燕麦ISSR反应体系的建立与优化

以10个燕麦品种的基因组DNA为模板,从退火温度、TaqDNA聚合酶、Mg2+、dNTP、引物5个方面对ISSR分子标记体系进行摸索并设计优化试验,建立了一套燕麦ISSR优化反应体系,即:25μl反应体系中,18.3μlddH2O,2.5μl 10×buffer,2.0μmol/L Mg2+,250μmol/L dNTP,1.5 U Taq DNA聚合酶,0.3μmol/L引物,10ng DNA模板。反应程序为:94℃预变性3 min;94℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸1 min,34个循环;72℃延伸5 min,4℃保存。     

环境因子对中国柽柳遗传变异的影响

分别以核糖体DNA(nuclear ribosomal DNA, nrDNA)的内转录间隔区(internal transcribed spacer regions, ITS)和两条叶绿体DNA(chloroplast DNA, cpDNA)片段—trnL-trnF, rps16为分子标记,研究了20个自然分布的中国柽柳群体遗传变异与环境因子和地理距离间的相关性。结果表明:ITS序列(616 bp)中共发现了10个多态位点,定义了11种单倍型;总核苷酸多样性和总单倍型多样性分别为2.170和0.814。两个cpDNA分子标记片段的拼接序列(1542 bp)中共发现了14个多态位点,定义了16种单倍型,总核苷酸多样性和总单倍型多样性分别为0.500和0.586。ITS遗传多样性与地理、气候和土壤因子间相关性分析显示:海拔、温度和经度是影响中国柽柳群体遗传变异的主要因素。在低海拔、温暖和靠海近的湿润东部群体,ITS遗传多样性较高。而cpDNA的遗传变异与各种环境因子间没有显著的相关性。Mantel检测发现中国柽柳ITS的遗传变异与地理距离显著正相关,而cpDNA的遗传变异没有显著的地理渐变趋势,该结果进一步揭示了中国柽柳强大的种子流在降低群体间遗传分化上发挥了重要作用。     

不同生长阶段猪粪四环素,头孢及双抗耐药细菌的数量比较研究

随着我国畜禽养殖业集约化规模化的发展,各种抗生素类化学药物的滥用问题日益明显,导致抗生素耐药菌株大量产生,这些耐药菌随动物粪便排出机体进入环境,可能扩散进入食物链,并对食品安全和人类健康造成严重威胁。本实验选取哺乳仔猪、断奶仔猪、育肥猪和空怀母猪四个生长阶段的猪粪便作为研究对象,采用微生物培养技术,较全面的监测和比较分析了不同生长阶段猪粪便中单一抗生素和多重抗生素耐药细菌的数量。结果表明:断奶仔猪粪便中四环素耐药细菌所占比例(73.02%)最大,育肥猪粪便中头孢耐药细菌占比(82.78%)最大,而双重耐药细菌主要存在于幼龄仔猪粪便中。本研究为猪不同生长阶段减抗低抗养殖提供了理论参考和依据。