猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流行性腹泻病毒双重TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为了建立快速、简便且能同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)和猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的方法,试验根据GenBank中已登录的PRRSV ORF7基因序列和PEDV N基因序列,设计2对特异性引物和2条TaqMan探针,通过优化扩增条件建立检测PRRSV和PEDV的双重TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,同时还进行了特异性、敏感性、重复性试验以及临床样品检测。结果表明:最终确立的20μL扩增体系中各引物和探针的加样量分别为:PRRSV-F 0.8μL,PRRSV-R 0.6μL,PRRSV-P 0.5μL;PEDV-F 1.2μL,PEDV-R 1.0μL,PEDV-P 0.7μL。(优化后的最佳扩增程序为:50℃反转录6 min;95℃预变性1 min;95℃变性10 s,55℃退火10 s,72℃延伸10 s,共40个循环)。检测PRRSV和PEDV的敏感性可分别达到1.05 TCID_(50)/100μL和3.16 TCID_(50)/100μL,该方法特异性好,不与其他常见猪病病原体发生交叉反应,批内变异系数和批间变异系数均不高于2.0%。用该方法对234份临床样品进行检测,PRRSV阳性样品15份, PEDV阳性样品20份,检出率高于常规RT-PCR方法。说明试验建立的双重TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法敏感性高,特异性好,可同时准确、快速检测PRRSV和PEDV。     

林业新技术(二则)

△巴西卡宾纳斯有一株从外地移植来的观赏树木,十五年来一直不开花,后经巴西针灸专家莱依达采用针灸法治疗,终于开出满树的花朵。莱依达认为,中国的「阴阳学说」,不仅适用于给人治病,同样适用于给植物治病。他对不开花或不结果的树木进行了针灸试验,把针灸穴位定在树的分杈处,对「阴失调」的树,就在分杈的内角扎进几根钉子对「阳失调」的树,则把钉子扎进分杈的外角。他的试验取得了令人难以置信的效果。△日本专家研制成一种能够快速鉴别树种的电子仪器。从热带雨林取来的不知名称的树叶,只要将其放在该仪器上,就能很快地鉴别出这是什么树的树叶。利用这种电子仪器鉴别树种,不仅可节省时间,而且还能充分掌握树种的分布情况。△最近由法国某公司研制成功了一个由一台水泵和台空气涡轮机组成的森林灭火设备。使用时,先将水注入空气涡轮机内,然后通过水泵成雾状喷出,射向火     

田阳县加大扶持贫困户发展山羊养殖方法的建议

正笔者参加了田阳县政协第八次会议第74号提案的答复工作,对政协委员提出的"关于加大圈养山羊扶持力度的建议",经实地调研和考察,并对照精准扶贫开发的相关政策,认为巴别乡要求加大圈养山羊扶持力度,通过山羊养殖脱贫致富的愿望是值得关注和支持的。为了拓宽群众的致富门路和正确引导山羊养殖的发展思路,现将扶持、指导巴别乡大力发展山羊圈养的建议归纳如下,以便广大养殖户参考和借鉴。     

菜园土是人工培育的肥沃土埌

蔬菜是人民生活不可缺少的食品。为了高速度地发展蔬菜生产,菜园土的培肥研究便显示极重要的意义。菜园土的发生密切受到人类活动的影响,由于长期栽培蔬菜,进行精耕细作(耕、磨、耙、耘、耥、平),大量施用有机肥料,合理灌溉等农业技术措施,引起土壤性质发生很大的改变,大大地加速土壤的熟化过程,使生土迅速变熟土,熟土迅速变油土。     

青石山水电站增容改建工程切割爆破拆除设计方案

一、工程概况青石山水电站位于甘南藏族自治洲临潭县新堡乡境内的洮河干流上。已建电站是利用长约8km的河曲截弯取直,引水发电,利用水头约26.0m,设计引水流量57.9m3/s,装机12MW。主要建筑物有溢流坝、泄冲闸、进水闸、动力渠道、引水隧洞、前池、厂房     

哺乳仔猪断奶后的疾病

1前言 曾经有人跟我说过一句话:“猪的出生有2次”.虽然后来明白了其中的含义,但刚听到这句话时,脑海中却浮现出许多的问号. 本文的题目是有关仔猪断奶后会发生的疾病.即使在科技相当发达的今天,仔猪也是要在母猪体内经过大约114 d的妊娠期才会生出来,这就是所说的第一次诞生.然后,刚出生的仔猪,能够从母猪那儿收到会影响其今后生长的重要礼物“初乳”.     

父亲的“小四轮”

1998年春节前夕,我因有许多事要处理,一直忙到腊月二十九才坐上回家的列车。车窗外大雪纷飞,漫山遍野银装素裹。我非常激动——一半缘于这美丽的雪景;一半缘于即将与家人团圆。     

两门课程教学效果差异的分析与探讨

本文对同学期开设的两门课程学生的缺勤情况、听课情况以及考试成绩等方面加以比较、分析，探讨了选修课出勤率低的某些原因，并探讨相应的对策。