猪轮状病毒DN30209株VP4全长蛋白表达及多抗制备和鉴定

为开展猪轮状病毒（PRV）及其VP4蛋白相关特性研究,参照GenBank所收录的猪轮状病毒JL94、OSU等株序列设计一对特异性引物,从实验室分离鉴定的猪轮状病毒DN30209株扩增约2330 bp VP4全长基因,并成功构建重组质粒VP4-pMD18-T。重组质粒经测序、序列比对及分析。结果表明,DN30209株VP4全基因长2331 bp,与参考株JL94的核苷酸同源性为99.7%,氨基酸同源性为99.5%。将VP4基因连接到pGEX-6P-1原核表达载体中,构建并筛选出阳性原核表达载体重组质粒VP4-pGEX-6P-1。阳性重组质粒转化Rosetta宿主菌感受态细胞中,经IPTG诱导,获得以包涵体形式表达的重组蛋白,融合蛋白大小约为112 ku,与预期大小相符。回收、纯化并复性该蛋白,将其作为免疫原免疫大白兔,制备兔抗PRV VP4全长蛋白多克隆抗体,间接ELISA测定多抗效价到1??105,间接免疫荧光（IFA）和免疫印迹（Western blot）检测表明该多抗均可与PRV具有很好的抗原抗体反应性,为猪轮状病毒研究提供有效实验材料。     

阿特拉津对雏鸡的急性毒性作用和骨髓微核率的影响

为了研究阿特拉津对雏鸡的急性毒性作用和致突变作用,本试验运用Weil's方法设计试验,测得阿特拉津对雏鸡的半数致死量(LD50),在此基础上,将雏鸡分为试验组(高、中、低浓度3组)、阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(环磷酰胺),连续染毒9d后采样,取胸骨骨髓,检测骨髓细胞微核率.结果表明,LD50为451 mg/kg体重,试验组骨髓细胞微核率与阴性对照组比较有极显著性差异(P＜0.01),且呈剂量-效应关系,表明阿特拉津对雏鸡骨髓细胞突变有诱变作用.