小反刍兽疫病毒N蛋白抗体与H蛋白抗体在羊体内代谢消长规律的研究

为研究小反刍兽疫病毒N蛋白抗体与H蛋白抗体在羊体内的代谢消长规律,试验通过建立小反刍兽疫N蛋白双抗原夹心ELISA抗体检测方法、H蛋白阻断ELISA抗体检测方法与血清中和抗体试验方法,分别检测了羊免疫疫苗后体内N蛋白抗体与H蛋白抗体在每个免疫阶段的代谢消长变化。结果表明:羊免疫小反刍兽疫疫苗后,血清内的N蛋白抗体与H蛋白抗体在6~8周时血清抗体效价较高,对应的羊体内中和抗体效价为1∶512,且效价至少可以持续到10周以上,2种抗体具有一定消长代谢规律的相关性。该研究结果也为以N抗原与H抗原为基础建立相应的抗原捕获ELISA方法、竞争ELISA检测方法、间接ELISA检测方法以及双抗原夹心ELISA检测方法奠定了一定的理论依据。     

小反刍兽疫病毒核衣壳蛋白抗原性与特异性的比较

为筛选建立小反刍兽疫病毒N蛋白双抗原夹心ELISA抗体检测方法的抗原原料,本研究通过优化大肠杆菌密码子、优化蛋白表达与纯化条件等方法,分别在pET-30a与pET-32a两个不同原核表达载体中成功获得了可溶性的小反刍兽疫核衣壳蛋白(N)。分别对重组大肠埃希氏菌pET-30a-(N)-BL21(DE3)株与pET-32a-(N)-BL21(DE3)株种子批的P7代与P20代进行蛋白诱导表达与抗原提取纯化,共获得6批小反刍兽疫病毒pET-30a-(N)蛋白与pET-32a-(N)蛋白,并对蛋白的浓度、纯度、抗原性和特异性进行检验。结果表明两个纯化后的重组抗原与羊小反刍兽疫病毒阳性血清有明显反应,具有较好的反应性,而与羊痘病毒阳性血清、羊口蹄疫病毒阳性血清、山羊关节炎/脑炎病毒阳性血清等特异性血清均无交叉反应,具有较好的特异性。本研究结果为今后以N蛋白为基础建立相应的抗原捕获ELISA方法,竞争ELISA检测方法、间接ELISA检测方法以及双抗原夹心ELISA抗体检测方法打下了坚实的基础。     

芽变毛白杨叶片诱导不定芽的研究

利用芽变毛白杨叶片作为外植体进行不定芽的诱导，研究接种叶片的不同部位及培养基中不同激素水平对不定芽生成量的影响。试验结果表明：选取叶片的顶部及叶柄部进行诱导，产生不定芽数量多于叶中部；诱导不定芽最佳培养基MS 6-BA1．0mg／L IBA0．1mg／L GA30．1mg／L，诱导率为83．3％。     

层次需求理论视角下的农村基督徒——以苏北H村日常基督教聚会点为例

H村位于江苏省东北部,L镇中心,是全镇人口最多的村庄,约1000余户,4000余口人。H村是一个信仰典型,该村没有传统的道教,佛教等,亦没有庙堂,在信仰方面,全村人主要分为两类,没有所谓的信仰,或者信仰基督教。本文力图通过对H村W日常基督教聚会点场所的选定与聚会流程,成员的发展,相关“约定”、经费、特点等几个方面进行深入分析。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光微球抗体检测方法的建立

为建立一种荧光微球免疫层析方法用于猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）抗体检测,将兔抗羊二抗和重组N蛋白分别作为质控线（C线）和检测线（T线）,喷涂于硝酸纤维素膜上,通过优化反应条件,建立了PRRSV荧光微球抗体检测方法,采用ROC曲线确定本方法的判定临界值,并对其敏感性、特异性、重复性及符合率进行了分析。结果显示:本研究建立的PRRSV荧光微球抗体检测方法能够检测到32倍稀释的阳性血清,对猪伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型阳性血清的检测结果均为阴性;重复性试验结果的变异系数为3.7 1%～8.99%;与美国爱德士试剂盒的符合率为91.30%,具有较高的一致性。结果表明,本研究建立的PRRSV荧光微球抗体检测方法性能稳定、结果可靠,为PRRSV抗体快速检测提供了新方法。