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牛星状病毒(BAstV)是我国新发的犊牛腹泻病原,本试验的目的是建立检测BAstV的Real-time PCR方法。根据BAstV流行株的ORF1a基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BAstV的Real-time PCR方法。结果表明,该检测方法的Ct值与标准品模板在1.36×101~1.36×108拷贝/μL线性关系良好,相关系数R2=0.999,扩增效率为93.79%;该方法可特异性检出BAstV,对犊牛腹泻其他相关病原呈阴性;最低检测下限为13.6拷贝/μL;批间和批内的变异系数均小于2%,重复性好。对2017年9月至2019年5月采自河南省的221份犊牛腹泻样本进行检测,BAstV的检出率为18.1%(40/221),采样场阳性率为100.0%(14/14)。本试验所建方法灵敏度高、特异性强、稳定性好,为BAstV的检测和流行病学调查提供了有力手段。 相似文献
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牛诺如病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 总被引:1,自引:1,他引:0
牛诺如病毒(BNoV)是国内新发的犊牛腹泻病原,笔者拟建立检测BNoV的Real-time PCR方法。根据BNoV流行株的RNA聚合酶(RdRp)基因序列设计引物,通过优化反应条件和体系,成功建立基于EvaGreen检测BNoV的Real-time PCR方法。该检测方法的Ct值与标准品模板在2.24×102~2.24×108拷贝·μL-1线性关系良好,相关系数R2=0.997,扩增效率为98.44%;该方法可特异性检出BNoV,对其他犊牛腹泻相关病原呈阴性;最低检测限为22.4拷贝·μL-1;批间和批内的变异系数均小于2%,重复性好。对2017年9月-2019年5月采自河南省的221份犊牛腹泻样本中BNoV的检出率为11.31%(25/221),采样场阳性率为92.86%(13/14)。本试验所建方法灵敏度高、特异性强、稳定性好,为BNoV的检测和流行病学调查提供了有力手段。 相似文献
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河南省开封市某猪场近 3年来所产的仔猪 ,多在 5~ 1 0日龄出现拉稀症状 ,粪便呈现黄、绿色 ,粥样或水样 ,体温正常 ;病初食欲尚可 ,后期不食、脱水、体温降低。发病率 65 %以上 ,病死率为5 0 %。曾用庆大霉素、磺胺类药物、氯霉素、痢特灵、抗病毒性药物治疗 ,效果均不理想 ,但在断乳后很快痊愈。1 临诊症状与病理变化就诊的 9日龄仔猪 3头 ,患病 3~ 4d后前来就诊。患猪瘦弱 ,皮肤苍白 ,被毛粗乱 ,鼻端干燥、弓腰 ,体温无异常 ,眼结膜干燥苍白、眼球下陷 ,站立不稳。肛门周围及后躯污染有灰黄色或黄绿色粪便。解剖变化为 :血液稀薄 ,肺… 相似文献
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<正> 禽类链球菌病是由链球菌引起的急性败血性或慢性传染病。慢性链球菌病主要表现为禽只消瘦、昏睡、持续性下痢、关节肿大、跛行和瘫痪,实质脏器肿大、出血、坏死。1 发病情况 2002年9月,河南省禹州和新乡某场所饲养的180日龄和150日龄产蛋鸡群陆续出现拉稀、消瘦无力、跛行以致瘫痪的病鸡,产蛋停止,发病率分别为5%和8%,病死率均在80%以上。一直查不出原因,多次治疗无效,前来求诊。2 临床症状及病理变化 病鸡主要表现消瘦,无力,精神不佳,羽毛蓬乱,站立不稳,瘫卧,但哄赶能行走,跛行,产蛋停止。临死前瘫痪,嗉囊无食,鸡冠及肉髯苍白,排淡黄色粥样稀粪,有的关节肿大。病鸡喉头有少量干酪样物覆盖,气管黏膜不光滑,有黏液,肺充血,气囊混浊;心包及腹腔有黄色浆液性渗出物,心内膜有条状出血,心瓣膜表面有粗糙的白色疣状赘生物;肝 相似文献
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