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优化了重组茶树咖啡酰辅酶A–O–甲基转移酶基因(CCoAOMT)在大肠杆菌中的表达,采用Ni–NTA亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。以表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)为底物,进行体外酶促反应,采用HPLC测定反应产物EGCG3"Me的生成量。结果表明,CCoAOMT在E.coli BL21中能够高效表达,最优条件为诱导温度37 ℃,诱导时间4 h,异丙基–β–D–硫代半乳糖苷(IPTG)浓度0.5 mmol/L;重组蛋白经Ni–NTA亲和层析柱梯度洗脱达到了较好的纯化效果;重组酶在体外能够催化EGCG,合成EGCG3"Me,底物EGCG最佳浓度为0.05 mmol/L,最适温度为37 ℃,最适pH值为4。  相似文献   
2.
简要概述了茶树分子遗传图谱构建方法和国内外茶树分子遗传图谱研究进展,并由此提出构建高密度茶树分子遗传图谱的措施,为茶树分子遗传图谱的构建提供参考。  相似文献   
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