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为了研究欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)辽宁分离株的遗传变异情况及分子生物学特征,根据欧洲型PRRSV标准毒株LV设计15对引物,对LNEU12毒株全基因分段进行扩增并测序,将测序结果依次拼接得到病毒的全基因,然后进行序列的比对分析。结果表明:LNEU12毒株基因全长为15 398 nt(不含3'尾端序列),与LV毒株同源性为90.1%,其中NSP2和ORF3/4重叠区域缺失21 nt,ORF6、ORF7较为保守。根据基因变异特点和遗传进化亲缘关系推测LNEU12辽宁分离株为欧洲型PRRSV变异毒株。 相似文献
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采用SOE-PCR方法将编码欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白的aa2~12和aa40~46核苷酸片段进行重复串联,获得编码双表位重复串联基因NE,构建表达载体pGEX-4T-1-NE,将其转入BL21(DE3)pLysS菌中,获得融合蛋白。Western-blot检测结果表明,该融合蛋白可被欧洲型PRRSV阳性血清识别,而不能被美洲型PRRSV阳性血清、猪瘟病毒阳性血清和伪狂犬病病毒阳性血清识别。纯化所得的融合蛋白,为建立检测欧洲型PRRSV提供了抗原基础。 相似文献
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试验旨在研究杂交野猪猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV) 辽宁分离株的遗传变异情况及分子生物学特征.用Marc-145细胞从辽宁某杂交野猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)病猪血液中分离到1株病毒,该分离毒株经Marc-145细胞6次传代后出现稳定的细胞病变,采用RT-PCR方法对分离病毒进行ORF6和ORF7基因的扩增、克隆和测序,并与已知序列毒株的相应片段进行同源性比对.结果表明,分离毒株的ORF6、ORF7基因与国内外美洲型毒株的核苷酸同源性分别为96.0%~100.0%、94.5%~99.4%;氨基酸同源性分别为89.6%~100.0%、87.3%~98.7%;与欧洲型代表毒株LV的ORF6、ORF7基因差异较大,核苷酸同源性分别为70.4%、70.1%,氨基酸同源性分别为48.8%、49.7%.推测辽宁杂交野猪体内分离毒株在基因型上属于美洲型毒株. 相似文献
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