鸡IFN-γ作为治疗剂的应用前景

为了得到长期的保护性免疫，需要使用高效的佐剂，但大多数佐剂是油性的，会导致副的局部反应．从而使肉质量下降。另外．注射后严重的局部反应可能使抗原在注射部位被包裹，因而不会被免疫系统的细胞所识别。抗生素虽然普遍使用．但耐药菌的出现。又对人类造成新的威胁。同样，长期使用化学药物，增加了环境污染并导致肉制品中药物残留。这些因素驱     

鸡传染性支气管炎病毒SC株N基因序列测定与同源性分析

从我国四川省一疑似鸡传染性支气管炎(Avianinfectious bronchitisvirus，IB)的雏鸡病料中成功分离到一株鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus，IBV)，命名为SC。病毒经鸡胚传代、血凝试验监测和负染电镜检查证实为IBV。自接毒鸡胚尿囊液中提取RNA后应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增得到了IBVSC株mRNA6 cDNA(编码N蛋白)。应用DNAstar5．06，Clustal1．8分析软件将克隆测序的N蛋白基因与Genbank中11株国内外参考毒株进行序列比较分析和同源性分析，发现IBV SC株变异独特，明显不同于国内外参考毒株。     

新型鸡白细胞介素15真核表达质粒构建及其体外表达

应用重叠扩增PCR(SOE PCR)技术将鸡白细胞介素15(ChIL-15)的冗长信号肽序列替换为较短的鸡白细胞介素2(ChIL-2)信号肽序列,构建了一种新型ChIL-15融合基因(NChIL-15).将其连接到克隆载体pMD18-T中得到重组克隆质粒pMD18T-NChIL-15.阳性克隆质粒经鉴定正确后将NChIL-15基因亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,得到重组阳性表达质粒pcDNA3.1(+)-NChIL- 15.阳性表达质粒经鉴定正确后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了NChIL-15蛋白在293T细胞中的表达.本研究为NChIL-15佐剂作用的深入研究奠定了基础.     

白细胞介素-15研究进展

白细胞介素-15(interleukin 15 IL-15)是近年发现的一种在分子结构及生物学性质方面与白细胞介素-2(interleukin 2 IL-2)相似的细胞因子。自从1994年发现以来，由于其在医学及兽医学上的重要的生物学作用而受到研究者们的重视，在各个方面的深入研究已取得了一定的进展。本文对IL-15及其在兽医学上具有潜在应用价值的鸡IL-15(Chickeninterleukin 15 ChIL-is)近年来取得的研究进展作一综述，内容涉及IL-15的结构及受体、产生及基因表达、生物学作用。     

一例鸡白血病的病理学诊断

禽白血病是由反转录病毒科,禽C型反转录病毒引起的。该病可产生肿瘤,导致鸡只死亡;还会发生非肿瘤综合征,表现为生产指标发生变化,如性成熟推迟、母鸡产蛋率和蛋重下降、受精率和孵化率下降。哈尔滨市某养殖场送检疑似鸡白血病病鸡(海兰褐)2只,现将病理学诊断结果报告如下,为基层兽医工作者诊断此病提供一定的诊断依据。1流行病学调查及临床症状2只均为14周龄产蛋鸡,据介绍,病鸡使用多种药物均无好转,发病率为20%￣30%,死亡率不高。病鸡消瘦、衰弱,食欲不振,体重较轻,产蛋率显著下降,鸡冠苍白、皱褶;个别病例在发病后期有瘫痪症状。除此,无…     

鸡氨肽酶N蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究

试验参考Gen Bank上鸡氨肽酶N(g APN)基因序列(登录号为NM_204861.1)设计多对特异性引物,利用RT-PCR分段克隆g APN基因各段克隆产物并利用SOE-PCR将其进行连接,得到大小为2 906 bp的全长基因。利用原核表达载体p ET-30a(+)构建重组质粒p ET-g APN并转化E.coli Rosetta,经诱导表达得到大小为113 ku目的条带。以纯化g APN重组蛋白为免疫原制备兔抗g APN多克隆抗体,间接Elisa方法检测多抗血清效价为215。Western Blot试验证明,此多克隆抗体可以与原核表达的蛋白产生特异性条带,同时与18日龄鸡肾组织中获得的天然g APN蛋白样品有良好的反应性。间接免疫荧光试验显示,多克隆抗体可检测到pc DNA-g APN转染HELA细胞所表达的g APN蛋白。上述结果可为g APN蛋白的深入研究奠定基础。     

鸡白细胞介素15真核表达质粒构建及其体外表达

应用反转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)技术AkConA刺激20 h的白菜航鸡脾脏T淋巴细胞中扩增出鸡白细胞介素15(ChIL-15)全基因片段.将其连接到克隆载体pMD18-T中得到重组克隆质粒pMD18-T-ChIL-15.阳性克隆质粒经鉴定正确后将ChIL-15亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,得到重组阳性表达质粒pcDNA3.1(+)-ChIL-15.阳性表达质粒经鉴定正确后应用磷酸钙法体外转柒293T细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了ChIL-15蛋白在293T细胞中的表达.     

3-1E/mChIL-15融合基因构建及在真核细胞中的表达

将鸡堆形艾美尔球虫(E.acervulina)子孢子和裂殖子表面抗原3-1E基因片段与鸡白细胞介素15成熟蛋白基因片段(mChIL15)通过四个柔性氨基酸SPGS连接,构建并鉴定真核表达质粒pcDNA3.1/3-1E-linker-mChIL-15。表达质粒纯化后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光和免疫组织化学方法对重组质粒的体外瞬时表达进行检测。结果表明,成功构建了融合基因3-1E-linker-mChIL-15,转染后30h可检测到融合基因编码的融合蛋白在293T细胞中的瞬时表达。研究为鸡艾美尔球虫基因工程疫苗进一步研制及应用奠定了基础。     

PBL教学模式在兽医病理解剖教学中的应用

PBL(problem based learning)已经成为一种国际流行的教学模式.该教学模式的运用可以有效提高学生自主学习能力、独立思考能力以及分析和解决实际问题能力.文章就PBL教学模式在兽医病理解剖学教学中的应用及需要注意的几个问题进行了论述,旨在为提高兽医病理解剖学教学效果提供参考.     

牛白细胞介素2基因原核表达及多克隆抗体制备

根据GenBank发表的牛白细胞介素2(BoIL-2)基因序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增出重组牛白细胞介素2(rBoIL-2)基因。将克隆片段与pMD18-T载体连接,并经过酶切及PCR鉴定,测序结果显示,克隆的BoIL-2基因与GenBank发表的BoIL-2基因序列同源性为98.7%。将测序正确的克隆片段与pET30a(+)载体连接,构建重组表达质粒pET30a(+)-rBoIL-2,通过双酶切及PCR鉴定阳性的重组质粒进行序列测定后在大肠杆菌的表达,分子质量约为23.49 ku;表达产物主要分布在包涵体中。Western blotting证实所得到的重组蛋白为BoIL-2重组蛋白。用镍离子亲和树脂对所得的BoIL-2重组蛋白进行纯化,并免疫新西兰兔成功制备兔抗rBoIL-2多克隆抗体,为下阶段的研究提供了重要的试验材料。