‘黄花梨’2个CYP707A基因的克隆和序列分析

[目的]探讨脱落酸(Abscisic acid,简称ABA)分解途径关键酶基因(CYP707A)的特性,以期为揭示ABA调控梨花芽休眠进程的分子机制奠定基础.[方法]根据已公布的梨基因组数据库,通过本地blast的方法获得梨基因组CYP707A序列,运用DNAMAN软件设计引物,获得‘黄花梨’的2个脱落酸8’-羟化酶基因的CDS序列,分别命名为PpCYP707A4(Genbank登录号:KP279630)和PpCYP707A5(Genbank登录号:KP279631),并利用在线分析平台和生物软件进行生物信息学分析.[结果]PpCYP707A4的CDS序列全长分别为1 431 bp,编码476个氨基酸;PpCYP707A5的CDS序列全长为1425 bp,编码474个氨基酸,两者同源性94.27％,氨基酸相似性94.96％,两者与苹果的2个基因在系统发育树上分别独自聚为一小支.[结论] PpCYP707A4和PpCYP707A5为同属于梨PpCYP7074家族2个相似度较高的基因,它们可能发源于苹果和梨的共同祖先.     

山苍子雌花和雄花精油成分分析及抗氧化研究

采用水蒸气蒸馏法分别从山苍子雌花和雄花中提取精油，并通过GC-MS气质联用仪对其成分分析，从山苍子雌花精油中鉴定出47种化合物，占总峰面积的98.44％，山苍子雄花精油中鉴定出43种化合物，占总峰面积的98.04％。采用体外抗氧化活性测定法，表明山苍子雌花和雄花精油具有一定的抗氧化活性。还原力测定IC50值，雄花为2.330 mg/mL，雌花为1.473 mg/mL；清除DPPH自由基IC50值，雄花为41.62 mg/mL，雌花为9.663 mg/mL；清除羟自由基IC50值，雄花为56.95 mg/mL，雌花为77.98 mg/mL。     

国兰杂交品种(系)SRAP-PCR反应体系优化及引物快速筛选

以国兰杂交品种(系)为材料,采用L16(45)正交试验设计对Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、模板及引物等5个重要影响因素进行优化,确定国兰杂交品种(系)SRAP-PCR反应的最优反应体系为(25μL体系):Taq DNA聚合酶,1 U;Mg2+,1.8 mmol/L;dNTPs,0.08 mmol/L;模板DNA,100 ng;引物,上下游各0.3 mmol/L;10×PCR Buffer,2.5μL。此外,本试验采用DNA混合池技术(DNA pooling)快速筛选SRAP引物,从180对SRAP引物组合中筛选出39对扩增产物丰富、多态性高的引物组合。与常规方法相比,该技术明显缩短试验周期、节约了模板用量,为快速高效筛选SRAP引物提供了新思路。