大熊猫IL-4基因的克隆与序列分析

应用RT-PCR技术从ConA诱导培养的大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到大熊猫IL-4基因,并将其克隆到PGEM-T载体中。经菌落PCR鉴定、序列测定及序列分析,结果表明,克隆得到的IL-4基因开放阅读框由396个核苷酸组成,编码一个由132个氨基酸组成的多肽,包括编码24个氨基酸的信号肽和108个氨基酸的成熟肽。与GenBank中已登录的大熊猫IL-4（DQ166512）的核苷酸序列同源性分别为99.5%和100%;与其他哺乳动物如犬、猫、人、猪、牛、羊、马、兔、鼠等的IL-4核苷酸同源性为50.7%（鼠）～87.7%（犬）;IL-4编码氨基酸同源性在35.7%（鼠）～78.8%（犬）;进化树构建结果表明,大熊猫与犬、猫遗传距离最近。     

中国大耳白肉兔IFN-γ、IL-2和IL-4基因的克隆测序与进化分析

实验应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,在国内首次从ConA诱导培养的中国大耳白肉兔外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到IFN-γ、IL-2和IL-4基因,并将其克隆到PGEM-T载体中,经菌落PCR鉴定、序列测定及序列分析,结果表明:①经克隆得到的IFN-γ基因(序列号:DQ852341),与Genbank中已登录的欧洲兔IFN-γ基因(序列号:AB010386)的核苷酸序列和推知氨基酸序列的同源性均为100%;与其他哺乳动物如犬、猫、人、猪、牛、羊、马、大熊猫和鼠等的核苷酸同源性在63.0%(鼠)～77.6%(人)之间;编码氨基酸同源性在41.7%(鼠)～65.7%(人)之间;②扩增得到的IL-2基因(序列号:DQ852342),与Genbank中已登录的欧洲兔IL-2基因(序列号:AF068057)的核苷酸序列和推知氨基酸序列的同源性分别为99.6%和100%;与其他哺乳动物如犬、猫、人、猪、牛、羊、马、大熊猫和鼠等的核苷酸同源性在64.8%(鼠)～86.0%(人)之间;编码氨基酸同源性在55.7%(鼠)～80.1%(人)之间;③扩增得到的IL-4基因(序列号:DQ852343),与Genbank中已登录的欧洲兔IL-4基因(序列号:AF169169)的核苷酸序列和推知氨基酸序列同源性均为100%;与其他哺乳动物如犬、猫、人、猪、牛、羊、马、大熊猫和鼠等的核苷酸同源性在57.0%(大熊猫)～69.8%(人)之间;编码氨基酸同源性在43.0%(鼠)～53.6%(人)之间。用这3个基因分别构建的进化树结果都表明,兔与人的亲缘关系相对较近,与鼠的亲缘关系最远,这与传统的分类地位基本吻合,即兔与鼠应分别归为兔形目和啮齿目动物。     

人和动物阿米巴原虫病研究进展

阿米巴原虫病主要是由溶组织内阿米巴引起的一种人兽共患寄生虫病。自1875年Feder Losch首次在人体发现该病以来,已有9个不同种属的阿米巴被先后发现,已报道的易感动物达30多种。该类原虫多寄生于人和动物的肠道和肝脏,以滋养体形式侵袭机体,引发阿米巴痢疾或肝脓肿。文章综述了近年来人和动物阿米巴原虫病的病原学、流行病学、发病机理、诊断和防治等方面的研究进展。     

不同温度和pH对溶组织内阿米巴龟分离株生长的影响

采用营养琼脂双相培养基对溶组织内阿米巴龟分离株进行了不同温度(25,30,34,37℃和40℃)和pH(1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0,8.0,9.0和10.0)环境条件下的体外培养观察。结果表明,溶组织内阿米巴龟分离株在25℃~40℃之间均可生长,最适生长温度为37℃;在pH 1~2之间不生长,pH 3~10之间可以生长,最适生长范围为pH 5~8。     

凹甲陆龟溶组织内阿米巴原虫病的病理组织学观察

对患溶组织内阿米巴原虫病而死亡的凹甲陆龟进行了系统的病理组织学观察，该病的病变主要发生在消化道、肝、心脏、肾、脾等部位，尤以胃肠道和肝病变最为明显，表现为卡他性一坏死性胃肠炎和坏死性一肉芽肿性肝炎，胃肠黏膜出血、水肿、上皮细胞变性、坏死脱落，形成溃疡灶；肝细胞水泡变性，细胞核裂解，肝小叶内可见大小不等的结节性坏死灶，并伴有明显的炎症反应。     

凹甲陆龟溶组织内阿米巴原虫病的病原分离培养与鉴定

用蛋白胨、兔血清和可溶性淀粉分别替换传统培养基中的牛肉汤、小牛血清和米粉后，将凹甲陆龟新鲜病料接种于营养琼脂双相培养基中，进行了阿米巴原虫的多种生物并存培养，培养结果表明阿米巴虫体生长良好，虫体数急剧上升，连续传代效果亦很好。同时，对分离培养出的阿米巴滋养体和包囊的形态特征作了详细的观察和描述，根据其形态特征初步鉴定为溶组织内阿米巴。     

鱼病的防治

鱼白头·白嘴·赤皮·烂鳃·烂尾·烂翅·打火印病采用消毒药漂白粉。用法¨将漂白粉溶解水中全池泼洒。水浅的少泼一些’水深的地方多泼一些。用量¨预防按每六百六十七平方米︵一市亩︶水深一米计算使用漂白粉零点四五千克。治疗则是预防的三倍至四倍药。使用时间¨以每天下午六点至七点钟气温低时进行注意事项¨鱼正在漂头禁用漂白粉’此时如必须用则先用百分之零点五的食盐水向鱼漂头处泼洒’使漂头鱼全部沉入水下’再泼洒漂白粉消毒。天即将下雨不能使用’在此时鱼将上浮。如在这两个时候使用漂白粉泼洒消毒’鱼将吃上引起严重中毒死亡…     

大熊猫γ-干扰素基因的克隆与序列分析

本实验应用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术,从ConA诱导培养的大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到大熊猫γ-干扰素基因（GenBank accession No：DQ630727）,并将其克隆到pGEM-T载体中。经菌落PCR鉴定、序列测定与序列分析,结果表明,经克隆得到的IFN-1基因开放阅读框由498个核苷酸组成,编码一个由166个氨基酸组成的多肽,包括编码19个氨基酸的信号肽和147个氨基酸的成熟肽,预测蛋白分子量和等电点分别约为20Ku和9．36。与GenBank中其他哺乳动物的IFN-γ基因比较,它与犬、猫、人、猪、牛、羊、马、兔、鼠等的核苷酸序列同源性在57.7％（鼠）-93．2％（犬）之间;IFN-γ编码氨基酸序列同源性在46．8％（鼠）-92．8％（犬）之间;进化树构建结果表明大熊猫与犬的遗传距离最近。