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南瓜SRAP扩增体系与扩增程序的优化 总被引:4,自引:1,他引:3
利用L45正交设计对影响南瓜SRAP反应体系的MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq酶含量、引物浓度及模板DNA浓度等5个因素进行了筛选,快速得到稳定性和重复性好的南瓜SRAP扩增体系。对复性温度、PCR循环次数等影响南瓜SRAP扩增结果的重要因素进行了优化。最终优化的南瓜SRAP反应体系为25μL反应液中:10×buffer2.5μL,0.2 mmol/L dNTPs,引物0.2μmol/L,1.5 mmol/LMgCl2,DNA模板6 ng/μL,Taq酶1.5 U。本研究最终确立的PCR反应程序为:94℃预变性5 min,94℃变性40 s,35℃退火40 s,72℃延伸90 s,进行5个循环,94℃变性40 s,50℃退火40 s,72℃延伸90 s,进行32个循环,最后72℃延伸5 min。在此条件下得到的SRAP标记可为南瓜遗传多样性、分子标记及辅助育种等研究提供稳定有效的手段。 相似文献
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雪峰蜜3号系湖南省瓜类研究所以2个高代自交系NX1818和M8255为亲本选育出的杂交一代网纹甜瓜新品种。2003-2004年参加品种比较试验,2005-2006年参加国家甜瓜品种区域试验、生产试验,其主要特性为:中晚熟,全生育期100~115d,果实发育期43~48d;生长势较强,易于坐果;果实圆形,果皮灰绿色,细密网,上网易,商品率高;果肉淡黄绿色,肉厚3.5cm,中心可溶性固形物含量13%~18%,肉质香脆;单果重1.0~1.6kg,667m2产量2450kg左右,高产在3800kg以上;耐贮运,抗病性强,适应性广。2006年通过全国西瓜甜瓜品种鉴定委员会鉴定。 相似文献
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