日本血吸虫铁蛋白基因在油菜中的表达

根据GenBank日本血吸虫铁蛋白基因(SjFer)的序列设计1对特异性引物,利用PCR从cDNA文库中扩增SjFer基因,与T载体连接并测序。常规方法构建植物表达载体SjFer/pBI121,采用根癌农杆菌介导法转化油菜子叶,组织培养卡那霉素抗性筛选,获得转化植株。转化植株通过PCR和Northern-blot杂交进行鉴定。结果表明SjFer可在油菜中正确表达。该研究为进一步研究转基因油菜工程疫苗奠定了基础。     

毛泽东道德观的形成过程与内容实质

论述了毛泽东道德观的形成过程及其主要内容。指出毛泽东道德观的确立深受其家庭、学校和湖湘文化的影响,后来逐渐接受马克思列宁主义发展成为共产主义道德观,其精神实质和核心是为人民服务。     

论"五个统筹"科学发展观与林业建设

党的十六届三中全会提出了统筹城乡发展、统筹区域发展、统筹经济社会发展、统筹人与自然和谐发展、统筹国内发展和对外开放的"五个统筹"新的科学发展观.林业建设关系到国家发展、民族兴衰,与整个国家的发展紧密相联,涉及国家经济安全,在"五个统筹"中占有极其重要的地位和作用.     

海峡两岸花卉产品产业内贸易实证分析

近年来,海峡两岸花卉产品贸易呈现出不断攀升的趋势。本研究在界定花卉产品范围的基础上,利用G-L指数、Aquino指数、边际产业内贸易指数(B指数)以及Thom & McDowell垂直和水平产业内贸易指数对1996-2013年海峡两岸花卉产业内贸易进行实证研究。结果表明:海峡两岸花卉产品产业内贸易水平较低,贸易方式以产业间贸易为主导。产业间贸易是推动两岸花卉贸易发展的主要动力,然而产业内贸易比重有不断增加的趋势;尽管近年来垂直型产业内贸易比重有所增加,两岸花卉产品产业内贸易仍以水平型产业内贸易为主。     

日本血吸虫SjIR3基因的克隆、表达和免疫保护力

为鉴定日本血吸虫重组蛋白SjIR(3rSjIR3)诱导小鼠抗攻击感染的免疫保护力,根据已报道的SjIR(3AY251481)的cDNA序列设计1对特异性引物,以日本血吸虫(Schistosoma japonicum)cDNA文库为模板扩增SjIR3基因,克隆到pMD-18-simple-T载体上,测序后进行生物信息学分析。然后将SjIR3基因克隆到pET-32a( )原核表达载体中构建重组质粒pET-32a( )SjIR3,转化Escherichia coli BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE及Western blot分析鉴定。结果表明SjIR3具有PS50204和SSF69572两个结构域(domain),属泛素样蛋白激酶家族,重组蛋白rSjIR3具有良好的免疫原性。动物保护试验采用昆明小鼠,结果表明rSjIR3及rSjIR3 FCA可诱导小鼠产生高水平的抗体应答及26.63%和36.38%的减虫率,以及34.79%和44.09%的减卵率。表明日本血吸虫rSjIR3可诱导小鼠产生一定的免疫保护作用。     

SjFer与GM-CSF共表达真核表达载体诱导小鼠免疫保护效果

根据GenBank中SjFer序列设计1对特异引物,以日本血吸虫(Schistosoma japonicum)cDNA文库为模板扩增SjFer基因,常规方法构建质粒pcDNA3.0/SjFer、pcDNA3.0/GM-CSF及pcDNA3.0/SjFer-GM-CSF。85只昆明小鼠分A、B、C、D和E组,分别于0、2和4周通过左后肢股四头肌注射生理盐水50μL/只,质粒50μg/只。感染前和每次免疫前采血收集血清,ELISA检测特异性IgG水平。末次免疫后2周每组随机宰杀小鼠5只无菌取脾,MTT法检测淋巴细胞增殖情况,取免疫部位的肌肉组织通过免疫组化检查重组质粒在小鼠肌细胞内表达情况。末次免疫后2周每只小鼠贴壁感染40±1条尾蚴,45d后宰杀观察减虫率和减卵率。结果表明,重组质粒能在小鼠肌细胞内表达;A、B和C组IgG水平变化不明显,D组和E组可诱导小鼠IgG水平升高,且E组高于D组。淋巴细胞转化试验结果A、B和C组OD570变化不明显,彼此无显著差异,D组和E组脾淋巴细胞转化率明显增加,与对照组差异显著,且E组OD570明显高于D组。D组和E组可诱导小鼠产生36.27%和39.22%的减虫率、36.10%和49.04%的减卵率。GM-CSF可增强体液和细胞免疫应答并显著增强pcDNA3.0/SjFer的免疫保护力。     

日本血吸虫SjIR3基因的克隆、表达和免疫保护力研究

鉴定SjIR3诱导小鼠抗攻击感染的免疫保护力。根据GenBank中的SjIR3（AY251481）序列设计特异性引物一对，以日本血吸虫cDNA文库为模板PCR扩增SjIR3基因，利用网上生物信息资源对SjIR3基因进行生物信息学分析。常规方法构建重组质粒pET-32a(+)/SjIR3，转化E.coliLB21，IPTG诱导表达重组蛋白SjIR3（rSjIR3），并利用SDS-PAGE及western-blot进行鉴定分析。动物保护试验用动物为昆明小鼠（雌性，20g），44只，随机分4组，每组11只：A组和B组为对照组，分别接种PBS和FCA；C组和D组为试验组，分别于背部多点注射接种50µg rSjIR3和50µg rSjIR3+FCA，免疫程序为0-2-4-8周。末次免疫后2 wK，每只小鼠攻击40±1条尾蚴，45天后剖杀，冲虫，计数减虫率和减卵率。免疫前和感染前尾静脉采血，ELISA检测IgG抗体水平。结果表明SjIR3 PCR扩增产物约为900bp，与GenBank 中的SjIR3（AY251481）100%的同源，为一跨膜蛋白，具有PS50204和SSF69572两个模体（Domain），为泛素样蛋白激酶家族。动物保护试验表明rSjIR3及rSjIR3+FCA免疫小鼠，可诱导产生26.63%、36.38%的减虫率和34.79%、44.09%的减卵率。结论：rSjIR3可诱导小鼠产生部分抗攻击感染的免疫保护力。     

毛泽东道德观的形成过程与内容实质

论述了毛泽东道德观的形成过程及其主要内容。指出毛泽东道德观的确立深受其家庭、学校和湖湘文化的影响，后来逐渐接受马克思列宁主义发展成为共产主义道德观，其精神实质和核心是为人民服务。     

农业气象灾害风险分析初探

中国一直都被称为"农业大国",所以,农业的发展对于我国的发展起着十分重要的作用。农业气象灾害是一种自然灾害,通常情况下,是指在农业生产的过程中,发生的会导致农业产量有很大程度降低的不利的天气或者是气候条件的总称。农业气象灾害是影响农作物生长、产量稳定的一个重要的因素,和农业的发展息息相关,由此给我们国家的经济也带来了很大的影响。本文主要对几种气象灾害对农业的发展带来的危害进行分析的基础上,总结出了对这些气象灾害进行防御的主要措施。     

GM-CSF与猪瘟病毒E2基因共表达载体的构建及其诱导的免疫应答

为探讨粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对猪瘟病毒E2基因核酸疫苗小鼠免疫应答诱导的影响,将CSFVE2基因和GM-CSF片段插入真核表达载体pcDNA3.0内构建pcE2,pcE2-GF及pcGF核酸疫苗.动物试验时,50只雌性供试小鼠随机分为5组,即pcE2,pcE2-GF,pcDNA3.0,pcGF,生理盐水组,每组10只.0,2,4周于小鼠左后肢胫前肌进行肌注免疫,质粒量为每只每次50μg.每次免疫前和末次免疫后2周尾静脉采血收集血清,ELISA检测血清内特异性IgG水平.末次免疫后1周每组随机选3只无菌取脾,MTT法检测淋巴细胞增殖情况.结果表明,与对照组比较,pcE2和pcE2-GF第3次免疫2周后,免疫小鼠IgG抗体水平逐渐增高,淋巴细胞的转化率也明显增高,且pcE2-GF免疫组的IgG抗体水平和淋巴细胞的转化率高于pcE2免疫组.可见,细胞因子GM-CSF可有效提高猪瘟病毒E2基因核酸疫苗的免疫应答.