3株猪Ⅱ型圆环病毒的分离及基因组序列分析

为了解混合感染中猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)毒株的遗传变异特性,本研究对2009年与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的病料中分离的3株PCV2通过PCR、免疫荧光等进行初步鉴定,并扩增病毒全基因组,用DNAStar对序列进行拼接和分析。结果表明:分离得到的HUN-09株(GQ449670)、HUB-09株(GQ449671)和SD-09株(GQ449669)3个PCV2毒株其全基因组长度均为1768bp,与国内外参考毒株核苷酸序列同源性为95%～99.7%,3个分离株之间的核苷酸序列同源性为97.6%～98.5%,与PCV1分离株核苷酸序列同源性为69%～70%。进化分析表明,本研究2009年分离的3株PCV2属于基因型PCV-2a。     

无鱼粉日粮饲养肉鸡试验

目前世界上鱼粉供应紧缺,价格昂贵,且质量也不稳定。为了寻求配合饲料中鱼粉的代用品,解决动物性蛋白质不足和降低饲料成本以及提高肉,蛋商品质,我们从1983年开始进行无鱼粉日粮饲养肉鸡的研究。现将1988年两次试验情况报告如下:     

速大肥促进肉鸡生长试验

速大肥的主要成分为维吉尼亚霉素(Virgin-iamycin),据介绍:它是促进畜禽迅速生长,提高饲料报酬、增加瘦肉率、并能预防疾病的优质生长促进素。为了进一步确定其促进肉鸡生长的效果,以推荐给广大用户,特开展本试验。现将结果报告如下:一、材料与方法     

猪流感H1N1亚型病毒dM2蛋白的原核表达及鉴定

为构建猪流感病毒H1N1亚型dM2蛋白的原核表达系统,获得具有生物活性的GST—dM2重组蛋白。研究从H1N1亚型猪流感病毒核酸中克隆出M2全长基因,采用OE—PCR技术得到缺失跨膜区的M2基因（dM2）,构建重组表达质粒pGEX-6p—dM2,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后,进行GST亲和层析柱纯化和Western—blotting鉴定。结果表明GST—dM2融合蛋白在大肠杆菌BL21中获得较高表达,并以可溶形式存在,表达量为22．75％。纯化后的GST—dM2重组蛋白为38kD,经Western—blotting证明具有良好的反应原性。GST—dM2重组蛋白的成功获得,为拼-步研密猪流感哑单位癌苗奠定了某础．     

PRRSV天津分离株Nsp2基因的克隆和遗传进化分析

从天津市病猪中分离得到3株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),分别命名为TJ-S1、TJ-S2和TJ-S3。根据GenBank中PRRSV BJ-4株的基因序列设计并合成针对Nsp2基因高变区的引物,RT-PCR扩增目的基因并将其克隆到pGEM-T载体进行测序,并与国内外已发表的毒株序列进行比较。结果表明,3个毒株都是美洲型PRRSV,而且TJ-S1、TJ-S2株的Nsp2基因发生30个氨基酸的不连续缺失;基因系统发育树分析表明,TJ-S1株、TJ-S2株与HuN株、SD-14株的亲缘关系很近,TJ-S3株与CH-1a株的亲缘关系较近。     

沙门菌肠毒素基因克隆及序列分析

研究常见的不同血清型沙门菌肠毒素(stn)基因核苷酸序列之间的差异及其分布情况。根据沙门菌的stn核苷酸序列设计一对引物,应用PCR技术,分别对肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌和鸡白痢沙门菌进行PCR扩增,对扩增产物进行克隆及序列分析,并用所设计的引物检测7种血清型沙门菌(42株)。结果显示,3种沙门菌经PCR均扩增出749 bp的特异条带,DNA序列分析证实,沙门菌的stn核苷酸序列比较保守,42株沙门菌stn的检出率为100%。本试验成功克隆出沙门菌的stn,调查其在不同血清型沙门菌中的分布及序列分析,为进一步研究stn致病机理及研制减毒沙门菌活菌疫苗奠定了基础。     

鹈鹕李氏杆菌病的诊治

夏秋季节水禽细菌病及其混合感染引起死亡是动物园常见的疾病.临床上多出现腹泻,站立不起,一般在发病1~2 d死亡,如果不及时处理,常导致混合饲养的多种珍禽感染而死亡,造成较大的经济损失.2008年9月天津市动物园鹈鹕等珍禽发生类似细菌感染,造成多只珍禽死亡,报告如下.     

肉用仔鸡锰缺乏症治疗观察

1984年5月,广州市某肉鸡场15日龄的红布罗肉用仔鸡和 AA 鸡,个别出现跛行,当时并未引起注意。2天后,跛行鸡明显增多,达鸡群的5%左右。据饲养员介绍,以前从未出现类似情况。病鸡的主要症状是:胫蹠关节明显肿大,跛行,个别严重病鸡胫骨和蹠骨弯曲,跟腱从踝部滑脱。     

可视化的RT-LAMP方法检测禽白血病病毒

本研究旨在建立一种快速检测禽白血病病毒(ALV)的RT-LAMP方法.根据GenBank中ALV序列,在其保守序列区域设计了多套LAMP引物,通过LAMP Real-time Turbidimeter仪对ALV的LAMP引物、反应体系及反应进程进行监测和分析,以评价该方法的特异性和敏感性,并对加入SYBR Green Ⅰ肉眼判定与仪器监测结果进行比对.结果表明:建立的RT-LAMP方法在63℃水浴中36 min可对ALV核酸进行高效扩增,在反应结束后加入SYBR Green I肉眼判断结果与Real-time Turbidimeter仪检测结果一致;该方法具有很强特异性,对其它相关鸡病病原检测结果均为阴性;其检出限量为14.2 pg·μL-1,显示出很高的敏感性;用建立的LAMP方法对24个样品进行检测,结果表明LAMP法与其原检测结果基本一致;本研究建立了可对ALV进行快速检测并可肉眼判定结果的可视化RT-LAMP方法,其操作简便、无需昂贵设备,适用于ALV的快速检测.     

农网信息系统远程维护管理平台的实现

0引言随着农电系统信息化与应用广域化的发展,农电信息化应用系统日益复杂,如何解决农电信息系统由于复杂性、可靠性和广域分布等带来的维护问题已成为农电系统信息自动化领域研究的重点。为此,宝泉岭电业局与东北农业大学等科研单位进行联合,根据黑龙江省农电信息系统发展的现状和趋势,在参考国内外先进诊断、维护技术的基础上,充分利用远程信息通讯手段,研究并开发了基于IT远程管理专家的农网信息系统远程维护管理平台,较好地解决了农电信息化应用系统远程快速维护与人员培训的难点问题。1系统设计系统是利用虚拟专用网VPN(Virtual Pri…