利用 HPLC 分析菠萝愈伤组织 DNA 甲基化水平

建立菠萝 DNA 甲基化水平的 HPLC 测定方法，分析菠萝愈伤组织 DNA 甲基化水平变化，为进一步研究菠萝 体细胞无性系变异机理奠定基础。通过对流动相和水解温度等条件的优化，建立菠萝 DNA 甲基化水平的检测方法。结 果表明，分离 C 和 5m-C 的最佳流动相为甲醇∶磷酸二氢钾∶三乙胺为 10∶90∶0.2（V/V），pH 3.0，DNA 的最佳水解 温度为 90 ℃。利用此体系分析菠萝愈伤组织和胚性愈伤组织的 DNA 甲基化变化，结果表明，菠萝愈伤组织在分化过 程中 DNA 总甲基化水平呈动态变化，变化范围为 5.14%~96.86%。此外，胚性愈伤组织甲基化水平低于非胚性愈伤组 织。推测 DNA 甲基化影响菠萝愈伤组织的分化及胚性愈伤组织的形成。     

荔枝花芽分化对其源叶光合作用及碳氮物质代谢的影响

为研究荔枝花芽分化对其源叶光合及同化产物合成的影响,以妃子笑荔枝为材料,比较分析同一生境下成花枝条与未成花枝条叶片的光合参数和碳氮物质的变化。结果表明,荔枝成花枝条叶片的净光合速率(2.39μmol/m~2·s)极显著地高于未成花枝条的(1.60μmol/m~2·s);同时,成花枝条的气孔导度、胞间CO_2浓度、蒸腾速率和水分利用率均高于未成花枝条。荔枝花芽分化阶段,成花枝条叶片中的可溶性总糖含量和C/N比值明显高于未成花枝条,而总氮含量则是未成花枝条明显高于成花枝条。妃子笑荔枝花芽分化期间,其成花枝条潜在的光合能力要高于无花枝条;而源叶同化产物合成能力增加,则有助于为花芽发育提供充足的物质基础,以保证荔枝成花的顺利进行。     

GA3和PP333对妃子笑荔枝成花及叶片碳氮营养积累的影响

[目的]探讨喷施赤霉素(GA3)和多效唑(PP333)对妃子笑荔枝成花进程及其叶片碳氮物质积累的影响,为荔枝及其他果树调控花芽分化进程提供参考依据.[方法]在妃子笑荔枝顶芽现白点后第2d分别喷施200.0mg/L GA3和1 000.0 mg/L PP333,以喷清水为对照(CK),观测妃子笑荔枝成花进程并测定叶片中可溶性糖、淀粉和总氮含量及C/N等生理指标.[结果]叶面喷施200.0 mg/L GA3能有效延缓妃子笑荔枝花芽分化进程,推迟成花时间;降低叶片可溶性糖含量,并在喷施后第5d降至最低值(10.62 mg/gDW),显著低于CK(30.00 mg/gDW);叶片中总氮含量缓慢增加,并于喷施后第5d达最大值(16.50 mg/gDW),显著高于CK(15.60 mg/gDW).叶面喷施1000.0 mg/L PP333能有效促进妃子笑荔枝花芽分化进程,提早开花时间;增加叶片可溶性糖含量,喷施后第5和第10d可溶性糖含量分别是CK的1.8和1.5倍;叶片中总氮含量短期内(喷施后5d)迅速下降至最低值(14.50 mg/gDW),显著低于CK(15.60 mg/gDW).叶面喷施GA3和PP333对妃子笑荔枝淀粉含量影响不明显,但可分别降低和提高其C/N.[结论]在妃子笑荔枝顶芽露白点后喷施200.0 mg/L GA3可延缓其开花进程,推迟开花;喷施1000.0 mg/L PP333可促进其开花进程,提早开花.     

菠萝生长素极性运输载体基因AcPINs和AcAUXs的分离与表达分析

乙烯已经被广泛应用于菠萝人工催花,但其分子机制不是很清楚。以菠萝(Ananas comosus L.‘Perola’)茎尖为材料,采用RT-PCR结合RACE方法得到3个生长素极性运输输出载体基因(Ac PIN1、Ac PIN2和Ac PIN3)和2个生长素极性运输输入载体基因(Ac AUX1和Ac AUX2)的c DNA及基因组DNA全长。Ac PIN1、Ac PIN2、Ac PIN3、Ac AUX1和Ac AUX2的c DNA全长分别为2 690、2 388、2 057、2 156和1 580 bp,其开放读码框长度分别为1 854、1 917、1 530、1 479和1 392 bp,分别编码617、638、509、492和463个氨基酸;其基因组DNA全长分别为3 602、3 208、4 204、5 457和2 436 bp,从起始密码子到终止密码子的长度分别为3 244、2 780、3 947、5 264和2 321 bp。氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示Ac PINs和Ac AUXs分别属于植物PINs和AUX/LAXs家族。荧光定量PCR结果表明,菠萝茎尖经200和1 200 mg·L-1乙烯利诱导处理后,Ac PINs的表达上调较多,其中Ac PIN2在处理后的早期(1~2 d)和后期(28~37 d)显著上调,另外两个PIN家族基因Ac PIN1和Ac PIN3在处理后的大部分时间都明显提高。Ac AUX1的上调表达量相对较少,且相对表达量显著提高也主要集中在处理初期(1 d)和后期(28~37 d),而Ac AUX2的上调表达则只在处理后的前期(1、2、9 d)。研究结果表明,乙烯利诱导菠萝成花过程中,存在着生长素极性运输,且生长素极性输出在此过程中的作用可能更重要。     

长链非编码 RNA 在园艺植物中的研究进展

长链非编码 RNA（Long non-coding RNA,lncRNA）是广泛存在于植物基因组中的一种 RNA,其在植物多种调控过程中起着至关重要的作用。lncRNA 是指核苷酸长度大于 200 nt 且不具备或几乎不具备蛋白编码能力的 RNA,植物 lncRNA 大多由 RNA 聚合酶Ⅱ转录而来,主要由基因结构变异、基因复制、染色体重组或转座子插入等方式产生。植物 lncRNA 种类繁多,根据其产生的相对位置及作用形式可以分为不同种类。lncRNA的结构与 mRNA 相似,具有帽子和 poly（A）结构及可折叠性,但其转录本比 mRNA 长,转录丰度低,表达特异性极高,且保守性低。园艺植物 lncRNA 的作用机制复杂,可以在转录前后、翻译前后以及表观遗传等方面发挥作用,主要通过顺反式调控邻近基因转录、作为 miRNA 前体或内源性靶标模拟物、与转录因子相互作用、调整 mRNA 可变剪接、调整蛋白重定位及参与染色质重塑等方式发挥作用。园艺植物与人类生活密切相关,园艺植物的研究是农业发展的重要组成部分。随着测序技术的不断发展,植物 lncRNA 的研究也从拟南芥等模式植物拓展到园艺植物,不同种类及数量的 lncRNA 在园艺植物中被鉴定,并被发现参与种子萌发、生殖生长等生长发育过程,以及病虫害等生物胁迫和高温、冷害、干旱、盐分等非生物胁迫的响应等多种调控作用。本文综述了近年来 lncRNA 在园艺植物中的研究进展,概述了园艺植物 lncRNA 的产生、特点、分类、作用机制以及目前园艺植物中所鉴定到的 lncRNA 及其主要生物学功能,并对未来园艺植物 lncRNA 的研究方向提出展望,以期对园艺植物中 lncRNA 的深入研究提供参考及基础。     

荔枝花芽分化期间光合特性与碳氮物质变化

荔枝花芽分化分为诱导、发端和分化3个阶段。试验以早中熟品种‘妃子笑’和中熟品种‘桂味’为试材,对荔枝花芽分化不同物候阶段叶片净光合速率(Pn)、叶绿素指数(SPAD)、荧光参数和碳氮物质等生理指标的变化规律进行研究。结果表明：‘妃子笑’的成花进程早于‘桂味’品种,但2个品种在整个花芽分化期间的相关生理指标均呈相似变化趋势,Pn和SPAD在诱导期和抽穗期水平较低,“白点”期和花蕾期有所增加,而荧光参数恰好相反;荔枝成花期间,其可溶性总糖含量在“白点”期阶段水平最低,而淀粉和总氮含量呈相反趋势,在“白点”期达到最高值。可见,不同荔枝品种的光合特性与碳氮物质变化受其花芽分化的阶段性影响更大,而“白点”期是荔枝碳氮物质变化较为关键的转折点。     

菠萝AcMADS41基因的克隆及其在花发育中的表达分析

[目的]AP3基因在多种植物花器官发育中具有重要作用,但在菠萝中关于AP3基因及其功能的研究尚无相关报道,对其研究可为AcMADS41在菠萝花发育中的功能鉴定提供理论依据.[方法]以菠萝花芽为材料,克隆到一个与花器官发育有关的AP3基因AcMADS41.通过生物信息学分析方法对其理化性质、蛋白结构域、进化关系、顺式作用...     

‘石硖’龙眼果皮发育过程中糖代谢及相关酶活性变化

为探索龙眼果皮发育过程中糖分积累以及相关酶活性的变化规律,以‘石硖’龙眼(Dimocarpus longan Lour.cv‘shixia’)为试材,对花后45 d到果实成熟期间果皮质量、厚度,果糖、葡萄糖、蔗糖含量,以及蔗糖代谢相关酶活性水平进行测定。结果表明,果实发育后期,果皮质量增加的速度变缓,果皮厚度则表现为由厚到薄的变化模型。糖分水平显示,果实发育过程中果皮可溶性糖主要包括果糖、葡萄糖和蔗糖,同期果糖含量远远高于葡萄糖,蔗糖含量较低。蔗糖代谢酶活性表明,龙眼果皮中NI和SS(分解方向)活性较高,为调控‘石硖’龙眼果皮糖代谢的主要酶类,SPS、SS(合成方向)活性则较低,为果糖和葡萄糖生成发挥非常重要的作用。     

菠萝果实发育过程中的内源激素变化及 品质形成特点

[目的]探讨菠萝果实生长发育过程中的内源激素变化及品质形成特点,为菠萝品种改良和优质栽培提供参考依据.[方法]采用酶联免疫法(ELISA)和高效液相色谱法(HPLC)测定巴厘菠萝果实发育过程中的主要内源激素、可溶性糖、有机酸和维生素C(Vc)含量,并分析其变化规律.[结果]在菠萝果实发育过程中,其单果重呈不典型的单S形曲线变化趋势;玉米素(ZT)含量最高,呈先升高后下降再升高的变化趋势;吲哚乙酸(IAA)含量呈先降后升、再降再升的动态变化;脱落酸(ABA)含量变化与ZT相似,幼果期ABA含量随着果实发育不断升高,进入果实膨大期后趋于稳定,成熟期缓慢上升;赤霉素(GA3)微量存在.在菠萝果实发育过程中,糖分积累以果糖、葡萄糖和蔗糖为主,果糖和葡萄糖含量随果实发育逐渐升高,而幼果期蔗糖含量逐渐下降,进入果实膨大期至成熟期后蔗糖含量急剧升高;有机酸积累以马来酸、柠檬酸和苹果酸为主,幼果期以苹果酸和马来酸积累为主,进入果实膨大期后柠檬酸含量急剧升高,成为成熟菠萝的主要有机酸;此外,在菠萝果实发育过程中检测到微量的富马酸和酒石酸.Vc含量在果实发育初期不断升高,进入成熟期后急剧下降.[结论]ZT和ABA是影响菠萝果实发育及成熟的重要内源激素,其含量随果实的发育呈动态变化;蔗糖和柠檬酸是决定巴厘菠萝果实品质的主要可溶性糖和主要有机酸.     

中等职业学校计算机实训教学浅议

本文对计算机实训教学进行了初步探讨,针对中职学校计算机实训教学现状,提出从加强实验室建设、规范专业实训教学体系和培养学生实际操作能力等方面进行必要改革,从而培养具有较强计算机应用能力的实践性人才.