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本研究以银杏的茎尖为材料,对银杏的消毒条件、培养基蔗糖浓度、激素种类及浓度进行了分析比较,以探索银杏茎尖作为外植体的无菌接种最佳条件,为银杏的快速繁殖及资源保护提供基础。结果显示选择广安地区树龄约30年母树当年发出的侧芽带叶茎尖为外植体,70%酒精处理1.5 min,0.5%新洁尔灭处理15min是最佳的灭菌组合。以MS为基本培养基,添加激素0.3 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA,加入0.3%活性炭,调减蔗糖用量为0,琼脂9 g/L,在此条件下培养更能有效地抑制褐化现象,利于银杏茎尖的生长,且长势旺盛。以幼茎尖为外植体建立的无菌体系,为银杏的快速繁殖技术及新品种的培育等研究提供了理论依据。 相似文献
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本研究以四川广安地区野生旱半夏为材料,其叶片为外植体,探索其消毒条件,获得无菌苗。对旱半夏的外植体的选择部位2,4-D和KT两种激素浓度对愈伤组织诱导的影响进行研究。结果显示:选择四川广安地区5月份野生旱半夏嫩叶为外植体,70%酒精50 s,2%次氯酸钠处理12 min是最佳的灭菌条件;以MS为基本培养基,添加低浓度的激素2,4-D和KT利于旱半夏愈伤的形成,其中0.2 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT叶的愈伤诱导率达98.3%,0.2 mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT叶柄的愈伤诱导率达91.8%,0.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT珠芽的愈伤诱导率达92.8%,且长势旺盛。对旱半夏的叶、叶柄、珠芽三种外植体进行比较,发现其叶片更利于愈伤的诱导,不仅其愈伤诱导率高且再生苗生长好。在此研究的基础上优化培养条件,为旱半夏的再生、生根培养、提高繁殖系数等生理研究提供了理论依据。 相似文献
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为了建立和完善旱半夏的ISSR-PCR反应体系,本研究以四川地区野生旱半夏为试验材料。以旱半夏整株的基因组DNA为模板,初筛的UBC818号引物用于ISSR-PCR体系,采用正交实验L16(45)并结合单因素实验方法对体系进行优化。通过正交试验结果直观评分可知各因素对该实验结果的影响强度从高到低依次为:d NTPs,引物,Mg2+,Taq DNA聚合酶,DNA模板;单因素实验结果表明,最优的20μL反应体系为:d NTPs 0.2 mmol/L,引物0.8μmol/L,Mg2+2.0 mmol/L,Taq DNA聚合酶0.075 U/μL,DNA模板15 ng,退火温度为56℃。本研究通过优化ISSR-PCR反应体系,此体系将应用于半夏组培苗遗传稳定性的检测。 相似文献
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