中国人白细胞介素-12 (hIL-12)cDNA克隆及序列分析

根据已发表的IL-12两个亚基P35 cDNA序列（NM-000882）与P40 cDNA序列（NM-002187）设计2对引物。以LPS刺激的人脐血淋巴细胞为材料，采用RT-PCR技术从总RNA扩增hIL-12基因，包括完整的前体蛋白编码序列。所得到的序列与GenBank中发表的一致，但与CLMF和NKSF序列有所差异。P35同CLMF相比，244aa密码子GAC（Asp）→GAT（Asp）、247aa密码子ACG（Thr）→ATG（Met）；与NKSF比较，44aa密码子GTC（Val）→GTG（Val）。P40同NKSF比较239aa密码子AAC（Asn）→AAG（Lys），291aa密码子ACC（Thr）→ACG（Thr）；P40同CLMF相比较，氨基酸与核苷酸序列完全一致。通过与不同物种氨基酸及核苷酸序列比较分析，P40亚基与其它动物的同源性80％以上，P35亚基与其它动物同源性在70％。     

小型大豆秸秆挤压膨化机的研制

1 引言。黑龙江垦区农作物秸秆资源十分丰富，其中大豆秸秆占全垦区秸秆总产量的40％～50％。然而，由于大豆秸秆质地粗硬，粗纤维含量高达35％～40％，还含有木质素、半纤维素以及硅酸盐等，直接作为反刍动物的粗饲料时，其消化率低(30％～40％)，粗蛋白含量低(3％左右)，适口性差，采食量也很低，限制了它的应用。目前，大豆秸秆用于饲料部分远不足10％，大量秸秆都被燃烧或直接还田，造成资源浪费和环境污染。但是，秸秆经过合理加工后，饲喂草食家畜或作为配制全价饲料的基础日粮，可提高采食量、营养价值和消化率，对草食家畜的生长和增重、提高饲料报酬和经济效益有良好作用。因此，研究效果好、成本低、适合国情的秸秆处理方法，致力于改善秸秆适口性，提高消化率，增加营养价值，不仅关系到资源的合理利用、畜牧业的发展和人民生活的改善，而且关系到环境保护这个可持续发展战略。     

妊娠母马eCG分泌水平的研究进展

马绒毛膜促性腺激素(Equine chorionic gonadotropin,eCG)是马属动物妊娠早期由子宫内膜杯分泌的一种异源二聚体糖蛋白,文章综述了妊娠母马子宫内膜杯的结构、eCG的生物学特性、eCG在动物繁殖中的应用、不同马属动物、马的品种、年龄、及母马所怀胎儿性别等遗传、生理因素对妊娠母马eCG分泌水平的影响。研究表明,怀驴骡母驴、轻年怀头胎的妊娠母马、怀雌性胎儿的妊娠母马eCG的分泌水平较高。eCG作为一种胎源的糖蛋白很可能在母体的免疫耐受中发挥特定的作用。     

体外培养山羊成纤维细胞系方法的建立

用山羊组织块和0.25%的胰蛋白酶消化培养法获得正常传代细胞,对于出现的上皮样细胞和成纤维样细胞混合生长的问题,则根据两者贴壁紧实程度不同,用0.05%的胰酶-EDTA进行不同时间的消化,将其分离纯化。纯化的成纤维体细胞经数次传代培养后,进行冷冻解冻检验表明仍具有正常的传代能力。各代体细胞的核型分析表明,在体外培养至20~30代成纤维细胞的细胞形态(为梭形细胞,高度汇合后呈火焰状)、细胞周期以及核型均为正常,符合体细胞克隆转基因的基本要求。     

用猪骨髓间充质干细胞为供体生产猪的转基因胚胎

以pEGFP-N 1质粒,通过电转染的方法转染了猪骨髓间充质干细胞,经过G 418筛选,获得了阳性细胞克隆。以转染的猪骨髓间充质干细胞与体外成熟(in v itro m aturation,IVM)的卵母细胞构建克隆胚。结果表明:通过体细胞核移植技术,猪骨髓间充质干细胞可以有效地生产转基因囊胚,并且绿色荧光蛋白可用于转基因胚胎的筛选。     

小型稻麦联合收割机谷物回弹问题的研究计算机模拟

在小型稻麦联合收获机的研制和试验基础上，对收割机收获谷物茎杆回弹问题进行定量分析。通过对回弹机理的分析，建立数学模型，并利用计算机模拟试验和田间试验的数据对比作进一步论证。试验证明，谷物回弹是造成拨禾轮拨禾损失的重要因素，为进一步解决茎杆回弹问题，研究了拨禾轮的速比、转速及回弹时间对拨禾轮性能的影响。并以此确定了小型稻麦联合收获机的性能参数与其结构参数的关系。为进一步的稻麦联合收割机结构参数的优化提供了基础。     

应用吞噬性能选育矮小鸡的抗病群体

【目的】单核巨噬细胞在免疫系统中发挥着重要的作用,试验研究了对单核巨噬细胞吞噬性能的选择影响矮小鸡G1代抗传染性支气管炎病毒(IBV)的能力。【方法】在矮小鸡290日龄时,检测了G0代500只个体(母鸡400只,公鸡100只)的吞噬指数(PI),并根据PI的大小分为强吞噬力组(HPIG)和弱吞噬力组(LPIG)。建立2×2交配组合:HPIG♂×HPIG♀(强公强母组),LPIG♂×HPIG♀(弱公强母组),HPIG♂×LPIG♀(强公弱母组),LPIG♂×LPIG♀(弱公弱母组)。随机选择400只1日龄G1代雏鸡(每组100只,公母各半),其中360只采用滴鼻方式人工接种含IBV M41病毒的鸡胚尿囊液,40只作为对照,连续观察14d,记录死亡数,制作石蜡切片进行H.E.染色,并通过红细胞凝集抑制试验(HI)测定15 d时存活鸡只的抗体效价。G1代鸡20周龄时,选择母鸡12只,其中强组母鸡后代6只,弱组母鸡后代6只,以病毒模拟物Poly I:C刺激体外培养的单核巨噬细胞,采用荧光定量PCR的方法测定细胞因子及主要组织相容性复合体(MHC)m RNA的表达水平。【结果】G0代不同个体对异源红细胞的吞噬能力差异显著,通过测定G0代个体的吞噬指数,建立交配组合,孵育得到G1代鸡。对G1代鸡的IBV攻毒试验的结果为强公强母组后代的死亡率(33.3±0.05)%显著低于弱公弱母组(55.6±0.05)%,其他两个组合后代的死亡率介于上述值之间,弱公强母组为(43.3±0.05)%,强公弱母组为(47.8±0.05)%;母鸡对后代的影响大于公鸡,强母组后代的死亡率(38.3±0.04)%显著低于弱母组(51.7±0.04)%。攻毒组在接种IBV M41病毒3 d后表现出咳嗽、呼吸困难、食欲减退、精神沉郁等临床症状,对病死鸡的气管及肾脏的H.E.染色结果可见典型的病灶,气管上皮细胞坏死脱落,肾小管上皮细胞发生空泡变性等,而对照组均无临床症状及组织病变。对198只攻毒后存活个体抗体滴度的测定结果显示强组母鸡后代抗体滴度(8.45±0.07)显著高于弱组母鸡后代的抗体滴度(8.10±0.08)。利用病毒模拟物Poly I:C刺激体外培养的单核巨噬细胞2 h后,强吞噬力个体(强组母鸡后代)细胞因子IFNγ和IL-1β的表达量分别是弱吞噬力个体(弱组母鸡后代)的5.14倍(P0.05)和2.41倍(P0.05)。强吞噬力个体MHCⅠ的表达量显著高于弱吞噬力个体,而MHCⅡ的表达量差异不显著。【结论】通过测定体外培养的单核巨噬细胞的吞噬性能,按照吞噬指数的高低建立交配组合,强吞噬力母鸡后代的攻毒死亡率显著低于弱吞噬力母鸡后代,且其抗体滴度、细胞因子(IFNγ、IL-1β)和MHCⅠ的表达量显著高于弱吞噬力母鸡后代,说明强吞噬力母鸡后代具有较强的抗IBV的能力。因此单核巨噬细胞的吞噬能力可以作为培育抗IBV品系的一种指标。     

驴dCG/LH受体CDS的克隆测序

研究比较2种马属动物的LH受体基因CDS,以驴卵巢黄体为实验材料,利用RT-PCR克隆测序得到驴dCG/LH受体基因的部分cDNA序列与马的相应序列进行对比。结果表明:马和驴在C-498T、A-1409G、G-1468T、C-1478T 4个位点上存在差异,其中C-498T、G-1468T导致(CTT)Leu-Phe(TTT)、(AGG)Arg-Met(ATG)的氨基酸变化,这两处氨基酸差异分别位于受体跨膜蛋白的胞外域和跨膜第2胞外域。     

5XD-2.0型带式清选机的设计与试验

基于摩擦分离清选机理,设计了适用于大豆、红小豆、绿豆等作物清选作业的5XD-2.0型带式清选机,对分选带的清选能力和运动特性方面作了详细的计算,确定了主要工作部件的结构和性能参数。经性能测试与生产试验证明,5XD-2.0型带选机符合设计要求,对豆类中的碎半豆,虫蚀严重粒清选效果极佳,一次清选净度可达99%以上,机具传动平稳,低噪音,高效且性能稳定。为清选机械的产业化进程奠定了技术基础。     

大豆大垄密植栽培技术模式及配套机械化系统研究

根据对大豆大垄密栽培机械化生产全过程的田间对比试验和调查研究,提出了一套适合该地区和技术先进的大豆种植全过程机械化栽培技术模式,并以此为例,建立各作业机组费用与作业量之间的数学模型,通过计算机程序进行了机组经济可行域和线性规划理论分析,对田间机械化作业项目所选的动力和机具进行数量配备,形成一套最优的机具配套方案.经实践证明该方案经济可行.