鹅FSHβ基因克隆及序列分析

促卵泡激素β亚基(FSHβ)基因是动物繁殖性状的一个重要候选基因,对鹅产蛋量具有重要的调节作用。本研究以鹅垂体组织总RNA反转录的cDNA为模板,分别采用RT-PCR和RACE技术扩增鹅FSHβcDNA序列,包含:16 bp 5′UTR,396 bp开放阅读框(ORF)和3′端非翻译区2个不同的剪接体,其大小分别为518 bp和780 bp。经生物信息学软件分析,发现鹅FSHβ基因编码的蛋白为亲水蛋白,且存在信号肽序列切割位点,则推测其为分泌蛋白。本研究首次成功获得了鹅FSHβ基因的cDNA全长序列并进行了分析,可为全面解析鹅FSHβ基因的分子结构及功能提供一定的参考。     

鸭CYP7_α1基因克隆、序列分析及组织表达研究

旨在克隆鸭胆固醇7α羟化酶1(CYP7α1)基因,并进一步探讨该基因的结构与功能,揭示其组织特异性表达规律。本研究以樱桃谷鸭为材料,运用同源序列克隆结合RACE技术,对鸭CYP7α1基因的cDNA全长进行克隆,并对其进行生物信息学分析及组织表达的研究。结果表明:鸭CYP7α1基因cDNA全长2 351bp,最大开放阅读框(ORF)1 539bp(114～1 652bp),共编码512个氨基酸;鸭CYP7α1氨基酸与鹅的同源性最高(97.5%),其次是鸡(92.8%)、人(67.3%)、猪(66.5%)、兔(65.7%)、大鼠(65.5%)、小鼠(65.5%)和牛(65.1%);经预测鸭CYP7α1蛋白可能含有1个P450超家族结构域;鸭CYP7α1基因在肝脏中呈高丰度表达,在其他9个组织中均未检测到或检测到少量表达,表明该基因的表达具有组织特异性。     

广丰白翎鹅体重与体尺性状指标主成分分析

本研究测定了5.5月龄广丰白翎鹅体重与体尺性状指标,并进行了体重与体尺性状的主成分分析。结果表明,母鹅的体重与体斜长、龙骨长、胫围、跖长存在极显著相关(P＜0.01),与其他各体尺指标均无显著相关性;公鹅的体重与体斜长、龙骨长、胫围、半潜水长、跖长、骨盆宽、胸宽存在极显著相关(P＜0.01),与颈长显著相关(P＜0.05)。从主成分的特征根和贡献率来看,第Ⅰ主成分主要反映体型外貌特征,第Ⅱ主成分主要反映体躯特征,第Ⅲ主成分主要反映颈部特征,第Ⅳ、第Ⅴ主成分主要反映胸部特征。广丰白翎鹅的体重和大部分体尺性状有显著相关关系,因此主成分分析指标对广丰白翎鹅的选种选育具有重要的意义。     

日粮中添加微生态制剂对樱桃谷鸭生产性能的影响

试验旨在研究日粮添加不同水平微生态制剂对樱桃谷鸭生产性能的影响,确定最佳添加水平。选用1日龄樱桃谷鸭750只,随机分成5个组(试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组,Ⅴ组为对照组),每组设3个重复,每个重复50只。分别在基础日粮中添加500、1000、1500、2000和0 mg/kg微生态制剂,饲养至42日龄。结果表明,添加1000和1500 mg/kg的微生态制剂促生长效果显著高于对照组(P<0.05);添加1000 mg/kg微生态制剂的肉鸭全程料重比最佳;添加500 mg/kg的微生态制剂组对肉鸭增重不明显;添加2000 mg/kg的微生态制剂组优于对照组和500 mg/kg添加组,但差异不显著(P>0.05)。因此,日粮微生态制剂能促进樱桃谷肉鸭的增重、降低料重比,从而提高其生长性能、产肉性能及养殖效益,1000 mg/kg微生态制剂能取得最佳料重比和经济效益,1500 mg/kg微生态制剂能取得最佳产肉性能,由此可知,添加1000 mg/kg微生态制剂为最佳添加水平。     

斑嘴鸭线粒体全基因组序列测定及分析

根据斑嘴鸭(Anas poecilorhyncha)同属近缘物种绿头鸭(Anas platyrhynchos)线粒体基因组(mt DNA)序列设计引物,采用直接测序技术对斑嘴鸭mt DNA全序列进行综合分析。结果显示,斑嘴鸭mt DNA序列全长16 606 bp,包含22个tRNA、2个rRNA基因、13种蛋白质编码基因和1个D-loop区。碱基组成T为22.2%,C为32.8%,A为29.2%,G为15.8%,无明显的AT偏好性,22种tRNA都为典型的三叶草结构。参照棕头鸦(Larus brunnicephalus)、黑尾地鸦(Podoces hendersoni)的12S rRNA,对斑嘴鸭12S rRNA的二级结构进行预测,结果其含有4个结构域,37个茎环。对D-loop控制区序列分析发现含有goose hairpin,E-box,F-box,D-box,Bird similarity-box及CSB1-box。并以原鸡作为外群,采用N-J算法和ML算法,基于mt DNA全序列及D-loop区分别构建系统进化树,发现3个家鸭品种与绿头鸭亲源关系较近。     

鹅FSH基因原核表达

促卵泡激素（follicle stimulating hormone,FSH）作为调节家禽卵泡发育重要的候选基因,但FSH在生物体内的半衰期非常短,本试验将具有延长基因半衰期作用的CTP序列添加到鹅FSH基因各亚基的C末端进行基因融合,以期获得pET32a-FSHα-CTP、pET32a-FSHβ-CTP和pET32a-FSHβ-CTP-α重组蛋白。设计去除目的基因信号肽和含有酶切位点的特异性引物,经融合PCR扩增获得了目的基因FSHα-CTP、FSHβ-CTP和FSHβ-CTP-α,通过构建原核表达载体pET32a-FSHα-CTP、pET32a-FSHβ-CTP和pET32a-FSHβ-CTP-α,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）中,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测,蛋白纯化。结果显示,3个融合蛋白FSHα-CTP、FSHβ-CTP和FSHβ-CTP-α的IPTG最佳诱导时间分别为4、5和5h,最佳诱导浓度分别为0.2、0.8和1.5mmol/L,且都是以包涵体形式存在,相对分子质量分别为32 000、35 000和46 000,与预期大小一致。结果表明,本试验成功构建了鹅pET-32a-FSHα-CTP、pET-32a-FSHβ-CTP和pET-32a-FSHβ-CTP-α的原核表达载体,并对它们的重组蛋白进行了纯化,为开展鹅FSH的基因免疫研究和鹅rFSH生物制剂研发奠定基础。     

大余麻鸭的体尺性状指标与体重的主成分分析

为了通过对大余麻鸭体尺和体重的测定和主成分分析,给大余麻鸭的选育和综合评价提供基础,试验选取500日龄120只(公、母各60只)大余麻鸭进行体重与体尺测量,采用SPSS软件进行统计分析。结果表明:公、母鸭间除胫围无显著差异外,其他指标公鸭均极显著(P≤0.01)或显著(0.01P≤0.05)高于母鸭,公鸭体重与体斜长、龙骨长、胫围、半潜水长、胸深、趾长均极显著相关(P≤0.01),母鸭体重与其他体尺指标的相关情况与公鸭大致相同,但与胸深无显著相关。说明公鸭的体重和绝大部分体尺指标极显著大于母鸭(P≤0.01),体重与骨架结构的关系很大,均可由各体尺指标来估算。对公鸭的体型性状进行选育时至少应包括体重、体斜长、龙骨长、胸宽、胸深、骨盆宽6个指标;对母鸭至少应包括体重、骨盆宽、半潜水长、龙骨长、胫围、趾长6个指标。