朝鲜鹌鹑遗传多样性微卫星标记分析

选用鹌鹑上的12个微卫星位点,对随机选取朝鲜鹌鹑的40个个体进行多态性检测,共检测到55个等位基因,每个座位平均等位基因数为4.583个。该群体平均多态信息含量和平均杂合度分别为0.6945和0.7111,表明朝鲜鹌鹑属多态性较丰富的群体。     

雌激素受体在鸡与鹌鹑属间杂交早期胚胎中的差异表达及其作用

旨在研究雌激素受体（ER）与鸡-鹌鹑属间杂交早期胚胎发育、性别分化的关系。人工授精获得鸡（♂）-鹌鹑（♀）杂交种蛋，按照鸡的孵化标准同批入孵，连续采集早期活胚（2．75、3．00、3．25、3．50、3．75、4．00、4．25、4．50、4．75、5．00d），采用RT—PCR法，用Wpkci和β-actin引物进行多重PCR，鉴定早期胚胎性别；之后选取各时间点雌、雄胚胎各4枚，以β-actin为内标，测定ER mRNA相对表达丰度。雌、雄胚胎ER mRNA的发育性变化趋势基本一致，2．75～3．00d表达水平均较高；3．25d雄性表达水平显著降低（P〈0．05），雌性则极显著降低（P〈0．01）；3．50d雌、雄表达水平又回复至较高水平；3．75d二者均极显著降低（P〈0．01），此后一直维持在较低水平。不同日龄间比较，2．75～3．50d雌性ER表达高于雄性，差异极显著（P〈0．01）。杂交胚胎性分化时间大致开始于胚胎发育的第2．75～3．50d，性分化期ER的异常表达可能与胚胎死亡、杂种不育有关，这一结论有待于进一步研究发育同期鸡、鹌鹑胚胎ER的表达及其功能后证实。     

铁对泌乳期小鼠乳腺中乳铁蛋白基因mRNA水平的影响

探讨铁对小鼠乳腺中乳铁蛋白(lactoferrin,LF)mRNA基因表达的影响。选取雌性昆明白小鼠40只,随机分成5组,按实验动物标准饲养,各处理组添加不同水平和来源的铁:硫酸亚铁(Fe0mg/kg)、硫酸亚铁(Fe60mg/kg)、硫酸亚铁(Fe120mg/kg)、甘氨酸铁(Fe120mg/kg)、甘氨酸铁 硫酸亚铁(Fe120mg/kg)。配种、产仔,于哺乳21d后处死取样,用相对定量RT-PCR方法,以β-actin作内标,测乳腺LFmRNA丰度。试验表明,不同来源和剂量的铁可不同程度影响LFmRNA的表达,甘氨酸铁(Fe120mg/kg)组较对照组差异达极显著水平(P<0.01)。因此,甘氨酸铁可显著提高乳腺中LFmRNA的表达量,作为有效铁补充剂的同时可能促进乳汁中LF的含量。     

鸡与鹌鹑属间杂交早期胚胎bcl-2、P53基因表达的差异及发育性变化

 【目的】探讨细胞凋亡因子bcl-2、P53对鸡与鹌鹑属间杂交早期胚胎发育的影响。【方法】人工授精获得鸡（♂）与鹌鹑（♀）杂交种蛋,按照鸡标准孵化条件同批入孵,随机采集66、72、78、84、90、96、102、108、114、120 h活胚。采用RT-PCR方法,用Wpkci和β-actin引物进行多重PCR鉴定胚胎样本性别,后选取各时间点雌、雄胚胎各4枚,以β-actin为内标,测定bcl-2、P53的mRNA相对丰度。【结果】（1）雄性胚胎66～114 h bcl-2 mRNA表达维持在较低水平,96 h 有所降低,随后回升到原水平,120 h 极显著升高（P＜0.01）,达到峰值;雌性胚胎66～114 h bcl-2 mRNA表达维持在较低水平,114 h 极显著升高（P＜0.01）,此后维持在较高水平,120 h 达到峰值。不同日龄之间的比较,114 h雌性表达显著高于雄性（P＜0.05）;（2）雌、雄胚胎P53 mRNA发育性表达模式基本一致。66 h表达水平较高,72 h表达降低,达到低谷,雄性达到显著（P＜0.05）,雌性整体差异不显著,随后上升维持在原水平;不同日龄之间表达差异不显著。【结论】114 h雌性胚胎bcl-2 mRNA表达高峰点与其P53 bcl-2表达最低水平相吻合;72 h雌、雄胚胎 P53 mRNA表达与P53 bcl-2表达水平一致,处于低谷点;72、114 h早期杂交胚胎bcl-2、P53基因表达出现异常。     

鸡与鹌鹑属间杂交早期胚胎性别鉴定体系的建立与优化

研究参考鹌鹑Wpkci和β-actin基因设计引物,采用RT-PCR技术,旨在建立鉴定鸡(♂)与鹌鹑(♀)杂交后代早期胚胎性别的方法。Wpkci引物扩增已知性别鹌鹑及未知性别杂交种胚胎的cDNA,从母禽胚胎获得402bp和296bp两条特异性条带,而公禽没有得到条带。为进一步验证该鉴定体系的可靠性和稳定性,采用了多重PCR从母禽胚胎获得490bp、402bp、296bp三条特异性条带,而公禽只有490bp的内标条带。在对试验关键因素进行优化的基础上,建立了简单、快速、可靠、稳定的鉴定杂交种早期胚胎性别的方法。     

凋亡因子Bcl-2、P53及其在鸡上的研究进展

细胞凋亡（apoptosis）或程序化细胞死亡（progammed cell death，PCD）是多细胞有机体为调控机体发育和维护内环境稳定、由基因控制的细胞主动死亡的过程。1965年由发育生物学家Lockshin和Williams首先提出PCD一词。1972年Kerr等首次提出了细胞凋亡的概念，但在其后相当长时间内没有得到人们的重视。20世纪80年代至今，细胞学、遗传学、分子生物学等相关学科的发展，对细胞凋亡的本质有了逐步深入的了解，使得细胞凋亡成为当今生命科学研究热点之一。     

Wpkci基因用于鸡与鹌鹑属间杂交早期胚胎性别鉴定

 【目的】建立鉴定鸡（♂）与鹌鹑（♀）属间杂交早期胚胎性别的方法,检验早期胚胎性别比。【方法】人工授精获得鸡与鹌鹑杂交种蛋,按照鸡的标准孵化条件同批入孵,连续随机采集发育早期66、72、78、84、90、96、102、108、114、120 h活胚。采用RT-PCR方法,以已知性别的鹌鹑作外参照,β-actin引物作内参照,用鹌鹑Wpkci基因保守区设计的引物鉴定早期胚胎样本性别。【结果】Wpkci引物可以准确鉴定杂交胚胎的性别;早期胚胎性比率与理论值相比,差异极显著（P＜0.01）,雄性明显多于雌性;不同天数间性别比率差异不显著（P＞0.05）。【结论】利用Wpkci引物建立了一种简单、快速、可靠、稳定的鉴别杂交胚胎性别的方法;早期胚胎雌性死亡率明显高于雄性,雌性死亡率无特定高峰,需进一步研究。     

铁对鼠肝脏铁含量和TfR mRNA基因表达的影响

本文旨在考察铁对小鼠肝脏铁水平和TfR(transferrrin receptor)mRNA的影响,研究二者的关系。试验1选取40只昆明白雌鼠,随机分为5组,每组8只。对照组(处理1)饲喂不添加任何铁源的基础饲料,试验组(处理2、3、4、5)的饲料中分别添加硫酸亚铁(Fe60mg/kg)、硫酸亚铁(Fe120mg/kg)、甘氨酸铁(Fe120mg/kg)、甘氨酸铁 硫酸亚铁(Fe120mg/kg)。40d后处死取肝脏;试验2选取对照组子一代,不同铁剂处理,3d后处死取肝脏。测定肝脏铁含量;用相对定量RT-PCR方法,以β-actin为内标,测肝脏TfR mRNA丰度。结果表明:(1)试验1中,饲粮中添加不同来源和不同水平的铁能显著影响肝脏铁含量和TfR mRNA基因表达水平,处理组5较对照组相比差异极显著(P<0.01);(2)试验2中,子一代添加甘氨酸铁组和硫酸亚铁组间TfR mRNA基因表达水平差异不显著(P>0.05);(3)鼠肝脏铁含量与TfR mRNA的表达量成强负相关。铁可显著影响肝脏铁含量和TfR mR-NA表达量,二者成负相关。