禽安卡拉病毒Hexon蛋白多克隆抗体的制备

为进一步建立Ⅰ群血清4型禽腺病毒(FADV-4)的特异性检测方法,根据本实验室分离鉴定的安卡拉病毒的基因组序列,设计针对六邻体蛋白(Hexon)基因的特异性引物,经PCR扩增,连接至p ET-28a中,构建原核表达载体p ET-28a-Hexon。将其转化感受态BL21中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS-PAGE分析,获得重组蛋白大小为49 ku。Western blot分析纯化后重组蛋白能与FAd V-4阳性血清发生特异性反应。将纯化后的重组蛋白免BALB/c小鼠,制备了六邻体蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA方法测定效价表明制备的血清效价大于1∶64 000。     

鸡传染性喉气管炎气管粘膜扫描电镜观察

对１４周龄的４２只ＳＰＦ鸡经气囊感染鸡喉气管炎病毒，通过扫描电镜观察，对不同感染阶段试验鸡的气管粘膜病变情况进行了研究。结果表明：感染后１～２ｄ时，气管粘膜上皮细胞纤毛顶端部分融合，逐渐变短；３～４ｄ时，纤毛断裂、脱落，上皮细胞裸露，部分融全成合胞体细胞，并见少量白细胞渗出；５～１０ｄ时，纤毛大部分溶解、消失，粘膜上皮细胞坏死、溶解、脱落，大量炎性渗出物和炎性细胞渗出。     

鸡传染性喉气管炎的病理学研究

本研究对１４ 周龄的４２ 只 Ｓ Ｐ Ｆ鸡经气囊感染鸡喉气管炎病毒，通过病理组织学和扫描电镜检查，对不同感染阶段试验鸡进行研究。试验结果表明：感染后１２ｈ 气管粘膜淋巴细胞开始增生，以后逐渐增多，在８～９ ｄ 时逐渐减少，１２ ｄ 时基本降到原有水平；感染后２４ ｄ 气管粘膜上皮细胞开始形成合体细胞，３～４ ｄ 时普遍转变为合体细胞，并坏死脱落，６～７ ｄ 时出现再生，１２ ｄ 时基本恢复原有结构；腺体细胞在感染后坏死最早最严重，腺体细胞也是包涵体形成最早的细胞；在感染１２ ｄ时，气管粘膜上皮细胞纤毛项端开始融合并缩短，随后融合加剧，最终变成颗粒状或断裂脱落，上皮细胞表面裸露。除气管的病变外，肺脏发生支气管炎及出现核内包涵体，脾脏淋巴细胞，巨噬细胞增生及坏死，胸腺和法氏囊淋巴细胞增生及轻度坏死等变化。     

蛋鸡J亚群禽白血病与马立克氏病混合感染的病理学诊断

对湖北省某鸡场26日龄蛋鸡出现的鸡马立克氏病和J亚群禽白血病混合感染病例进行了病理学观察。结果显示,眼观肝脏表面和心肌上有弥漫性针帽大或拇指大的灰白色结节,镜检在肝、脾、肺、心肌组织中发现有局灶或条索状多形态的淋巴细胞增生,还有散在的髓细胞样瘤细胞增生。     

实验感染肉鸡组织中J亚群禽白血病病毒的抗原定位

从实验感染J亚群禽白血病病毒(ALVJ)的髓细胞性白血病肉鸡病例中,选取典型病例,用J亚群禽白血病病毒单克隆抗体通过免疫酶组化试验对不同组织进行了抗原定位观察。结果显示:在实验感染阳性肉鸡体内实质组织细胞及瘤细胞的核膜和细胞浆里可见不同程度的棕黄色阳性反应,可为探讨ALVJ对体内组织细胞的嗜性提供依据。     

J亚群禽白血病病毒膜表面糖蛋白基因gp85的克隆与表达

以pGEM-IMC2.2重组质粒为模板扩增禽白血病病毒内蒙株IMC10200gp85基因，构建了转移栽体pFast Bacl-IM gp85，并利用Bac-to-Bac表达系统获得了重组杆状病毒rBac-IMC gp85。转染Sf9细胞后的表达研究表明，重组杆状病毒可高效表达IMC10200的gp85基因，表达产物具有病毒的抗原特异性，与ALV-J单抗JE9有强的间接免疫荧光反应。蛋白质印迹法分析表明，表达产物的分子质量约54ku。     

一例牛泰勒焦虫病的诊断与分析

牛泰勒焦虫病（theileriasis of cattle）是由泰勒科泰勒属的各种原虫寄生于牛红细胞、淋巴细胞、巨噬细胞内引起的一种寄生性血液原虫病[1],以高热稽留、贫血、消瘦、体表淋巴结肿大为特征。该病发生有明显的季节性,传染性强、死亡率高,使养牛业遭受严重损失。2013年6月份湖北省某个体养牛场患病肉牛,经流行病学调查、临床诊断、血液涂片检查、PCR检测等方法,确诊为泰勒焦虫感染。     

IMC10200株ALV-J实验诱发禽骨髓性白血病的研究

对分离自肉种鸡群亚临床感染的J亚群禽白血病病毒IMC1o200株进行了实验感染诱发禽骨髓性白血病的病理学研究.IMC10200株J亚群禽白血病病毒尿囊腔接种11日龄肉鸡胚和SPF蛋鸡胚,孵出后跟踪观察.9周龄时随机抽检感染鸡,感染肉鸡特异引物PCR检测全部为阳性;组织病理学观察感染鸡无明显病变.至21周龄时感染肉鸡出现第一例典型骨髓性白血病病例;感染SPF蛋鸡未见明显J亚群禽白血病相关病变.     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗的研究

选用ＡＥＶ－ＮＨ９３７株Ｅ８－１２为制苗种毒,接种易感鸡胚制备抗原,经甲醛溶液灭活制成的禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗,物理性状检验、无菌检验、安全检验、效力检验合格,疫苗ＰＤ５０≥３２,疫苗免疫期成鸡至少一年,雏鸡至少半年,疫苗稳定性好,４℃－８℃保存期为１２个月,１０℃－２４℃保存期为６个月。田间试验、中间试制和区域试验安全、有效,反应良好,该疫苗能够预防禽脑脊髓炎的发生。