微流控芯片技术在微生物检测中的应用

微流控芯片是一项以芯片为基础,结合化学、物理学、生物学等多学科形成的技术平台,能够在一个芯片上实现样品制备、反应、分离、检测等流程,具有高通量、高效率和易操作的特点。随着材料科学和纳米技术的发展,该项技术得到迅速发展并应用于化学分析、微生物检测等,尤其是在微生物检测和分析方面发挥着重要作用,并逐步产生了商品化的微流控芯片。微流控芯片因具有小型化、节约试剂、速度快、集成化程度高等优点,适用于处理突发公共卫生事件,但目前在动物疫病检测中的应用还很少见。本文对微流控芯片的技术原理、结构及其在微生物检测中的应用进行综述,以期为动物疫病的高通量检测提供借鉴。     

一株犊牛腹泻绿脓杆菌的分离鉴定及耐药性分析

从延边州某养殖场采集腹泻犊牛粪便样品,对采集样品进行细菌培养分离及纯化,对所得菌株进行形态学观察、革兰氏染色、生化试验、分子生物学鉴定、药敏试验.结果表明在LB固体培养基上形成大小不一、扁平、灰绿色的菌落,血琼脂培养基中呈溶血环,有特殊气味;革兰氏染色、镜检显示该菌株是革兰氏阴性小杆菌,基本呈单个散在分布;生化试验表明该菌分解葡萄糖、木糖、果糖,产酸不产气,氧化酶试验、枸橼酸盐、硝酸盐还原试验、明胶液化试验、尿素水解试验均为阳性,硫化氢试验、V-P试验和吲哚试验为阴性;该菌16S rDNA扩增和序列测定显示其为绿脓杆菌;药敏试验显示对庆大霉素、头孢呋辛、头孢噻吩、多粘菌素B敏感,对四环素、痢特灵、红霉素、青霉素等抗生素耐药.本试验对病原菌进行菌种鉴定,对兽医临床诊断提供参考,并通过其耐药性分析提出合理用药,对防治绿脓杆菌的感染提供参考.     

绵羊皮肤组织VEGF-A基因可变剪切体存在的证实与鉴定

为了克隆绵羊血管内皮生长因子A(VEGF-A)基因,探寻该基因与绵羊毛囊发育及毛用性状形成的潜在关系,试验采用RT-PCR方法从小尾寒羊与新吉细毛羊皮肤组织克隆出VEGF-A基因mRNA并对其进行生物信息学分析。结果表明:以皮肤组织cDNA为模板,RT-PCR扩增出3条特异性条带;克隆测序结果显示所有条带均为VEGF-A基因序列,片段长度依次为828,825,756,624 bp。828 bp和825 bp片段属于全长VEGF-A,其中825 bp片段在3′非编码区缺失3个碱基;756 bp和624 bp片段由可变剪切产生,分别为外显子6缺失和外显子6,7双缺失,编码蛋白与人类VEGF-A165和VEGF-A121类似;核苷酸序列比对发现,VEGF-A基因mRNA仅存在3个SNP位点;蛋白结构域分析发现,三种类型VEGF-A蛋白均含有完整的血小板衍生生长因子(PDGF)结构域。说明试验成功地从绵羊皮肤组织中克隆到VEGF-A基因并证实可变剪切突变体的存在。     

中药制剂肠宁Ⅱ对健康小白鼠Ea花环率和EAC花环率的影响

中药肠宁Ⅱ是按照中兽医理论科学组方原则,以黄连、鱼腥草等为主要成分制成的中药复方制剂,在临床上主要用于防治动物腹泻,增强机体免疫力,疗效显著。试验通过对健康小白鼠Ea花环和EAC花环形成率两项免疫指标进行测定及比较分析,探讨中药肠宁Ⅱ对动物机体免疫力的影响,旨在为其     

小番茄栽培技术

1 概述 学名:Lycopersicun　esculentum　Mill 番茄为茄科番茄属,喜温、喜光、耐肥及半耐旱。根系比较发达,其分布主要在耕层30CM内。番茄根系再生能力强,有较强的抗逆性,易于生存。番茄可分为停心生长和无限生长、半停心三种类型。种子发芽最低温度为11℃,适温度为28～30℃。地块尽可能选择土层深厚、疏松肥沃、排水良好,富有机质且保水保肥能力强的,且土壤PH值为6～6.5的微酸性沙壤土。番茄属于喜光性作物,生长发育需要充足阳光。     

禽偏肺病毒研究进展

禽偏肺病毒(avian metapneumovirus,aMPV)可感染火鸡、鸡、鸭以及一些野生禽类,传染性强、传播迅速,易造成继发感染,导致严重的上呼吸道感染和产蛋率下降等症状。该病在世界范围内广泛流行,并呈地方性流行,给养禽业造成严重经济损失。本文以国内外对aMPV在禽类中的流行病学调查和基因分析研究报道为基础,从病原学、流行病学、病毒分离鉴定和防治的角度,对其在禽类中的感染情况和引起的相关疾病进行简要概述;比较多种分子生物学检测方法的优缺点和实用性,为建立快速、简便、实用的aMPV检测方法提供参考。     

东北黑熊源粪肠球菌EfaA基因的克隆表达及生物信息学分析

为检测熊源粪肠球菌心内膜炎抗原（EfaA）基因,用于快速检测东北黑熊粪肠球菌感染病例,本试验根据GenBank登录的粪肠球菌EfaA基因序列（登录号：U03756.1）合成了1对PCR引物,通过PCR法扩增合成长度为689 bp的目的片段。将PCR产物克隆于pMD19-T载体,之后将其转入大肠杆菌DH5α感受态细胞筛选阳性克隆。提取扩增后的重组质粒pMD19-T-EfaA并进行PCR、酶切鉴定、序列测定及蛋白质结构预测。结果显示,本试验成功克隆出熊源粪肠球菌EfaA基因,与GenBank登录的ATCC 29212菌株同源性为100.0%。本试验成功构建了重组克隆载体pMD19-T-EfaA,并对测序结果进行了蛋白质结构的预测,为进一步建立黑熊粪肠球菌病的诊断方法提供了理论依据,同时也为黑熊疾病的防制奠定了基础。     

我国部分地区Sicinivirus流行病学调查

Sicinivirus是一种禽类新发病毒,可引起家禽发育迟缓综合症、腹泻、吸收不良综合征等.目前,仅部分国家开展了该病毒的流行病学调查,研究数据极为有限.为明确该病毒在我国的流行情况,以及该病毒感染率与地域、宿主、养殖方式之间的关系,2019年下半年在江苏、广西、河北、安徽、广东、上海、湖北和江西8个省(自治区、直辖市...     

一例山羊传染性口疮和流感混合感染的病例报告

<正>羊传染性口疮是由病毒引起的的接触性传染病,以病羊口、唇、等部位破溃为特征;流感是由流感病毒引起的人兽共患传染病,可引起病羊发热、咳嗽等临床症状。现将延边地区一羊场的发病和诊治情况报告如下,以期为临床提供参考。1发病情况2019年6月,延吉市老头沟镇一羊场发病,主诉该群羊     

冷、热应激对猪孤雌胚胎体外发育的影响

为研究持续不同时间的冷、热应激对猪孤雌胚胎体外发育的影响,本研究以猪孤雌胚胎为材料,采用免疫荧光染色、实时荧光定量PCR技术检测不同时间的冷(31℃)、热应激(41℃)处理对猪孤雌胚胎发育后囊胚发育率、细胞数、细胞凋亡率、自噬相关基因及细胞凋亡相关基因mRNA转录水平的影响。结果显示,热应激12h后囊胚发育率显著低于对照组(P0.05),冷应激18h后囊胚发育率显著低于对照组(P0.05),而冷应激组囊胚发育率高于热应激组。热应激12h和冷应激18h后均导致囊胚内细胞数显著低于对照组(P0.05),细胞凋亡率显著高于对照组(P0.05),且冷应激组的细胞凋亡率低于热应激组。冷、热应激组自噬相关蛋白LC3的表达均高于对照组;冷、热应激中自噬相关基因Atg6和Atg8的表达均极显著高于对照组(P0.01),Lamp2基因的表达均显著高于对照组(P0.05),热应激组中的Atg6和Atg8基因的表达高于冷应激组。通过检测细胞凋亡相关基因mRNA的转录水平发现,冷、热应激组中细胞凋亡相关基因Bak、Casp-3、Fas的表达均极显著高于对照组(P0.01),Bcl-xl基因的表达均显著低于对照组(P0.05)。综上,猪孤雌胚胎对冷应激(31℃)的耐受性比对热应激(41℃)强,且热应激可诱导体外培养的猪孤雌胚胎自噬及凋亡相关基因的表达,从而降低孤雌胚胎发育的能力。