猪链球菌病的防治

猪链球菌病是由链球菌引起的人畜共患的一种传染病。链球菌可引起猪的许多疾病,通常以败血症、脑膜炎、关节炎、淋巴结炎为主要特征。Ⅱ型链球菌可引起猪的急性败血性死亡。1治疗近年来,由于链球菌对多种抗生素产生耐药性,给临床治疗增加了难度。为此,最好经药敏试验选用敏感的     

猪伪狂犬病毒H株gE基因的克隆及序列分析

参照已发表的扩增伪狂犬病毒gI和gE部分基因的PCR方法,合成了一对引物,以PRV H株细胞毒为模板,扩增出一条约850 bp的片段,并进行克隆和测序。然后与GenBank上国内外其它毒株gE基因进行核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性分析,构建了遗传进化关系图。结果表明,PRV H株与其他15株PRV核苷酸和氨基酸的同源性分别为 97.0%～99.2%和93.2%～98.5%,其中与SH株最近,分别为99.2% 和98.5%;进化树分析表明,该毒株与目前国内流行的毒株在同一进化分支内,与国外毒株分属不同分支,说明分离的H毒株与目前国内流行的毒株一致。     

猪伪狂犬病毒H株gE基因的克隆及序列分析

参照已发表的扩增伪狂犬病毒gI和gE部分基因的PCR方法,合成了一对引物,以PRV H株细胞毒为模板,扩增出一条约850 bp的片段,并进行克隆和测序。然后与GenBank上国内外其它毒株gE基因进行核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性分析,构建了遗传进化关系图。结果表明,PRV H株与其他15株PRV核苷酸和氨基酸的同源性分别为97.0%~99.2%和93.2%~98.5%,其中与SH株最近,分别为99.2%和98.5%;进化树分析表明,该毒株与目前国内流行的毒株在同一进化分支内,与国外毒株分属不同分支,说明分离的H毒株与目前国内流行的毒株一致。     

兽用生物制品使用应注意的事项

我国是农业大国,其中畜牧业的发展也尤为壮大。近年来,我国养殖业呈现蓬勃的发展状态,饲养的动物数量不断增加,加速了我国兽用生物制品行业的发展。在我国,从事兽用生物制品生产的企业很多,生物制品的种类繁多,临床生产中必须正确的应用才能获得预期的效果。主要分析兽用生物制品的使用注意事项,以指导临床实践生产,供参考。     

猪细小病毒H株在不同细胞上增殖特性的比较

正猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)是引发猪细小病毒病的病原体,可引起胚胎的感染、死亡,母猪不表现比较明显临床症状的繁殖障碍性疾病。目前接种疫苗仍是解决本病的最好方案。为生产出优质的疫苗,需要摸索PPV毒株在不同细胞系上的增殖情况,如不能掌握其规律,生产出足够的抗原,将难以用于生产。PPV只能在猪的细胞和人的某些传代细胞中增殖,且在不同细胞上的生物学特性也不尽相同。通     

不同消化液对鸡胚成纤维细胞贴壁率的影响

细胞是培养和研究病毒及制造病毒疫苗的有效工具,细胞培养还广泛地应用于病毒的分离、鉴定,人工感染制成的弱毒疫苗和灭活疫苗以及筛选异源和同源的弱毒株都离不开细胞的培养工作。利用细胞培养技术已经生产出多种生物制品,随着病毒学等研究工作的发展，鸡胚成纤维细胞培养工作越来越受到重视，采用不同的消化液对长成单层的成纤维细胞进行消化，通过消化后细胞的贴壁率比较其优缺点，     

当前鸡病流行的特点及防治建议

目前，随着养殖的规模化、集约化，家禽疾病逐渐趋于低龄化、复杂化，尤其是鸡的疾病越来越趋于复杂化，一旦发病，很难根除，大大降低了经济效益。现将鸡在生产过程中疾病流行的新特点介绍如下，供广大养殖场（户）参考。     

牛冠状病毒S基因的序列分析及原核表达

为了解牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)的S基因变异情况并建立ELISA检测方法,本研究对采自不同牛场的新生犊牛腹泻(CD)和成年牛冬痢(WD)腹泻样本提取总RNA,反转录合成cDNA,利用PCR扩增S全基因和S1基因。将S1基因目的片段连接表达载体pET-32a(+),并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经PCR、双酶切及测序验证正确后,进行IPTG诱导表达。结果显示,CD与WD分离株S基因核苷酸为98.4%,CD和WD分离株与参考毒株BCoV-ENT株核苷酸同源性最高,分别为98.4%和98.5%,CD分离株与参考毒株SUN5株的同源性最低,为97.5%,WD分离株与FRA/EPI/Caen/2003/13同源性最低,为97.3%。通过比对可知,分离株与已知毒株之间存在较大差异,为疫苗候选毒株筛选提供依据。本试验同时构建了pET-32a-S1表达载体,在0.2mmol/L IPTG诱导5h时,重组菌能在大肠杆菌BL21感受态细胞中产生大量的S1融合蛋白,获得约58ku表达产物。本试验成功表达了S1蛋白,并对BCoV进行了核苷酸进化分析,为疫苗免疫效果评价方法的建立奠定了基础。     

猪细小病毒L株VP2基因片段的克隆及序列分析

对自行分离的PPVL株VP2基因片段进行克隆和测序。序列分析表明:L株VP2基因片段与其他PPV毒株的VP2基因片段的核苷酸同源性均在99.19%以上,氨基酸同源性在98.87%以上。表明L株与国内流行毒株之间同源性极为接近,其中与NADL-2(4973)株的亲缘关系最近(核苷酸同源性为99.81%,氨基酸同源性为99.62%)。在决定毒株组织嗜性的关键氨基酸位点上(378,383及436),L株与NADL-2株相同,据此推测L株的毒性与组织嗜性可能与NADL-2相似。     

猪细小病毒H株ST细胞系高敏感性细胞的克隆

正利用有限稀释法和单细胞显微操作法从现有ST细胞系中克隆出一株对猪细小病毒H株具有高敏感性的细胞克隆株ST-5,初步研究该克隆株对猪细小病毒H株增殖的特性及稳定性。该克隆株连续传代20代后对猪细小病毒H株感染性不变,病毒滴度最高可达107.0TCID_(50)/mL。这一研究结果将有利于开发高效价的猪细小病毒H株灭活疫苗。1材料和方法1.1试剂培养液MEM(G ibco);胎牛血清FBS(Gibco);二甲基