O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的原核表达与抗原性分析

研究分析了O型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1与当前猪FMDV疫苗血清的免疫反应性.将VP1基因克隆至原核表达载体pET32c,并在大肠埃希菌BL21中得到了表达,Western blot分析表明该重组蛋白与豚鼠O型FMDV标准阳性血清具有良好免疫反应性.目的蛋白经纯化后用ELISA分析其与猪疫苗血清的免疫反应性,结果显示该重组VP1蛋白(rVP1)只能与部分O型FMDV疫苗血清反应.推测当前使用的不同O型FMDV疫苗毒株在VP1重要中和抗原位点G-H环(134 aa～158 aa)与C末端(200 aa～213 aa)存在较大差异.     

微生物法测定维生素饮料中的维生素B12

利用莱士曼氏乳酸杆菌（ATCC 7830）对维生素B12极高的灵敏性和特异性,定量测定试样中维生素B12含量。以不同浓度标准溶液的吸光度相对于各浓度水平标准物质的浓度绘制标准曲线,计算出试样维生素B12含量,方法精密度分别为1.4%,1.2%及1.3%,相对标准偏差为0.738 0%,回收率在96.5%以上。     

具无界时滞非自治平方Logistic模型的全局吸引性

考虑非自治平方 L ogistic模型 Δxn=rnxn(1- bxn- kn- cxn- kn2 ) ,n=0 ,1,2… ,其中 { rn}为非负实数列 ,b≥ 0 ,c>0 ,{ kn}是非负整数列 ,{ n- kn}非单调递减 ,且 limn→∞(n- kn) =∞ ,给出了保证其每一正解 { xn}满足 limn→∞xn=x的一族充分条件 (其中 x是正平衡点 ) ,并推广和改进了已有的结果     

子阵约束下矩阵方程AX=B反问题的实反对称解及其最佳逼近

利用矩阵的奇异值分解及广泛逆，给出了子矩阵约束下矩阵方程AX＝B反问题有实反对称解的充分必要条件及其通解的表达式，另外，给出了解集合中与给定矩阵的最佳逼近解的表达式以及求解最佳逼近解的一个数值算法和一个数值例子。     

微生物法测定维生素功能饮料中的肌醇含量

[目的]基于葡萄汁酵母菌(ATCC 9080)对肌醇的特异性和灵敏性,定量测定出维生素功能饮料中肌醇的含量。[方法]在含有除肌醇以外所有营养成分的合成培养基中,葡萄汁酵母菌的生长量随着肌醇浓度的增大而增大,且在一定浓度范围内呈线性关系,根据培养后菌悬液的吸光度值与肌醇标准工作曲线进行比较,计算出维生素饮料中肌醇的含量。[结果]微生物法测定肌醇的线性范围为1~10μg,测定3种不同品牌维生素功能饮料中肌醇的方法精密度分别为3.85%、2.46%及2.19%,相对标准偏差(RSD)为1.424%,回收率在95%以上。[结论]微生物法具有快速、简便、检出限低、灵敏度高等优点,是测定维生素饮料中肌醇的有效方法。     

子阵约束下实矩阵反问题有解的条件

讨论了如下两类问题 :问题 :给定 X∈ Rn× k,B∈ Rm× k,A0 ∈ Rp× q,求 A=A1 1 　 A1 2A2 1 　 A2 2∈ Rm× n使得 AX=B,A1 1 =A0 .问题 :给定 A*∈ Rm× n ,求 A∈ SA使得‖ A* - A‖ =minA∈ SA‖A* - A‖ .其中 SA是问题 的解集合 .给出了问题 有解的充分必要条件及解集合 SA 的一般形式 .对于问题 2 ,给出了解的表达式及一个数值算法与数值例子 .     

新城疫病毒HN蛋白抗原表位分析及结构域基因原核表达

以本实验室构建的含新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶基因重组质粒为模板，设计引物通过PCR和重叠-延伸PCR扩增，获得HNa、HNb和HNa-L-b三种抗原结构域基因片段，BamHⅠ／HindⅢ双酶切定向克隆到原核表达载体pET32c，获得重组质粒分别命名为pET32c—HNa、pET32c-HNb和pET32c．HNa—L—b。重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞BL21，筛选出阳性克隆，诱导表达并取产物进行分析。结果表明，HNa、HNb、HNa-L-b结构域基因片段均获得了融合表达。Western-blotting分析证实表达产物HNa和HNb与NDV阳性血清具有免疫反应性。本试验结果为进一步研究HN蛋白抗原结构域的免疫原性以及HN蛋白与F蛋白在细胞融合中的相互作用奠定了基础。     

多重PCR方法检测食品中霍乱弧菌、副溶血性弧菌和单核细胞增生李斯特氏菌

通过扩增霍乱弧菌(VC)、副溶血性弧菌(VP)和单核细胞增生李斯特氏菌(LM)的特异性核酸片段,建立了VC、VP和LM的多重PCR检测方法,相应的扩增片段分别为588、450、234 bp。该方法特异性强、灵敏度高、简便、快速,可实现对上述致病菌的同时检测,在接种食品中检测灵敏度达到103 CFU/mL。     

新城疫病毒F蛋白结构域基因原核表达与抗原表位分析

以含新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因的重组质粒为模板,设计特异引物进行重叠-延伸PCR扩增获得F基因的抗原结构域基因片段Fa、Fb和Fa-l-Fb,经SalⅠ和NotⅠ酶切后,定向插入原核表达载体pGEX-6P-1,获得重组质粒pGEX-Fa、pGEX-Fb和pGEX-Fa-l-Fb;用定点突变方法获得重组质粒pGEX-Fa-mut.将重组质粒转化大肠杆菌BL21,转化菌经IPTG诱导、提取表达产物进行蛋白电泳和免疫印迹分析.结果表明:Fa-mut、Fb和Fa-l-Fb结构域基因均获得了融合表达,表达产物与NDV阳性血清具有免疫反应性;与pGEX-Fa-mut不同,pGEX-Fa重组质粒在大肠杆菌中未能表达,且转化菌在IPTG诱导过程中未见生长,提示未经突变的Fa片段可能为毒性蛋白.三维结构预测结果显示,目的蛋白片段中均保留F蛋白中原有相应的抗原表位.     

微生物法测定维生素饮料中的维生素B_6

[目的]建立维生素饮料中维生素B6的微生物检测法。[方法]利用卡尔斯伯酵母菌(ATCC 9080)对维生素B6极高的灵敏性和特异性,定量测定出试样中维生素B6含量。即以不同浓度标准溶液的吸光度相对于各浓度水平标准物质的浓度绘制标准曲线,再根据标准曲线计算出试样中维生素B6的含量。[结果]试验方法精密度分别为1.5%、1.1%及1.5%,相对标准偏差为0.788 7%,回收率在96.5%以上。[结论]微生物法可以作为维生素饮料中维生素B6的检测方法,且灵敏度高、测定结果准确。