慢肝养阴胶囊挥发性成分的分析

分析慢肝养阴胶囊中挥发性成分。采用水蒸气蒸馏法提取挥发性成分并通过气相色谱-质谱联用技术进行分析。通过检索NIST08标准质谱图库鉴定出59种成分,占总量的83．16％。含量较多的3个化合物分别是8,9-去氢-9-甲酰基-环异长叶烯（7．0％）、棕榈酸乙酯（5．9％）和4,8,13-杜法三烯-1,3-二醇（5．7％）。慢肝养阴胶囊挥发性成分主要为萜类和酯类,占总成分的61．83％。     

对羟基苯甲酸对菘蓝幼苗生长的影响

研究了对羟基苯甲酸对菘蓝幼苗生长和生理指标的影响。结果表明,菘蓝幼苗的株高、茎叶鲜重、茎叶干重、根质量随对羟基苯甲酸处理浓度的增大呈先升高后降低的趋势;幼苗电解质外渗率、过氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)随着处理浓度的增大逐渐升高,过氧化物歧化酶(SOD)随处理浓度的增大呈先升后降的趋势。表明对羟基苯甲酸是菘蓝发生连作障碍并导致产量降低的重要因素之一。     

金鱼HSC70和HSP40基因克隆及其原核表达

[目的]克隆金鱼热激同源蛋白70(HSC70)和热休克蛋白(HSP40)基因,构建原核表达载体并通过IPTG诱导表达获得目的蛋白,明确HSC70和HSP40蛋白的生物学功能,为揭示金鱼的高温应答机制打下基础.[方法]提取金鱼鳃组织总RNA,利用RT-PCR扩增金鱼HSC70和HSP40基因,将目的基因片段克隆至线性空表达载体pET-32a上构建原核表达载体pET-32a-HSC70和pET-32a-HSP40,转化大肠杆菌Rosetta表达菌株后用IPTG进行诱导表达,并以SDS-PAGE和Western blotting检测分析表达获得的融合蛋白.[结果]金鱼HSC70基因CDS序列全长1950 bp,编码650个氨基酸;金鱼HSP40基因CDS序列全长996 bp,编码332个氨基酸.金鱼HSC70氨基酸序列与斑马鱼、人类、家鼠、金线鲃和草鱼的相似度分别为96.28%、95.50%、95.35%、98.15%和98.61%;HSP40氨基酸序列与斑马鱼的完全一致(相似度100.00%),与普通鲤鱼、金线鲃、人类和家鼠的相似度均为94.12%.原核诱导表达获得的融合蛋白Trx-HSC70和Trx-HSP40为可溶性表达,其大小约91.5和55.0 kD,均能与Anti-Trx抗体发生特异性反应.[结论]HSC70和HSP40蛋白在鱼类及哺乳动物中高度保守,经原核诱导表达获得的金鱼融合蛋白Trx-HSC70和Trx-HSP40为可溶性表达,且携带有Trx标签,能与Anti-Trx抗体发生特异性反应,可作为互作蛋白用于RNA pull down试验.