西伯利亚鲟糖异生途径关键酶基因全长cDNA的克隆和序列分析

本试验采用简并引物反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆西伯利亚鲟(Acipenser baerii)肝脏糖异生途径关键酶———C型和M型磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶(PEPCK-C和PEPCK-M)、果糖-1,6-二磷酸酶(FBPase)和葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)基因cDNA全长序列。结果显示:西伯利亚鲟PEPCK-C基因(GenBank登录号JQ995143)cDNA全长2 598 bp,开放阅读框1 869 bp,编码622个氨基酸,预测其分子质量为69.62 ku,与其他物种的相似性为77.3%～80.5%;PEPCK-M基因(GenBank登录号JQ995142)cDNA全长3 277 bp,开放阅读框1 935 bp,编码644个氨基酸,预测其分子质量为71.11 ku,与其他物种的相似性为64.6%～78.3%;FBPase基因(GenBank登录号JF834908)cDNA全长1 372 bp,开放阅读框1 017 bp,编码338个氨基酸,预测其分子质量为36.60 ku,与其他物种的相似性为73.4%～88.7%;G6Pase基因(GenBank登录号JF834907)cDNA全长2 625 bp,开放阅读框1 080 bp,编码359个氨基酸,预测其分子质量为40.62 ku,与其他物种的相似性为67.2%～72.7%。西伯利亚鲟糖异生途径关键酶基因全长cDNA序列的获得将为进一步研究其糖异生调控机理,比较其与典型肉食性鱼类和哺乳动物的异同奠定基础。     

外源酶制剂的潜在营养价值及其在实际生产中的应用

在实际应用中，酶制剂的使用通常与潜在营养价值的应用密切相关，以实现预期效果。这些潜在营养价值可采用不同的方法进行测定，但在多数情况下采用消化率和性能试验来测定。然而，每一种方法都有其局限性，特别是进行独立消化试验时，这种方法容易忽视摄食和吸收后的效应。同时，饲用酶的效果在很大程度上受环境尧日粮以及养殖等相关因素的影响。因此，商业营养师应考虑生成营养潜在营养价值的分析条件与酶的使用条件之间的差异。在应用中，如果因为原料限制（如最低脂肪浓度）而无法减少昂贵、营养丰富的原料的使用，那么应用酶制剂的潜在营养价值不一定会如预期那样降低成本。此外，大多数酶都以固定添加量进行配制，这限制了其应用价值，因为大多数酶倾向于以对数剂量：线性营养释放关系来释放营养物质。有些方法会考虑到这一效应，并且能够使用酶制剂实现真正的最低配方成本。最后，通常一种商业饲料可使用3种酶制剂，每种酶都有相应的能量潜在营养价值。虽然它们体现潜在营养价值的机制可能有所不同，但在实际应用之前我们需确保其潜在营养价值是真实可叠加的。