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为快速准确地测定烟草中的蛋白质含量,建立并优化了BCA-TCA法,即提取烟叶蛋白质的最佳体系条件为pH值7.0的0.05 mol/L PBS缓冲液、液料比40 m L/g,使用TCA沉淀蛋白质,利用差减法去除烟叶中还原性物质对BCA方法准确性的影响,从而准确测定样品的蛋白质含量。结果表明:该方法测得的烟叶样品蛋白质含量变异系数小于5%,重复性较好;样品的加标回收率为96.39%,加标回收变异系数为0.75%2%,准确度高;BCA-TCA法和克达尔法测定值的t检验结果为t=1.554 5t_(0.05),8=2.306,说明2种方法在95%的置信区间内无显著差异,但建立的BCATCA法将耗时缩短至2.5~3.5 h,且操作步骤简捷、所用设备简单。可见,建立的BCA-TCA法能够快速准确地测定烟草中的蛋白质含量。 相似文献
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