表达猪轮状病毒VP4基因重组乳酸球菌表达载体构建及免疫原性分析

 【目的】构建猪轮状病毒主要保护性抗原VP4基因的重组乳酸乳球菌口服疫苗,为猪轮状病毒的防治提供有效方法。【方法】将猪轮状病毒免疫保护性抗原基因VP4主要结构功能区定向插入乳酸菌表面表达载体pNZ8112,电转化乳酸乳球菌NZ9000,构建了pNZ8112/NZ9000乳酸乳球菌表面表达系统。通过SDS-PAGE、Western-blot和免疫荧光方法鉴定,以此活菌系统口服免疫6～8周龄Balb/c小鼠,测定了免疫动物的局部体液免疫和系统免疫应答。【结果】证明插入的外源基因在菌体表面得到了正确表达,表达猪轮状病毒免疫保护性抗原的重组乳酸乳球菌免疫动物后,分别在粪便、泪液和阴道洗液中检测到了特异性分泌型IgA抗体和在血液中检测到了IgG抗体的存在;体外细胞中和试验结果表明,血清抗体对猪轮状病毒的中和效价为1﹕40。【结论】表达猪轮状病毒免疫保护性抗原的重组乳酸乳球菌口服免疫动物能够产生良好的局部和系统体液免疫应答而且具有免疫中和效力。     

抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体制备及部分特性鉴定

以原核表达系统pGEX-6p-1-N/BL21经IPTG诱导表达的重组PEDV N-GST融合蛋白作为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术,制备单克隆抗体,用原核表达系统T12-pPROHTa/BL21经IPTG诱导表达的PEDV N蛋白做筛选抗原,通过间接ELISA进行筛选,获得两株抗PEDV N蛋白杂交瘤细胞,命名为2E3、4C6。亚类鉴定为IgG1和IgG2a型,均为к链抗体,染色体数平均为(91±7)对。用制备的单抗与pGEX-6p-1-N/BL21、T12-pPROHTa/BL21诱导表达后的菌体裂解物做Western Blot试验,在不同载体表达的N蛋白处出现明显的特异性条带;通过间接ELISA做病原检测,这两株单抗不与TGEV、PRV和PrV发生交叉反应,而与PEDV显示良好的特异性反应。     

国外重大动物疫病流行现状与技术发展趋势分析

在全球经济一体化的今天,动物及其产品的国际贸易进一步加剧了动物疫病的流行与传播。同时,动物疫病的流行与传播常常导致重大的经济、社会和公共卫生问题,造成巨大的经济损失,影响人类食品供应与食品安全,威胁人类健康和社会稳定。世界卫生组织（WHO）、世界动物卫生组织（OIE）等国际机构多次强调传染病对畜牧产业和濒危动物保护的危害日趋严重,     

泻康宁对感染大肠杆菌雏鸡抗氧化功能的影响

为揭示大肠杆菌感染对雏鸡抗氧化功能的变化影响及泻康宁的保护效应 ,采用人工感染方法 ,建立雏鸡大肠杆菌病损伤模型 ,测定血清和组织中GSH -Px、SOD、MDA的水平。结果感染组和泻康宁组与对照组相比较 ,GSH -Px、SOD的活性明显下降 ,MDA的含量明显升高 (P <0 .0 1或P〈0 .0 5 )。而且泻康宁组与感染组相比较 ,GSH -Px、SOD活性明显升高 ,MDA的含量明显下降 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。提示雏鸡感染大肠杆菌后抗氧化功能的改变可能是发病的因素之一 ,泻康宁对雏鸡大肠杆菌病具有保护作用。     

我国非人灵长类实验动物产业发展的现状、问题及对策

非人灵长类是人类近亲。作为重要科技支撑条件,在引领和支撑生命科学研究、生物技术创新和生物医药产业发展中发挥着不可或缺的重要作用,其战略地位受到了世界各国的普遍重视。我国对非人灵长类实验动物资源建设与共享,重大疾病模型的自主研发高度重视,在《国家"十二五"科学和技术发展规划》以及《科研条件发展"十二五"专项规划》中明确提出了"加强具有中国特色实验动物资源培育,重点     

热休克蛋白70在抗感染与免疫中的作用

抗感染免疫是动物机体抵抗病原体感染的能力。热休克蛋白70通过激活天然免疫细胞活化等方式参与机体天然免疫．通过调节抗原递呈细胞对抗原的加工与递呈，增强免疫应答和参与免疫球蛋白组装等方式发挥对适应性免疫的影响．进而参与感染与免疫。根据国内外近年来对热休克蛋白70的研究概况．对热休克蛋白70在机体抗感染免疫中的作用进行了综述...     

中国生物质能源发展现状及问题探讨

当前世界正面临着严重的化石能源危机,生物质能源发展已受到越来越多国家的关注。文章综述了生物燃气、生物液体燃料、微藻能源、固体成型燃料等生物质能源技术的主要进展,分析了我国生物质能源产业发展中出现的一些问题,并基于此提出了完善和修改生物质能源产品价格补贴、强制性生物质液体燃料收购、鼓励生物质液体燃料消费等激励政策,设立专项加快开发和应用具有自主知识产权的国产化技术,以及大力度发展非粮生物质能源和利用边际土地建立生物质能源基地等政策建议。     

猪传染性胃肠炎病毒LJ-12株的分离与鉴定

对黑龙江省某猪场腹泻仔猪的粪便进行病毒分离,获得1株疑似猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),命名为LJ-12株。在原代猪肾细胞上盲传8代后细胞出现病变,用TGEV S基因的1段特异性引物进行RT-PCR方法检测,扩增出与预期结果相一致的约480 bp的目的基因片段;核酸序列测定结果表明该段基因与TGEV TH-98株的核苷酸同源性为98.5%,氨基酸同源性为98.8%;并通过间接免疫荧光试验,超薄切片电镜观察等方法确定该分离毒株为猪传染性胃肠炎病毒。     

外来动物疫病的主要危害及防控启示

近年来,我国参与国际贸易日益频繁,外来动物疫病传入我国的风险日益增加,防控形势十分严重。本文综述了我国近年来外来动物重要疫病的种类以及防控体系中存在的问题,进而提出了主要应对措施。随着我国对外经济贸易的快速发展、国际间人员交流的日益频繁、进出境动物及其产品数量与批次的逐年增多,外来动物疫病传入我国的风险与日俱增。如何有效地将外来动物疫病阻挡于国门之外,维护我国畜牧业的健康发展和国民身体健康,已成为当务之急。     

鹅细小病毒VP2基因原核及真核表达载体的构建

将鹅细小病毒VP2基因在克隆到原核表达载体pPROEX-HTb及真核转移载体pFASTBAC-HTb中，重组真核转移载体在DH10BAC中经转座作用，成功构建了表达VP2基因的原核表达载体pPROEX-HTb-VP2和杆状病毒表达载体BAC-VP2。经限制性内切酶酶切及PCR分析，确定为阳性重组子。