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[目的]利用搭桥PCR技术对蛋白质内含子HP进行改造。[方法]根据搭桥PCR中寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板的原则设计多对引物,通过多次PCR扩增获得目的基因片段,进而实现对蛋白质内含子HP在基因水平上进行多个位点同时定点突变和添加Linker。[结果]搭桥PCR产物克隆经DNA测序分析,证明蛋白质内含子HP内部的4个半胱氨酸成功突变成丝氨酸,几个PCR前体片段也无缝的融合成HP基因片段,而且没有引进任何其他突变;经DNA测序,46bp的DNALinker成功的插入到设计好的HP基因序列中,且没有任何碱基突变和错配。[结论]该研究不仅实现了对蛋白质内含子HP的快速改造,而且扩大了搭桥PCR的应用范围,同时也为蛋白质内含子的基础改造提供了低成本、简捷、高效的方法。 相似文献
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观察紫茎泽兰对中毒马肝肾功能的影响。以10匹病马作为实验组,无紫茎泽兰采食史的10只健康马作为对照组,采集马血清,检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)、镁、磷、钙等生化指标;结果显示,紫茎泽兰中毒马谷丙转氨酶水平升高214%,谷草转苷酶水平升高140%,碱性磷酸酶水平升高73%,谷氨酰胺基转移酶水平正常,尿酸含量正常,尿素氮含量正常,肌酐水平下降50%;血清学测定血清中钙、镁、磷的含量,其中镁离子和磷离子浓度升高,钙离子浓度正常。结果表明,紫茎泽兰可导致中毒马肝脏受到严重影响,肝脏机能障碍,对肾功能影响程度较轻。 相似文献
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正五味子为木兰科植物,其干燥成熟的果实有很高的药用价值,有收敛、滋补、生津、止泻等功效,随着自然资源的破坏和人工过度采栽,目前中药市场供不应求,人工栽培前景广阔,这是一个投资较大,周期长,收益可观的中药材项目。1选地整地育苗地应选择疏松肥沃,近水源且排灌良好的土地,老参地最好。翻耕后耙细,做成高15厘米,宽120~150厘米的畦施腐熟厩肥10~15千克。定植地除肥沃、排灌良好外,要求坡度 相似文献
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正榛树是我国北方多年生落叶灌木坚果树种,具有抗寒、耐旱、耐瘠薄、适应性强的特点,不仅具有防风固沙、保持水土、改善生态环境作用,还是重要的干果经济林树种,具有很高的经济价值,是调整农村产业结构、促进农民增收不可多得的经济树种之一。1.榛子园的建立榛子为榛科榛属落叶乔木或灌木。榛子是多年生植物,选择园址不但考虑气候、土壤等自然条件,还要考虑社会经济状况、交通运输等因素。慎重选址建园,以达到最佳 相似文献
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