荣昌猪白细胞介素-2受体γ链基因克隆、表达与鉴定

运用RT-PCR技术从由刀豆蛋白(ConA)诱导培养的荣昌猪外周血单核淋巴细胞(PBMC)扩增出猪白细胞介素-2受体γ链基因的完整开放阅读框(ORF),长约1 107 bp,编码由368个氨基酸残基组成的相对分子质量为41 780的蛋白多肽.荣昌猪IL-2Rγ与人、猕猴、牛、犬、鼠在氨基酸水平上的同源性分别为81.6%,80.8%,85.1%,83.2%和68.8%.运用PCR技术从含荣昌猪IL-2Rγ,开放阅读框序列质粒中扩增其成熟蛋白编码基因,共1 020 bp.将其定向克隆于原核表达载体pET-32a(+)后在E.coli BL21中诱导表达,SDS-PAGE结果显示表达的融合蛋白约为52 000,重组蛋白以包涵体的形式表达,表达产物约占茵体总蛋白的37.6%;Western-blotting分析表明,在相对分子质量52 000处有一奈特异性的带;对γ诱导重组茵进行转录检测得到约1 020 bp的特异性片段.     

胸膜肺炎放线杆菌外膜脂蛋白的原核表达及免疫原性分析

以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清1型SC-A株基因组DNA为模板,用PCR扩增外膜脂蛋白(OML)基因特异片段,并克隆于pMD18-T中,经酶切及核苷酸序列分析鉴定后,亚克隆于原核表达载体pET-32 a(+),成功构建了重组表达载体pET-mOML。以此转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白(TRX-mOML)分子质量约为60 ku,表达产物主要以包涵体形式存在,采取非变性电泳方法对蛋白进行纯化,经ELISA检测,重组OML免疫小鼠可产生较高水平的抗OML抗体,这表明重组OML有较好的免疫原性。     

一株四川株猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定

猪传染性胸膜肺炎的病原为猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App),该菌为革兰阴性,有荚膜、菌毛和鞭毛,形态较小,呈多形性.近年来,全国很多省份都有猪传染性胸膜肺炎的发病报道.随着临床混合感染和细菌耐药性的增加,迫切需要对细菌进行分离鉴定,最终找到控制或消灭该病的方法.     

猪伪狂犬病毒载体的研究进展

随着生物技术的发展以及对伪狂犬病毒研究的不断深入,PRV载体研究成为病毒载体研究领域的一大热点.通过基因工程技术使PRV中的毒力基因失活,使病毒的毒力减弱,但病毒粒子仍然保持良好的抗原性,能够有效地刺激机体产生免疫应答.重组病毒粒子同插入的外源基因一起在动物体内表达不仅十分安全,还可以做到一针多防,提高生产效率.PRV载体在基因表达、载体疫苗研制、基因投递和基因治疗等方面都显示了很好的优越性.就伪狂犬病毒载体研究进展作一综述.