅川县是农业大县,农业面源污染防治任重道远,仍需加强农业面源污染综合治理。     

奶牛结合珠蛋白生物信息学分析及其多克隆抗体的制备

结合珠蛋白(haptoglobin, Hp)是奶牛罹患乳房炎期间一种重要的标志性蛋白,其在血液和乳汁中含量变化与患牛乳房炎病情密切相关。为制备奶牛Hp多克隆抗体及了解其理化性质、结构和功能,本研究通过PCR成功扩增获得奶牛Hp完整CDS区序列,对其进行生物信息学分析和pQE-80L-Hp原核表达载体的构建。将测序成功的重组质粒转化至M15感受态细胞,用1 mmol/L IPTG诱导重组蛋白的表达。重组蛋白表达后用亲和层析法进行纯化。利用纯化后的蛋白免疫动物制备多克隆抗体,利用ELISA方法和Western blot对多克隆抗体进行效价检测和反应性分析。结果显示,Hp是一种不稳定亲水性蛋白,分子式为C₁₉₃₆H₃₀₄₉N₅₄₅O₅₆₇S₁₉,编码388个氨基酸残基,由α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲4种结构组成,有15个抗原决定族,36个磷酸化位点。在1～42氨基酸位置存在信号肽,无跨膜结构域与CD163、MMP9、CP等蛋白具有较好的互作关系。pQE-80L-Hp在大肠杆...     

柿蒂虫发生规律及防治技术

90年代中期以来 ,淅川县柿树发展较快 ,全县种植 4 0万棵 ,年产鲜柿 2万ｔ,产值 1亿元 ,是本县人民脱贫致富的好门路。然而 ,由于柿蒂虫 (Ｓｔａｔｈｍｏｐｏｄａｍａｓｓｉｎｉｓｓａ)的为害 ,致使柿子严重减产 ,已成为本县柿子发展的主要障碍因素。为此 ,1 996年对全县柿树进行普查 ,1 997～ 1 999年对柿蒂虫的发生特点进行观察 ,掌握了柿蒂虫在本县的发生规律和防治技术 ,现将研究结果报道如下 :1　柿蒂虫发生特点1 996年 8月经对全县 1 3个乡 (镇 )调查 ,柿蒂虫的为害特点 :一是老龄树的柿蒂虫重于幼龄树 ,全县共调查 1 1 50棵 ,其中 1 …     

玉米赤霉烯酮降解酶在枯草芽孢杆菌中的表达及其对母猪繁殖性能的影响

本试验旨在建立玉米赤霉烯酮(ZEN)降解酶基因ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达体系,确定其产物的生物降解活性及对母猪繁殖性能的作用。克隆ZEN-jjm基因,经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后连接至p HT01表达载体中,构建重组质粒;转化枯草芽孢杆菌,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析ZEN-jjm蛋白表达水平。高效液相色谱法(HPLC)检测表达的ZEN-jjm蛋白降解ZEN的活性。通过对母猪的繁殖性能的评价,确定ZEN降解酶降解ZEN对母猪繁殖性能的影响。双酶切和测序结果表明:ZEN-jjm成功插入p HT01中,SDSPAGE表明获得1株高效表达目的蛋白的重组枯草芽孢杆菌,其大小约为29 ku。HPLC结果表明表达的ZEN-jjm蛋白能有效地降解ZEN;表达的ZEN-jjm蛋白能显著缓解ZEN对繁殖母猪的毒害作用(P0.05)。综上:1)本研究成功构建了表达ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达载体,并在枯草芽孢杆菌中得到了表达。2)表达的ZEN-jjm蛋白具有降解ZEN的生物活性。3)在饲粮中添加ZEN-jjm蛋白能显著降低ZEN对母猪能繁殖性能的危害。     

CDK1和CyclinB1在不同月龄绵羊睾丸中的表达与定位

哺乳动物精母细胞减数分裂至成熟受蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK1)和细胞周期蛋白B(CyclinB1)形成的复合物细胞促分裂因子(maturation promoting factor,MPF)控制.本实验选取0、2、6、12和24月龄绵羊(Ovis aires)睾丸组织,探究了不同月龄绵羊睾丸中CDK1和CyclinB1表达与定位情况.通过qRT-PCR方法检测了CDK1和CyclinB1在不同月龄绵羊睾丸中mRNA表达情况,并利用免疫组织化学染色技术对睾丸组织中CDK1和CyclinB1蛋白定位.结果表明,绵羊睾丸中CDK1和CyclinB1 mRNA表达量随月龄的增加呈现先下降后上升的趋势.CDK1和CyclinB1蛋白在细胞中主要定位于精原细胞、初级精母细胞和次级精母细胞.各发育期CDK1蛋白表达量均低于CyclinB1蛋白的表达量,其中CDK1蛋白在整个细胞周期中表达量极少且相对稳定,CyclinB1蛋白在各发育期表达量不同.说明CDK1和CyclinB1 mRNA和蛋白质在不同月龄绵羊睾丸中的表达量存在一定差异,可能对绵羊睾丸发育有一定的调节作用.     

小鼠髓过氧化物酶(MPO)基因克隆分析及真核表达载体的构建

髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)是一种血红素辅基蛋白酶,是血红素过氧化物酶超家族成员之一,参与多种疾病的发生和发展过程。本研究旨在克隆小鼠MPO基因CDS全长序列,检测该基因在小鼠神经细胞的表达谱。首先利用RT-PCR法与克隆载体克隆小鼠MPO基因CDS全长序列,对其进行生物信息学分析;然后构建真核表达载体pEGFP-C1-MPO,瞬时转染小鼠神经元细胞,通过qRT-PCR、Western blot和免疫荧光检测MPO在神经细胞的表达及分布规律。结果显示,小鼠MPO基因CDS全长2171 bp,编码718个氨基酸,与章鱼、美洲灰熊、马、人、非洲爪蟾、扬子鳄等物种的氨基酸序列同源性均高于79.25%。转染细胞后,试验组MPO的mRNA和蛋白表达水平极显著高于阴性对照组(P<0.01),表明小鼠MPO基因的真核表达载体pEGFP-C1-MPO构建及转染成功;免疫荧光结果显示MPO蛋白主要分布于神经元细胞质中。过表达MPO后,nNOS的mRNA水平显著高于对照组(P<0.05),而NADPH表达水平显著低于对照组(P<0.05)。总之,在体外过表达MPO可促进nNOS表达,抑制NADPH的表达,这为今后深入研究MPO的功能奠定理论基础。     

双峰骆奶对2型糖尿病大鼠肝细胞凋亡的影响

本试验旨在研究双峰驼奶对2型糖尿病大鼠肝细胞凋亡的保护作用。60只月龄接近的雄性成年大鼠随机分5组,阴性对照(C)组采用基础饲粮,其他4组均通过链脲佐菌素结合高糖高脂饮食诱导建立2型糖尿病大鼠模型,各组分别为糖尿病模型对照(DMC)组、低剂量骆奶(LCM)组(2 mL/d)、高剂量骆奶(HCM)组(5 mL/d)和盐酸二甲双胍(MTH)组(200 mg/kg)。试验期4周。结果表明:与C组和DMC组相比,MTH组和HCM组大鼠血糖浓度显著下降(P<0.01);DMC组肝细胞水肿,部分肝细胞核皱缩、碎裂、溶解,而LCM组、HCM组和MTH组肝细胞形态正常,胞核结构清晰;与DMC组相比,HCM组和MTH组大鼠肝细胞B细胞淋巴瘤因子2(BCL-2)蛋白合成增强,BCL-2相关蛋白X(BAX)合成减弱;BCL-2 mRNA相对表达量在MTH组中最高,BAX mRNA相对表达量在LCM组和MTH组中最高;DMC组、MTH组、LCM组和HCM组均可检测出BCL-2和BAX蛋白。综合以上,双峰骆奶能抑制BAX蛋白的合成而促进BCL-2蛋白合成,揭示双峰骆奶能抑制细胞凋亡,促进细胞增殖。双峰骆奶具有明显的降低2型糖尿病大鼠的血糖及肝细胞损伤的作用,可起到辅助治疗的作用。     

甘加型藏绵羊发情周期内输卵管和子宫中MTR1a mRNA的表达

旨在研究褪黑素受体(MTR1a)基因在甘加型藏绵羊(Ganga Tibetan ovis aries)输卵管和子宫组织中的表达规律,选取发情周期内正常且未孕的甘加型藏绵羊32只,应用qRT-PCR方法检测输卵管和子宫组织中MTR1a基因的表达差异。结果显示:在整个发情周期中,甘加型藏绵羊输卵管和子宫中均有MTR1a mRNA表达。在发情前期、发情期、发情后期、间情期4个阶段,输卵管组织中MTR1a mRNA的相对表达量分别为0.604±0.253、 0.033±0.031、 0.202±0.151和1.000±0.221,间情期的相对表达量最高,与发情期差异极显著,与其他时期差异显著;子宫组织中MTR1a mRNA的相对表达量分别为0.188±0.086、0.525±0.347、1.878±0.209和1.000±0.094,发情后期的相对表达量最高,与其他3个时期差异极显著。发情周期内MTR1a基因在输卵管和子宫中的表达变化规律表明褪黑素(Melatonin,MT)在动物排卵、受精及早期胚胎发育过程中起调节作用。     

香菇品种L26适温性试验

近几年 ,河南省栽培代料香菇数量达几亿袋 ,在种植的 L2 6品种常常出现出菇迟 ,甚至不出菇的现象。为此 ,我们对 L 2 6品种的适温性做了一些试验。现报告如下 :1　材料与方法1.1　菌种来源　香菇 L2 6品种 ,其母种、原种均引自河南农业大学生物工程学院。1.2　试验材料　 18mm× 180 m m试管 ;PDA培养基 ;栽培种培养基为木屑 78% ,麸皮 2 0 % ,石膏和糖各 1% ;恒温培养箱。1.3　试验方法　 1把香菇 L 2 6母种接入 PDA培养基试管斜面 ,放入 2 0℃、2 4℃、2 8℃、3 2℃的恒温培养箱中 ,每个温度处理放 10支 ,观察记录菌丝萌发时间、生长…