牦牛、藏山羊胚胎下颌不同类型毛囊形态发生及其β-catenin表达规律比较

为了研究牦牛、藏山羊胚胎下颌不同类型毛囊的形态发生及其β-catenin的表达规律,试验以牦牛和藏山羊胚胎下颌不同类型毛囊为模型进行了研究。结果表明:胡须毛囊形态发生过程经历了与体毛毛囊相似的毛基板、毛芽、毛钉和成熟毛囊4个阶段,但其存在特殊的群体分布特征;β-catenin表达规律也类似于体毛毛囊,在毛基板期β-catenin强表达于毛基板上皮部分,随后在毛芽、毛钉阶段减弱,直到毛囊开始分化成熟才再次出现于毛球毛母质部;在整个毛囊发生过程中,毛囊上皮-间充质β-catenin表达存在时相差异,这种差异在牦牛胡须毛囊发生过程中尤为明显。     

牦牛角真皮乳头cDNA文库的构建

构建cDNA表达文库用于克隆和研究牦牛角生长相关基因.Trizol提取牦牛角真皮乳头总RNA并纯化mRNA,用ZAP Express cDNA Synthesis Kit合成双链DNA,进行末端修饰,接入ZAP表达载体.经Gigapack Ⅲ Gold Packaging extract体外包装,转染XL1-Blue MRF'宿主菌,形成初级文库,初级文库进一步扩增形成稳定的cDNA文库.结果表明,文库库容量为4×107,重组率达93%,为进一步从文库中筛选相关基因提供了有效工具.     

外源性cAMP和cGMP对黑白花奶牛泌乳性能的影响

对泌乳黑白花奶牛分别注射cAMP+cGMP组合剂、组合剂cGMP和自制环核苷酸组合剂(cAMP+cGMP).注射当月各组奶牛产奶量无差异;注射后1月,奶牛日平均产奶量比对照分别提高14.1%、23.6%和19.7%,差异达显着水平(P<0.05).对血液和乳生化指标测定结果表明,cGMP是提高黑白花奶牛产奶量的主要调节物;环核苷酸主要通过cGMP升高血糖、加快乳腺细胞乳的合成速度,从而使产奶量提高.     

杜泊羊血液蛋白质多态性分析

采用垂直板高pH值不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳对21只杜泊羊的血红蛋白(Hb)、转铁蛋白(Tf)、白蛋白(Alb)、前白蛋白(Pa)和慢α2球蛋白(Sα2)5个基因座的多态性进行了分析。结果表明杜泊羊的Hb、Tf位点存在多态性,Hb位点共检测到HbA和HbB2个等位基因,构成HbAA、HbBB、HbAB3种基因型,其中HbBB和HbB为优势基因型和优势基因;Tf位点共检测到TfDD、TfCC、TfBD、TfCD4种基因型,受TfB、TfC、TfD3个复等位基因控制,其中TfCC、TfDD基因型和TfC、TfD基因为优势基因型和优势基因。试验未在Alb、Pa和Sα2位点检测出多态性,它们均呈现单态。     

杜泊羊种质特性初步研究

本文对杜泊羊的种质特性进行了观测和分析,结果表明:该品种具有典型的圆桶状肉用体形、自动脱毛、适应性强、耐粗饲、生长速度快(日增重400g左右)、羔羊成活率高等特性,这对于杜泊羊的引种、扩繁和推广具有重要意义。     

牦牛胚胎皮肤及其附属物形态发生规律

通过胚胎组织切片及常规染色发现,胚胎期第35天已经初步分化形成皮肤,随后表皮经历复层化,真皮经历胞外基质纤维堆积,形成哺乳动物典型皮肤结构。毛囊形态发生开始于胚胎期第75天,经历基板形成、毛芽、毛钉和毛囊分化成熟几个主要阶段。初级毛囊形成过程中伴随几波次级毛囊发生,最终形成由3种不同毛囊类型组成,呈单毛囊散在分布的毛被结构。皮脂腺和汗腺的发育伴随毛囊发生而发生,经历形态发生和分化成熟过程,最终形成毛囊-皮脂腺-汗腺单位。牦牛皮脂腺和汗腺分布于初级和次级毛囊,这种广泛分布特征体现了其环境适应性。     

牦牛角的形态发生及Shh和β-catenin的时空表达

研究对象为Ed(Embryonic days)60～240,0.5～5岁公牦牛角(原)基.采用石蜡切片、HE染色和免疫组化的方法研究牦牛角的形态发生过程,检测Shh(Sonic hedgehog)和β-catenin的时空表达与互作规律.结果表明,牦牛角的形态发生按照角(原)基毛囊和角质外鞘发生与否分为5个阶段:角原基前期(Ed≤60)表皮增厚,无毛囊发生;角原基中期(Ed60～140)表皮持续增厚,有少量毛囊发生;角原基后期(Ed140～250)表皮变薄,大量毛囊发生;肉角期(≤0.5 a)真皮乳头发生;成角期(≥0.5 a)形成角质外鞘.角原基期的顶部和角边缘处基底层Shh与β-catenin表达趋势相同,均为强-弱-强过程;肉角期的角边缘处基底层Shh与β-catenin同时表达,顶部仪β-catenin表达;成角期的角边缘处基底层Shh与β-catenin同时表达,顶部均无表达.结果提示:Shh在牦牛角的形态发生中负责表皮基底层形态分化,β-catenin则起着维持细胞分化状态并促进细胞增殖的作用.     

荣昌猪TYR基因的克隆测序及多态性检测

根据人、猪、牛的酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)基因部分序列(GenBank:AF237808,AF237809,AF181962,AY046527),利用Oligo6.0软件设计5对引物,对荣昌猪的TYR基因进行了PCR扩增,并用单链构象多态分析(SSCP)方法进行了多态性检测。结果发现,外显子1呈多态,其余3个外显子均呈单态。克隆测序首次得到猪的酪氨酸酶基因外显子2,3,4的部分序列(序列已被GenBank收录,登录号分别为AY236997,AY279998,AY242973),而且发现外显子1的多态是由于起始密码子上游第46位的G突变成A造成的。     

β-连环蛋白在胎牛睫毛毛囊发育中的表达

以胎牛为实验动物，应用免疫组化检测胎牛睫毛毛囊发育过程中不同阶段β-连环蛋白的表达变化。结果显示β-连环蛋白在毛囊发育早期和中期表达于睫毛毛基、毛芽和毛钉中，其中在隆突区及毛母质中强表达；毛囊发育晚期及成熟期于隆突区、内外根鞘近隆突区强表达，而在毛母质中表达减弱。β-连环蛋白的表达变化提示其在胎牛睫毛毛囊的形态发生及发育中具有重要作用。     

β-catenin在藏山羊切牙牙胚发育过程中的表达

研究β-catenin在藏山羊牙胚发育过程中的表达与分布变化,并探讨其在牙齿发育过程中的作用机制。制备藏山羊切牙各期标本,并采用免疫组化方法观察。结果表明,帽状期在星网层、内釉上皮、牙囊均为细胞核阳性表达;钟状早期在内釉上皮、牙乳头细胞核阳性表达;钟状晚期在颈环、牙尖细胞膜阳性表达;成釉期早期在成釉质细胞、成牙本质细胞阳性表达;成釉期晚期均阴性表达。β-catenin在早期牙胚发育中有特定的时空表达模式,通过参与Wnt信号通路和作为黏附分子两种方式,对确定牙胚的形态发生重要作用。