害虫生防新靶标——昆虫中肠围食膜的研究进展

围食膜是无脊椎动物所特有的一种半透性膜状结构,昆虫的围食膜是由中肠细胞分泌形成的,根据分泌细胞在中肠所处的位置,可将围食膜分为Ⅰ型和Ⅱ型。由于围食膜紧贴中肠内壁,包裹着食物,因此具有保护中肠上皮细胞和有助于食物消化吸收的功能。围食膜主要是由几丁质和蛋白组装而成,由此可以寻找到其潜在的害虫防治的新靶标位点。文章重点论述了昆虫围食膜的形成机制、结构组成以及目前以围食膜为靶标的害虫防治最新进展。     

球孢白僵菌对东北大黑鳃金龟的侵染效果

从东北大黑鳃金龟成虫体中分离出一株球孢白僵菌Ｖｕｉｌｌ．。室内试验表明，它对金龟子的感病率为６１．３％，２龄蛴螬的最高死亡率为５３．３％。该株球孢白僵菌对东北大黑鳃金龟２龄幼虫的毒力略大于绿僵菌Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍ ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ（Ｍｅｔｃｈ．）Ｓｏｒ．（４５．６％），明显大于卵孢白僵菌Ｂ．ｂｒｏｎｇｎｉａｒｔｉｉ（Ｓａｃｃａｒｄｏ）Ｐｅｔｃｈ（２０％）。     

延长对虾生长期效益试验分析

生活在辽阔的黄海、渤海中的“中国对虾”，能依季节的变化寻找温度适宜的海域生活。秋季，随着岸边浅水温度的下降，对虾便逐步向深水域转移，以便在温度适宜的海水中继续生长。而生活在人工养虾池中的对虾，因水域有限、水温差异甚微等原因，无法自寻适宜的水域，因此人们只能适时放养，提前收获，以避免低温冷害。这就人为地缩短了对虾的生长期，减少了产量。因此，充分利用气候资源，在避免低温冷害的前提下，延长对虾的生长期，以取得尽可能高的产量，是人工养虾过程中的一个重要问题。     

木薯天蛾颗粒体病毒某些生化特性——病毒DNA限制性内切酶解及结构多肽分析

本文采用限制性内切酶,分析木薯天蛾颗粒体病毒(Erinnyis ello Granulosis Virus简称EeGV)的DNA。同时,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE),对病毒包涵体蛋白质和病毒粒子结构多肽进行分析。结果表明,EeGV基因组的分子量为89.82 Kbp(硷基对);包涵体蛋白只有一条带,其分子量为31.0KDa(道尔顿);病毒粒子至少有18种结构多肽,其分子量在14.00～205.00 KDa范围之间,其中,有6条带明显地不同于Piris rapae GV和Trichoplusia ni GV;经EcoR_1,Hind Ⅲ,Kpnl酶解的EeGV DNA片段数目和分子量都明显不同于PrGV和TnGV的DNA片段。     

粉纹夜蛾（Trichoplusia ni）卵巢细胞系克隆株Tn5B1—4特性的研究

通过用限稀释法由粉纹夜蛾Ｔｎ５Ｂ１细胞系中分离出多个细胞株，经筛选获得一个理想的克隆株Ｔｎ５Ｂ１－４，该克隆株的特性不同于原细胞系Ｔｎ５Ｂ１。该克隆株的细胞形态一致，细胞群体倍增时间较原细胞株短，而且细胞活力强，特别是在维持粉纹夜蛾单粒包埋核型多角体病毒的复制能力方面高于原细胞系，另外经生物测定看出，在该克隆株中增殖的病毒毒力与虫体内增殖的病毒无显著差异。     

农业现代化中害虫的综合防治

害虫是农作物生长发育过程中常可遇到的一类自然灾害,有效地防治害虫以保护农作物,使能获得高产稳产是科学种田的重要措施之一,也是实现农业现代化的必要组成。黑龙江地处我国北境,气候相对冷凉,容易导致植保问题不大的错觉。但据统计,每年因病、虫、杂草危害减产粮食可达三、四十亿斤。其中玉米螟、大豆食心虫、谷子钻心虫、地下害虫、高梁蚜虫、粘虫、(禾刀)瘟等七大病虫害常年为害面积约近一亿亩次     

甘蓝夜蛾卵巢细胞系对核多角体病毒的敏感性

本文研究了甘蓝夜蛾核型多角体病毒（ＭｂＮＰＶ）在同源寄主细胞系ＮＥＡＵ－Ｍｂ－９３１１０４（简称Ｍｂ－９３１１０４）中的复制，ＭｂＮＰＶ侵染细胞后的病理变化。Ｍｂ－９３１１０４对ＭｂＮＰＶ有一定的敏感性，细胞表现明显的病变，细胞感染率达到３６．５％，感染细胞内产生的多角体数为３８．９。用离体培养产生的病毒多角体感染甘蓝夜蛾幼虫，其死亡率达到了８４．２％。     

AcMNPV chiA基因表达产物对棉铃虫围食膜的破坏及对Bt和NPV的增效作用

采用PCR方法扩增出苜蓿银纹夜蛾(Autographa californica)核型多角体病毒(AcMNPV)几丁质酶基因(chiA)编码区1.6kb全长片段,并将该片段分别克隆至原核表达载体pET30a和杆状病毒BactoBac表达系统转移载体pFastBac中,分别在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)和草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞系Sf-9中进行了表达。SDS-PAGE分析表明,在大肠杆菌和昆虫细胞中均有效表达了60kD的蛋白。将表达产物饲喂5龄棉铃虫(Helicoverpa armigera)幼虫后取其围食膜,扫描电镜结果显示,围食膜结构遭到破坏形成大量孔洞。生物测定结果表明,以上两种表达产物对苏云金芽孢杆菌(Bt)和核型多角体病毒(NPV)均具有增效作用。以AcMNPVChiA在大肠杆菌和细胞系Sf-9中的表达产物分别与BtCry2Ac蛋白混合饲喂棉铃虫初孵幼虫,增效率分别为33.4%和54.5%,其LT50较对照处理分别缩短了17.8和20.6h;当AcMNPVChiA在大肠杆菌和细胞系Sf-9中的表达产物分别与甘蓝夜蛾(Mamestra brassica)核型多角体病毒(MbNPV)混合处理棉铃虫初孵幼虫时,其LT50与对照比较分别缩短了16.6和22.4h。     

荧光增白剂和增效蛋白对粘虫核型多角体病毒的增效作用

离体和活体处理粘虫幼虫围食膜后,通过SDS-PAGE分析其围食膜蛋白条带的变化、观察其形态学特征、生物测定等方法研究了荧光增白剂FB28和棉铃虫颗粒体病毒增效蛋白(En-Ha)对粘虫幼虫围食膜的破坏作用及其对粘虫核型多角体病毒(MsNPV)的增效作用.结果表明,FB28离体处理围食膜能够解离大部分围食膜蛋白,幼虫摄取含有l?28的饲料4 h后,围食膜破裂.呈现出蓝色的荧光,高分子量蛋白条带消失.En-Ha离体处理围食膜,能够降解高分子量蛋白,出现高分子量蛋白条带消失,低分子量蛋白条带出现的现象;幼虫摄取含有9 ug/mL En-Ha饲料7 h后,围食膜极易断裂,高分子量蛋白条带消失.经过一段时间恢复实验后,FB28和En-Ha处理的幼虫围食膜都能够恢复正常,其破坏作用是短暂的.生物测定结果表明,FB28和En-Ha均能够通过破坏围食膜完整性提高MsNPV的感染率,使IC50显著降低.     

甘蓝夜蛾核型多角体病毒连续传代的研究

对甘蓝夜蛾核型多角体病毒（ ＭｂＮＰＶ） 在同源寄主细胞系ＮＥＡＵＭｂ９３１１０４（ Ｍｂ９３１１０４） 中的生长特性进行了研究。结果表明,无包涵体游离病毒（ ＭｂＮＰＶ＿ＮＯＶ） 在接种后１４ ｈ 达到吸收高峰,病毒滴度降到最低值５－７９ ×１０２ＴＣＩＤ５０／ｍ Ｌ,接种病毒９６ ｈ,病毒滴度达到最高值２－１３ ×１０５ＴＣＩＤ５０／ｍＬ,在ＮＯＶ（ｎｏｎｏｃｃｌｕｄｅｄ ｖｉｒｕｓ） 连续传递２０ 代的过程中,ＭｂＮＰＶ＿ＮＯＶ 毒力随传递代数的增加而减低,并且多角体的毒力也发生了显著的变化,前几代能使甘蓝夜蛾幼虫死亡率在９０ ％ 以上,传递到１５ 代以后产生的多角体对甘蓝夜蛾的幼虫几乎没有毒力。