基因表达调控的研究发展

生物生活在不固定的环境条件下,需要随时根据环境的改变而调整自身基因的表达,以使自己可以迅速适应环境的改变,从而可以正常的生存和繁殖后代。基因表达的概念是有遗传信息的基因需要经过转录和翻译来完善自己从而使自己可以发挥生物学功能。基因为了让它的表达过程和效率在空间和时间上保持有序的状态以及在面对环境的改变时可以迅速作出反应来调整自己而需要受到细胞内外因子的严格调控。具有一定的功能的蛋白质是基因表达的生成品。基因表达的过程相当复杂,具体的步骤如下:(1)将基因改变成前体m RNA(2)将前体m RNA加工为成熟的(3)降解m RNA(4)翻译m RNA(5)加工多肽链(6)蛋白质的降解。生物体的基因表达调控的过程是高精度而又严密的。     

猪急性腹泻综合征冠状病毒SYBR Green荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为建立快速、灵敏且特异的检测猪急性腹泻综合征冠状病毒（swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV）检测方法,本试验扩增SADS-CoV N基因保守区域将其克隆至pMD18-T载体。所构建的重组质粒pMD18-T-SADS-qN作为阳性质粒标准品,以其为模板建立一种SYBR Green荧光定量PCR检测方法。结果显示,所建立方法在3.31×10¹~3.31×10⁷拷贝·μL^-1模板量时,呈良好的线性关系,相关系数（R²）为0.997,斜率为-3.318。该方法特异性检测SADS-CoV;而猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）检测结果均为阴性。所构建的标准品检测灵敏度下限可以达到3.31×10¹拷贝·μL^-1,组内和组间变异系数均小于1%,表明其具有良好的灵敏性和重复性。用该方法检测SADS-CoV感染IPI-2I和IPEC-J2细胞后不同时间点和不同接毒剂量的复制情况,结果显示,SADS-CoV感染细胞后2 h病毒含量较低,在12~36 h病毒含量迅速增长,36 h后增长速度减缓且病毒含量维持在较高水平。分别用0、0.1、1 MOI SADS-CoV感染细胞结果显示病毒的mRAN转录水平呈现剂量依赖性增加,当MOI为1时,IPI-2I和IPEC-J2细胞病毒含量分别为10^6.7、10^5.3拷贝·mL^-1。进一步利用所建立的方法对经口服攻毒SADS-CoV仔猪的临床样本进行检测,结果发现病毒在空肠回肠含量较高,表明病毒主要定殖于空肠和回肠。综上表明,本研究建立SYBR Green荧光定量PCR检测方法能灵敏特异地检测SADS-CoV,为SADS-CoV的诊断和病毒相关基础研究提供可靠的检测手段。     

大肠杆菌的革兰氏染色四步法与三步法的比较和分析

大肠杆菌病是一类重要的人畜共患病,是由大肠埃希氏杆菌某些血清型菌株所引起的一类疾病的总称,能引起许多不良的临床症状。大肠杆菌病制约着我国畜牧业的发展,给养殖场以及养殖从业者带来严重损失。革兰氏染色法是广泛使用的一种细菌鉴别染色法,能使大肠杆菌(革兰阴性菌)显红色。我们通过实践与探究对革兰氏染色法进行了改良,改良的革兰氏三步法的染色技术更容易掌握,制片成功率高,以期为兽医工作者提供参考,合理安排时间,提高效率。     

一例犬瘟热和细小病毒混合感染水貂的病例诊治

诊断由规模化养殖场送来的六只已死亡水貂,在养殖场的死亡前期,精神沉郁,上吐下泻,粪便呈红褐色,不采食,高热,肌肉震颤并发出怪叫。眼圈周围出现大量分泌物;面部肿胀;爪子的角质层增厚。根据临床症状和流行病学资料,初步诊断为犬瘟热和感染细小病毒,在经过实验室诊断之后确认。最后根据症状提出了有效的治疗方法以及预防方法。