17β- 雌二醇对鲻早期精子发生的影响及其作用机制

应用组织学和免疫组织化学的方法,对17β-雌二醇(E2)影响鲻(Mugil cephalus)早期精巢的精子发生及其作用机制进行了研究.饲喂含15 mg/kg和50 mg/kg 17β-雌二醇的饲料60 d,以不添加17β-雌二醇的饲喂组为对照.结果表明,幼鲻投喂含E2饲料前,对照组和实验组精巢均属早期精巢,胞囊中原始的精原细胞占优势,Sertoli细胞紧贴精原细胞.投喂含E2饲料后1个月,低剂虽组(15 mg/kg)的4尾幼鲻均出现精原细胞的有丝分裂,有丝分裂细胞的数量多于高剂量组(50 mg/kg),对照组精巢未见精原细胞的有丝分裂,说明E2能够诱发精原细胞的分裂.实验结束后投喂E2组精巢发育处在小生长期,可见精巢中有初级精母细胞存在于精小叶中,而埘照组刚刚出现精原细胞的发育分化.用雌激素受体α和β亚型抗体进行免疫组织化学染色发现,对照组和实验组早期精巢中的精原细胞和sertoli细胞均显示强的免疫阳性反应,这为E2诱发精原细胞有丝分裂的作用机制提供了新的形态学证据.     

日本鳗鲡产卵后生存及其繁育

为证明日本鳗鲡(Anguilla japonica)生活史最后一步一产后鳗的命运,本研究模拟产后的日本鳗鲡继续在海水中养殖,观察其存活率及繁育情况.结果表明,产后鳗在海水中停食约18 d后,体能得到恢复,部分亲鱼开始出现摄食,1个月左右全部恢复摄食,经244 d养殖,雌、雄鳗体质量增加,存活率达94.6%.随后,给产后鳗注射外源性促性腺激素(鲤鱼脑垂体匀浆CPE和人绒毛膜促性腺激素HCG)后激发其退化的性腺(卵巢和精巢)重新发育(与当年银鳗作对照).通过性腺组织切片观察产后鳗和对照鳗性腺发育成熟的全过程及其差异,发现产后鳗起初性腺发育比当年银鳗差,但经多次注射激素后,产后鳗性腺成熟与当年银鳗同步,证明产后鳗生殖细胞对激素的敏感件高.应用17α,20β-双羟孕酮和促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A3)使催熟的产后鳗和对照鳗均产卵和排精,并孵化出仔鱼,从而有力地证明,鳗鲡产后虽体质弱,但待体能恢复后能够继续生存和繁殖.本研究旨在探讨利用产后鳗作为今后鳗鲡人工繁殖亲鳗的可行性.     

17β－雌二醇诱导鲻鱼雌性化的机制：芳香化酶和雌激素受体双染定位研究

用免疫细胞化学双重染色技术和鼠抗人芳香化酶抗体、兔抗人雌激素α受体与β受体亚型(ER-α和ER-β)抗体、兔抗人雌激素(E2)抗体，对鲻鱼(Mugil cephalus)脑各部位进行定位研究。结果显示，芳香化酶和E2、芳香化酶和ER-α、芳香化酶和ER-β、ER-α和E2的双染免疫活性物质分布在鲻鱼嗅脑、大脑、间脑和小脑的神经细胞的胞核或胞质及其突起或神经纤维上。值得指出的是，鲻鱼下丘脑视前区芳香化酶免疫活性细胞上共存有雌激素α受体与β受体亚型，提示E2诱发鲻鱼雌性化的作用机制是，E2先与芳香化酶样神经细胞上的雌激素受体结合，而后激发与性分化相关的芳香化酶基因的表达。     

GnRH_A和紫萁抑制大黄鱼性腺早熟的机制

应用脑垂体组织生理学和免疫组织化学方法，对GnRH-A和紫萁抑制大黄鱼性早熟的作用机制进行了研究。结果表明，性早熟大黄鱼脑垂体许多促性腺激素分泌细胞的胞质出现空泡，提示性早熟的原因可能是由于GtH细胞提早进入分泌活动所致。长期服用促性腺激素释放激素类似物的养殖大黄鱼（没有性早熟），它的脑垂体GtH细胞对GnRH抗独特型发生弱的免疫阳性反应，而对照组性早熟鱼仍出现强的反应，表明实验组大黄鱼脑垂体GtH细胞对GnRH-A的应答能力下降，出现脱敏效应，这可能与GnRH-A抑制大黄鱼性早熟有关。养殖大黄鱼长期服用紫萁，它的脑垂体GtH细胞膜上GnRH受体则没有出现脱敏现象，提示紫萁抑制大黄鱼性早熟的机制不同于GnRH类似物，确切机制有待进一步研究。     

[09]17β- 雌二醇对鲻早期精子发生的影响及其作用机制

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外源性促性腺激素诱导日本鳗鲡卵子发生和卵巢发育成熟的机制

用兔抗促黄体素生成素受体(LHR)或称绒毛膜促性腺激素受体(CGR)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的抗体对LHR,ER和PR进行免疫组织化学定位。目的在于揭示外源性促性腺激素(鲤鱼脑垂体提取物,CPE和人绒毛膜促性腺激素,hCG)诱发日本鳗鲡卵子发生和卵母细胞成熟的内分泌机制。结果表明,注射激素前后卵巢发育和卵子发生出现了十分显著的变化。卵巢组织学切片观察显示激素处理前鳗鲡卵巢发育处于卵黄发生早期,卵母细胞平均直径(220±0.01)μm。第一次注射这两种激素后10d,实验组卵母细胞中卵黄核分散在核的周围,核仁数量显著增加,多达18～20个左右,而对照组8～10个。第3和4次激素处理后,卵母细胞发育进入卵黄发生早-中期至中期,卵黄颗粒数量增加。第6和7次激素处理后,卵母细胞进入卵黄发生中后期到成熟期,卵母细胞胞质中充满卵黄颗粒,胞径和核径增加,分别为(570±1.39)μm和(128±1.19)μm,而对照组没有变化。其次,免疫组织化学染色结果显示LHR、ER和PR均定位在鳗鲡卵巢中卵母细胞胞质、核膜、核质、卵被膜和体细胞上。这里值得指出的是,从第3次和第4次激素处理后,这三种受体的定位各有特点,L...     

大黄鱼脑垂体组织学与免疫组织化学

用组织学和免疫组织化学方法研究不同发育时期大黄鱼（Pseudosciaena crocea）脑垂体的形态结构和各种促激素分泌细胞的分布。结果表明：（1）大黄鱼脑垂体呈“鸡心“形,由神经垂体和腺垂体组成,腺垂体可分为前外侧部（RPD）、中外侧部（PPD）和垂体中间部（PI）。（2）RPD部有3种细胞,分别为催乳激素（PRL）细胞,促肾上腺皮质激素（ACTH）细胞,促性腺激素（GtH）细胞。（3）PPD部位于腺垂体腹面,也有3种细胞,其中1种为促生长激素（GH）分泌细胞,呈嗜酸性,另2种呈嗜碱性,分别为GtH细胞与促甲状腺激素（TSH）分泌细胞。（4）垂体中间部有2种细胞,1种为促黑激素（MSH）细胞,呈嗜酸性,另1种为GtH细胞,呈嗜碱性。随性腺发育成熟,大黄鱼GtH细胞的分布从中外侧部扩展至前外侧部和中间部背面;GtH细胞胞质空泡可作为其分泌活动的标志。     

真鲷消化道超微结构研究

近年来，利用电子显微镜进行鱼类组织学的研究，已有很多报道，这一方法已受到有关学者的广泛重视。真鲷(Payrosomus major)是福建沿海重要的养殖品种，具有很商的经济价值。在真鲷生长过程中，不同发育阶段的个体对饵料营养的需求不同，而真鲷食性的转变与其消化道结构的发育状况密切相关。本文通过对真鲷幼鱼，     

锯缘青蟹幼体饵料的营养强化

用酵母、水球藻、鱼油强化和豆油强化四种不同方式培养轮虫，再分别投喂锯缘青蟹幼体，分析测定轮虫和体的生化组成，结果显示，（1）不同方式培养的轮虫之间以及摄食这些轮虫的锯缘青蟹幼体之间的蛋白质含量都没有显著差异；（2）轮虫的脂类含量和脂肪酸组成与培养方式密切相关，小球藻轮虫的脂类含量最高，20：5n-3(EPA)占总脂肪酸的比例也最高 ，为18.05%，鱼油轮虫则含有最多的22：6n-3(DHA)，占总脂肪酸3.16%，脂类含量仅次于小球藻轮虫；（3）锯缘青蟹幼体的脂类含量和脂肪酸组成受相应饵料营养成分的影响。另外，幼体培育实验也发现，饵料营养成分影响幼体的存活率，结果表明，提高轮虫的EPA和DHA含量，尤其晨DHA含量，将有利于锯缘青蟹幼体的存活和发育。     

[07]5种胃肠激素样内分泌细胞在斜带石斑鱼稚鱼期消化道中的定位

应用免疫细胞化学SABC方法,用5-羟色胺(5-Hydroxytryptamine,5-HT)、生长抑素(Sonmtostatin,Som)、P物质(substance P,SP)、胃泌素(Gastrin,GAS)和神经肽Y(Neuropeptide,NPY)5种特异性哺乳类胃肠激素抗血清对斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)稚鱼期的消化道进行免疫细胞化学定位.结果显示,5-HT-和Som-样免疫活性细胞定位在斜带石斑鱼稚鱼的胃各部,包括胃贲门部、胃体和胃幽门部;SP-、GAS-样免疫活性细胞则在胃和肠均存在,其中SP-样细胞定位在胃体部和胃幽门部以及整个肠道,GAS-样细胞则从胃幽门部至肠道各段均存在;NPY-样免疫活性细胞仅在肠道中被检测到.根据这5种胃肠激素样内分泌细胞的形态、染色强度及其分布,可判断其在稚鱼期已经发育成熟,已像成鱼胃肠激素内分泌细胞一样,调节消化道的运动和消化液的分泌.本研究结果提示,斜带石斑鱼稚鱼死亡的原因可能与其胃肠激素样内分泌细胞的功能没有直接关系.