重组人PRL-3蛋白的表达、鉴定和酶动力学分析

目的构建融合蛋白pColdII-His-PRL-3表达质粒,并进行诱导表达、纯化、鉴定和酶动力学分析。方法 2＋通过基因重组技术构建pColdII-His-PRL-3融合蛋白表达载体,并在ArcticExpress E.Coli中表达融合蛋白。经Ni-NTA层析纯化,PRL-3蛋白用SDS-PAGE和Western blot初步鉴定,基质辅助激光解吸/电离直角型飞行时间质谱（MALDI-TOF-TOF）确证,并进行酶动力学分析。结果重组载体pColdII-His-PRL-3包含正确的PRL-3编码序列,经IPTG诱导后能正确表达融合蛋白,Westernblot显示表达蛋白具有抗原性,质谱分析结果显示目的蛋白氨基酸序列与-1PRL-3蛋白完全相符。PRL-3酶的米氏常数Km为6.59μmol/L,催化常数Kcat为0.44min。结论构建的pColdII-His-PRL-3重组载体可表达具有酶活性的PRL-3蛋白,为PRL-3酶抑制剂的筛选奠定了基础。     

妊娠滋养细胞疾病的细胞分子生物学研究新进展

妊娠滋养细胞疾病(GDTs)是一系列来源于妊娠物而非患者本身的疾病,携带父源性基因使之区别于其他肿瘤。在近10年里,有关滋养细胞的分子生物学研究取得了很大进展,对其基因表达的进一步认识使我们了解滋养细胞的各期分化及与各种滋养细胞疾病之间的关系成为可能。     

三膜一苫早熟西瓜栽培技术

1　设施构造与保温方式通过几年的生产实践 ,筛选出结构简单、成本低、防风保温、管理方便的拱圆形塑料棚。棚高1 .7～ 2ｍ ,跨度 5ｍ ,长 30～ 1 0 0ｍ ,东西走向。建棚时 ,先在棚一边每隔 1ｍ埋 1条长 7～ 8ｍ ,直径 3～ 4ｃｍ的竹竿 ,然后把竹竿弯曲成拱形架 ,用农膜三幅二缝覆盖棚面 ,缝相交 2 0ｃｍ ,用压膜线压紧 ,大棚最好于定植前 2 0天建成。采用三膜一苫的覆盖保温方式。即大拱棚里套小拱棚 ,小拱棚里覆地膜 ,小拱棚外面覆盖草苫。据测定 ,这种保温方式在郑州地区 2月份 (最低气温 - 1 5℃左右 )棚内最高气温可达 2 9℃ ,最低气温…     

郑州沿黄稻区水稻盘育抛秧栽培技术

郑州市中原区位于郑州黄河南岸,属引黄灌溉稻区,自1996年引进水稻盘育抛秧栽培技术,经过多年的试验示范,获得成功,后在全市沿黄稻区大面积推广,2005年推广面积7 100 hm2,占水稻总面积的51%,1999~2005年累计推广应用面积41 400hm2,最高每公顷产量达9 225kg,平均7 444.35 kg/hm2,     

优质抗病高产少籽西瓜新品种豫园抗9号

豫园抗 9号是由河南省农科院园艺所瓜类研究室选育的优质、抗病、高产、少籽型西瓜新品种 ,综合性状超过金钟冠龙和新红宝。1　选育经过豫园抗 9号的母本是从韩国的一个优质西瓜杂交种中分离出来的 ,表现易坐果 ,抗病性强 ,品质好 ;父本是从美国一个杂交种中分离出来的 ,生长势强 ,果大 ,抗性好。1996年配制组合 ,1997～ 1998年进行小区对比 ,1999年进行小面积生产试验。2　引种、示范的综合表现豫园抗 9号适应性强 ,北起黑龙江 ,南至海南岛均可种植。在河南、北京、黑龙江、山东、山西、安徽、湖南、四川等省均有引种栽培 ,已累计示范面积…     

半边旗提取物5F下调炎症因子表达对荷S_（180）肉瘤小鼠的抗肿瘤活性的影响

目的观察半边旗提取物5F对荷S180肉瘤小鼠的抗肿瘤作用及炎症因子影响。方法建立荷S180肉瘤腹水瘤及实体瘤小鼠模型,随机分为生理盐水组、5-Fu组及低、中、高剂量5F组;采用腹腔注射给药,末次给药后处死小鼠,记录腹水瘤小鼠的生存时间,检测实体瘤小鼠的抑瘤率、白细胞数、胸腺指数、脾指数及血清IL-1、IL-6、TNF-α和瘤内TNF-α水平。结果低、中、高剂量5F组小鼠的中位生存时间分别为（15.4±0.5）、（21.4±1.3）和（28.2±0.7）d,明显高于生理盐水组（P〈0.05）。5F组瘤重明显低于生理盐水组（P〈0.05）;中、高剂量5F对胸腺指数、脾指数、IL-1、IL-6及TNF-α水平有明显抑制作用（P〈0.05）,但对白细胞数无明显影响。结论 5F可有效抑制小鼠荷S180肉瘤的生长,可能与下调炎症因子表达有关。     

斑蝥素抑制NF-kB（P65）及Smad3在高转移卵巢癌细胞株HO-8910PM中的表达

目的:研究斑蝥素对H O- 8910 PM细胞内N F- κB(P6 5 )、Smad3蛋白及NF- κB(P6 5 ) m RN A表达的影响,探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制。方法:用Western blot分析N F- κB(P6 5 )及Smad3蛋白的表达;RT- PCR分析NF- κB(P6 5 ) m RNA的表达。结果:2 5～10 0μmol/ L的斑蝥素作用于H O- 8910 PM细胞2 4 h后,明显下调N F-κB(P6 5 )及Smad3蛋白表达和NF-κB(P6 5 ) m RN A表达(P<0 .0 1) ,并呈一定的剂量效应。结论:斑蝥素抗肿瘤侵袭、转移与抑制NF- κB(P6 5 )、Smad3蛋白和NF- κB(P6 5 ) m RNA的表达有关。     

FEV1/FEV6筛检中老年慢性阻塞性肺疾病患者的可行性研究和截断值探讨

目的 评价第一秒用力呼气容积(FEV1)与第六秒用力呼气容积(FEV6)的比值(FEV1/FEV6)能否用于筛检中老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者,确定粤西地区40岁以上人群的最佳诊断截断值,以期对我国社区筛检COPD患者提供参考.方法 2015年7-9月在湛江地区随机抽取40岁以上居民进行肺功能检测,对FEV6与用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC与FEV1/FEV6进行相关性分析,以吸入支气管扩张剂后FEV1/FVC＜70％为金标准,应用受试者工作特征曲线(ROC),求出并探讨FEV1/FEV6最佳诊断临界值.结果 共有863名符合质控要求的参与者,其中男性303名,女性560名.FEV6与FVC呈高度正相关(r=0.988,P＜0.01),FEV1/FEV6与FEV1/FVC呈高度正相关(r=0.974,P＜0.01).ROC曲线下面积为0.980(P＜0.01).FEV1/FEV6的最佳截断值为75％,此时约登指数为84.2％,符合率为94.2％,敏感度为89.6％,特异度为94.6％.结论 用支气管舒张后FEV1/FEV6做指标筛检中老年COPD患者是可行的,推荐用FEV1/FEV6＜75％作为筛检的标准.     

PRL-3及其同源异形体重组杆粒的构建和鉴定

目的构建PRL-3及其同源异形体重组杆状病毒表达载体,为下一步表达PRL-3及其同源异形体蛋白并从中草药活性成分中筛选出PRL-3抑制剂奠定基础。方法应用RT-PCR方法从高转移卵巢癌细胞HO-8910PM扩增PRL-3及其同源异形体编码序列,克隆到供体质粒pFastBac HTB,在DH10Bac菌中进行同源重组,经3种抗生素和蓝白斑筛选,得到Bacmid-HTB-PRL-3和Bacmid-HTB-PRL-3-variant,PCR鉴定其正确性。结果与结论成功构建了PRL-3及其同源异形体重组杆粒。