枯草芽孢杆菌8-32产抗真菌物质发酵条件优化

为提高枯草芽孢杆菌菌株8-32抗真菌物质的产量,在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计法找出影响菌株Bacillus subtilis 8-32产抗真菌物质的主要因素为培养时间、装液量和可溶性淀粉含量。采用最陡爬坡试验逼近最大响应区域,运用Box-Behnken试验设计及响应面分析法对3个显著影响因子的最佳配比进行优化,得到最佳发酵工艺参数为培养时间72.28h,装液量59.80mL/250mL三角瓶,可溶性淀粉含量1.51%。优化后抑菌圈直径从试验设计初期的14.21mm提高至24.51mm。     

生防芽孢杆菌8-32对盆栽大豆土壤酶系和微生物区系的影响

前期研究中筛选到一株对大豆根腐病病原菌-尖孢镰刀菌具有较强拮抗作用的菌株Bacillus subtilis 8-32,其生防效果达32. 08%。本试验采用盆栽法,研究接种不同浓度枯草芽孢杆菌8-32(Bacillus subtilis 8-32)后,土壤酶系和微生物区系的变化情况。结果表明:使用枯草芽孢杆菌8-32后土壤脲酶活性增加了16. 9%~66. 7%,蛋白酶活性增加了88. 8%~131. 0%,酸性磷酸酶活性增加了20. 6%~51. 8%,碱性磷酸酶活性增加了7. 5%~14. 6%,根际土壤中细菌数量增加8. 5%~72. 5%,对土壤中真菌数量抑制率最高达37. 2%,放线菌数量也有明显增加。说明菌株8-32对由尖孢镰刀菌引起的大豆根腐病有显著的防治效果,具有进一步应用的潜力。     

贝莱斯芽孢杆菌3A3-15电击转化条件优化

对贝莱斯芽孢杆菌电击转化条件进行优化,以期建立其高效转化体系。采用pIC333质粒电击转化贝莱斯芽孢杆菌3A3-15野生型菌株,考察细胞生长阶段、电压、电阻和质粒DNA加入量对转化效率的影响。当细胞培养物D_(600 nm)为0.9,电压为1.75 kV,电阻为400Ω,质粒DNA加入量为50 ng时,其转化率最高达7.92×10~4 CFU/μg。该研究为贝莱斯芽孢杆菌3A3-15菌株的基因和分子水平操作奠定了基础。     

马铃薯疮痂病拮抗菌Bacillus amyloliquefaciens12-82发酵条件优化

马铃薯疮痂病(Potato scab)是由链霉菌(Steptomyces spp.)引起的重要病害。前期工作中筛选到一株对马铃薯疮痂病菌具有较强拮抗活性的菌株Bacillus amyloliquefaciens 12-82。本研究通过响应面优化方法对该拮抗菌产芽孢条件进行优化,以满足生产的需要。结果表明,当培养基组成为2%玉米粉、2%蛋白胨、0.5%CaCl_2;培养条件为发酵时间48 h,装瓶量50 mL/150 mL,接种量10%,初始pH值7.3,培养温度33℃,芽孢数量可达到3.1×10~8 CFU/mL,实验结果对该菌株的开发应用具有一定指导意义。