河南省驴寄生圆线虫的种类记述——杯冠属Cylicostephanus

为了明确河南省驴寄生圆线虫的种类,为圆线虫的分类研究和防治提供依据,于2006-2007年,对河南省几个地区34头驴体内寄生圆线虫的感染情况进行了调查,共发现22个种,隶属于2亚科7属。对杯冠属Cylicostephanus的4种线虫:小杯杯冠线虫Cylicostephanus calicatus、高氏杯冠线虫Cylicostephanus goldi、长伞杯冠线虫Cylicostephanus longibursatus和微小杯冠线虫Cylicostephanus minutus进行了观察和描述。     

3种冠环线虫rDNA-ITS的PCR扩增及序列分析

本试验利用PCR扩增3种冠环线虫5个样品的核糖体DNA内转录间隔区(ITS)及5.8S片段,将PCR扩增产物纯化后直接进行序列测定和分析。序列比对和分析结果显示,所测样品ITS1-5.8S-ITS2的长度范围为748~843 bp,总变异位点(包括gaps)119个,简约信息位点18个;其中ITS1和ITS2的长度范围分别为367~370 bp和228~320 bp,变异位点分别为14个和105个,简约信息位点均为9个。所有测试样品的5.8S片段完全相同,长度为153 bp。5条序列ITS1区的G+C含量(48.0%~48.5%)明显高于ITS2区(37.7%~40.3%)。通过序列两两比对,3种冠环线虫ITS1和ITS2的种间差异性分别为1.9%~3.5%和5.6%~31.8%;而种内差异性分别为0~0.5%和0~0.9%。并且所测序列与GenBank中已知序列的同源性为99.07%~99.41%。本研究认为,ITS序列可以作为冠环线虫种类鉴定的分子标记。