产木质素过氧化物酶黑木耳菌株的筛选及酶活力的测定

为获得产木质素过氧化物酶的黑木耳菌株,从野外采集的37株黑木耳菌株中筛选产木质素过氧化物酶单株,最终得到2株目标菌株,并测定其产酶活力,2株黑木耳分泌Lip最高酶活力分别为0.021和0.035 U·mL-1。     

香菇多糖提取条件的优化研究

研究了采用微波协同高压热水浸提法从香菇中提取活性多糖的最适条件。通过单因素试验和正交试验,探讨了料液比、微波功率、微波处理时间、高压浸提时间及高压浸提温度对香菇多糖提取率的影响,并以香菇多糖提取率为评价指标,优化提取工艺。试验结果表明,微波协同高压热水浸提法提取香菇多糖的最适条件:料液比为1∶50(g∶mL),微波功率为640 W,微波处理时间为6 min,高压浸提温度为115℃,高压浸提时间为100 min。在此条件下,香菇多糖的提取率为13.8%。     

香菇多糖提取工艺的优化

试验研究了超声波协同高压热水浸提法从香菇(Lentinus edodes)中提取活性多糖的最适条件。通过正交试验,探讨了料液比(g/mL,下同)、超声波功率、超声波处理时间、高压热水浸提时间及高压热水浸提温度对香菇多糖提取率的影响,并以香菇多糖提取率为评价指标,优化其提取工艺。结果表明,超声波协同高压热水浸提法提取香菇多糖的最适条件为:料液比1∶50,超声波功率250 W,超声波处理时间8 min,高压热水浸提温度108℃,高压热水浸提时间100 min。在此条件下,香菇多糖的提取率为27.2%。     

岩栖蝮蛇毒纤溶酶基因克隆、序列分析及真核表达载体的构建与鉴定

克隆岩栖蝮蛇（Gloydius saxatilis）纤维溶解酶（Fibrinolytic enzyme,FLE）基因,分析基因序列并对该基因的功能进行分析;构建真核表达载体并鉴定。从岩栖蝮蛇毒腺细胞中提取总RNA,通过RT-PCR法扩增纤溶酶基因,与pMD18-T载体连接进行TA克隆,再进行序列的测定并且对该序列进行分析。测序鉴定后将纤溶酶基因克隆入真核表达载体pEGFP-C1,构建该基因的真核表达载体pEGFP-FLE,进行双酶切、PCR和测序鉴定。扩增得到包括完整开放读码框在内的长为774 bp的纤溶酶基因序列,成功克隆了编码岩栖蝮蛇纤溶酶的基因序列,开放读码框编码257个氨基酸,其分子质量约为30 KDa,成功构建了真核表达载体pEGFP-FLE。成功克隆岩栖蝮蛇毒纤溶酶基因并构建该酶的真核表达载体为该基因的真核表达及后续研究提供依据。     

中介蝮蛇毒纤溶酶基因克隆及生物信息学分析

克隆中介蝮蛇(Gloydius intermedius)纤维溶解酶(Fibrinolytic enzyme,FLE)基因,分析其基因序列并对该基因的功能进行分析.从中介蝮蛇毒腺细胞中提取总RNA,通过RT-PCR法扩增纤溶酶基因,与pMD18-T载体连接进行TA克隆,再进行序列的测定并且对该序列进行分析.扩增得到完整开放读码框在内的长为777 bp的纤溶酶基因序列.成功克隆了编码中介蝮蛇纤溶酶的基因序列,推导其编码的氨基酸序列.开放读码框编码258个氨基酸,含有大量疏水氨基酸.其中,前1～19位氨基酸编码信号肽;根据同源性推测,以His65、Asp110和Ser204组成纤溶酶的活性中心并高度保守;序列内合12个Cys.两两配对结合成的6个二硫键对纤溶酶的高级构型和稳定性至关重要.成功克隆中介蝮蛇毒纤溶酶基因为进一步研究该基因的遗传特征以及为该酶在原核及真核生物中的表达研究提供依据.     

地方高校服务地方经济建设的机制与途径探索

地方高校在为区域经济发展提供人才支持、区域竞争力、精神动力、技术平台等方面发挥了重要作用,地方高校与区域经济发展之间具有相互制约、依赖和促进的关系。以绥化学院为例,探讨绥化学院服务地方经济过程中存在的问题,通过对接地方产业结构调整、转变社会服务方式等途径,加强地方高校科研成果的研究与推广,同时,鼓励高校教师积极参与地方经济的发展,进而提升地方高校为地方经济建设服务的能力。     

益生菌发酵制备金针菇抗氧化肽的研究

试验旨在获得高活性的金针菇抗氧化肽，优化益生菌发酵制备金针菇抗氧化肽的条件。试验以金针菇为发酵基质，以抗氧肽对2,2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）自由基清除率为指标，对枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和黑曲霉3种益生菌进行了筛选，使用pH值沉淀法分离抗氧化肽的最适pH值，采用单因素和响应面试验对发酵条件（液料比、发酵时间、发酵温度、金针菇用量）进行考察。结果显示，枯草芽孢杆菌适合发酵金针菇制备抗氧化肽；沉淀抗氧肽的最适pH值为6；最佳发酵条件为液料比4.50 mL/g、发酵时间30 h、发酵温度35℃、金针菇用量40.00 g，此条件下金针菇抗氧化肽对ABTS自由基清除率预测值为95.60%，实测值为96.75%，实测值与预测值相差很小，表明此响应面法优化的工艺可靠，截留分子量小于3 kD的抗氧肽活性最强。研究表明，通过此法制备的金针菇抗氧肽具有很强的抗氧化性，为金针菇产品的开发利用提供了参考。     

中介蝮蛇毒纤溶酶基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

为了从中介蝮蛇毒腺中提取总RNA,研究其具有重要药用价值的纤溶酶,从基因工程的角度进行研究开发蛇毒资源。通过RT-PCR法扩增纤溶酶基因与pMD18-T载体连接进行TA克隆,得到FLE基因,再亚克隆到pPROEXHTb原核表达载体上,构建重组表达载体;将阳性重组表达载体转化到大肠杆菌中诱导表达,采用SDS-PAGE检测该重组蛋白的分子量。结果表明：成功的构建了重组原核表达载体ppPROEXHTb-FLE,并在大肠杆菌中获得表达,重组蛋白分子量约为30 KDa。说明可以采用该方法进行中介蝮蛇毒纤溶酶的原核表达,该研究为进行蛇毒纤溶酶的开发奠定了分子基础。     

中介蝮蛇毒纤溶酶基因克隆及生物信息学分析

目的：克隆中介蝮蛇(Gloydius intermedius)纤维溶解酶（Fibrinolytic enzyme,FLE）基因,分析其基因序列并对该基因的功能进行分析。材料及方法：从中介蝮蛇毒腺细胞中提取总RNA,通过RT-PCR法扩增纤溶酶基因,与pMD18-T载体连接进行TA克隆,再进行序列的测定并且对该序列进行分析。结果：扩增得到完整开放读码框在内的长为777bp的纤溶酶基因序列。结论：成功克隆了编码中介蝮蛇纤溶酶的基因序列,推导其编码的氨基酸序列。开放读码框编码258个氨基酸,含有大量疏水氨基酸。其中,前1-19位氨基酸编码信号肽;根据同源性推测,以His65、Asp110和Ser204组成纤溶酶的活性中心并高度保守;序列内含12个Cys,两两配对结合成的6个二硫键对纤溶酶的高级构型和稳定性至关重要。成功克隆中介蝮蛇毒纤溶酶基因为进一步研究该基因的遗传特征以及为该酶在原核及真核生物中的表达研究提供依据。     

秸秆袋料栽培香菇培养料配方的优化

以玉米秸秆为主料,设置不同的培养基配方栽培香菇X6,考察各培养基对香菇菌丝生长和子实体形态、产量、营养成分的影响,以确定最佳的培养料配方。结果表明,以玉米秸秆粉62%、木屑26%、麦麸10%、蔗糖1%、石膏1%的培养基配方培养的香菇菌丝生长最正常、转色程度好以及子实体产量与生物学效率均接近以木屑为主料的常规配方,说明该配方可代替常规木屑配方用于香菇生产。