不同保存温度和反复冻融次数对鸭疫里默氏杆菌DNA的影响

为探究不同保存温度和反复冻融次数对鸭疫里默氏杆菌DNA的影响,研究了不同保存温度和反复冻融次数对不同浓度梯度组鸭疫里默氏杆菌DNA样品浓度及荧光定量Ct值的影响.根据OmpA基因保守序列设计了鸭疫里默氏杆菌荧光定量PCR特异性引物,产物大小为112 bp,退火温度为56℃.荧光定量循环阈值Ct值随DNA浓度的下降而升高.常温保存的DNA样品7 d后出现明显降解,保存温度为4、-20、-80℃时则对荧光定量PCR检测效率影响不大.较高浓度的A、B组DNA样品Ct值未受冻融次数的影响,而浓度较低的C、D组则在冻融21次后Ct值明显升高.研究建立了鸭疫里默氏杆菌荧光定量PCR鉴定方法,Ct值随DNA浓度的下降而升高,DNA样品应低于4℃保存,低浓度DNA应避免反复冻融.     

鸭坦布苏病毒病、鸭圆环病毒病与鸭疫里默氏杆菌混合感染的诊断

为确诊贵州省三穗县某鸭场62日龄花边鸭发病原因,通过临床症状观察及对采集的10只病鸭进行病理剖检、细菌分离鉴定和病毒PCR/RT-PCR检测。结果表明:分离到4株鸭疫里默氏杆菌,对头孢类药物高度敏感,对大环内酯类和氨基糖苷类药物耐药;病毒特异性引物扩增出鸭坦布苏病毒和鸭圆环病毒条带。该鸭场病鸭由鸭坦布苏病毒、鸭圆环病毒和鸭疫里默氏杆菌混合感染所致。     

铜与枯草芽孢杆菌协同对产蛋期种鹅生产性能、空肠组织发育和微生物菌群结构的影响

本试验通过研究铜与枯草芽孢杆菌协同对产蛋期种鹅空肠组织发育和微生物菌群结构的作用，探索在产蛋期种鹅日粮中添加枯草芽孢杆菌条件下铜的添加量。选择46周龄体况相近的产蛋期种鹅120只，随机分为6组，每组4个重复，每个重复5只（1公4母），采用2×3因子随机试验设计，枯草芽孢杆菌为125、250 mg/kg 2个添加水平，铜为2、4、6 mg/kg 3个添加水平。Ⅰ～Ⅲ组的铜添加水平为2、4、6 mg/kg,BS添加水平为125mg/kg,Ⅳ～Ⅵ组的铜添加水平为2、4、6mg/kg,BS添加水平为250mg/kg。试验期70 d。对种鹅空肠绒毛高度、隐窝深度进行测定，计算绒隐比；对种鹅盲肠微生物进行16S rDNA多样性检测。结果表明：铜与枯草芽孢杆菌协同对产蛋期种鹅的产蛋率、料蛋比及日采食量影响不显著，对空肠绒毛高度影响显著（P<0.05），对空肠隐窝深度、绒隐比影响极显著（P<0.01）。对样品Alpha多样性进行分析，试验样品的OTU统计覆盖率深度指数值Coverage,Ⅰ～Ⅵ组均大于0.999，表明试验样本中物种被测出的概率极高，样本结果代表了样本中微生物的真实情况。铜与...     

仔猪大肠杆菌的分离及PCR检测

正猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌菌所致的一种仔猪的传染病,严重影响仔猪成活率。其临床表现主要为仔猪腹泻(黄痢、白痢)和水肿病。具有发病迅速、病程较短、发病率和死亡率均高的特点~([1])。该病对规模化集约化养猪业危害较大,给猪场带来较大的经济损失~([2])。笔者于2015~2017年开展了细菌分离和分子学(PCR方法)工作,为贵州省猪腹泻和水肿病大肠杆菌的临床鉴定和流行病学调查提供了可靠     

促肾上腺皮质激素释放激素在鱼类应激反应中的作用

下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴是机体在应激过程中被激活的重要神经内分泌系统。下丘脑的促肾上腺激素释放激素(CRH)在HPA轴的功能调节中具有重要地位。在应激反应中,促肾上腺激素释放激素是关键调节因子,协调应激过程中内分泌、自主神经、免疫和行为反应。本文介绍了近年来有关促肾上腺皮质激素释放激素的研究进展及其在鱼类应激反应中的作用,为进一步探讨鱼类应激反应的发生机制提供参考资料。     

三穗鸭体重与体尺性状间的相关性及多元回归分析

为研究三穗鸭体重与体尺性状间的关系,试验通过测定90日龄纯系三穗鸭的体重及体尺性状(体斜长、胸宽、胸深、龙骨长、半潜水长、胫长、胫围、盆骨宽、胸角),并分析体重与体尺性状间的相关性,建立体重最佳回归方程。结果:三穗鸭公鸭的体斜长、半潜水长均显著高于母鸭(P<0.05)。公鸭体重与龙骨长、胸角之间,胸宽与体斜长、胸深之间,胫长与胫围之间,半潜水长与盆骨宽之间,分别呈显著正相关(P<0.05)。母鸭体重与胸宽之间呈极显著正相关(P<0.01);半潜水长与体重、胸宽之间,胫围与盆骨宽之间,分别呈显著正相关(P<0.05)。构建公鸭胸角及母鸭胸宽、体斜长与体重的多元回归方程中决定系数R 2均高于0.9。结论:三穗鸭公鸭的体尺性状优于母鸭,公鸭胸角和母鸭胸宽可作为间接选择三穗鸭体重的重要指标。     

A:L1 ST128型鸭源多杀性巴氏杆菌的耐药性及毒力分析

旨在阐明贵州某规模化鸭场临床疑似鸭霍乱的病原菌耐药性及毒力特征，通过细菌的分离鉴定、多位点序列分型（MLST）、ERIC-PCR同源性分析、药敏试验、动物回归试验、细菌全基因组测序以及基因组局部比较分析对分离株进行系统研究。结果显示，分离得到5株鸭源多杀性巴氏杆菌（PmCW1~5），均为A：L1 ST128型且同源性较高；分离株均对氨苄西林、阿莫西林、左氧氟沙星和林可霉素4种药物耐药，其中PmCW1还对环丙沙星低水平耐药；对强毒株PmCW1的全基因组数据分析显示，PmCW1中存在β-内酰胺类、喹诺酮类、四环素类、大环内酯类和多肽类等耐药基因，同时存在多药外排泵及多药耐药蛋白基因，耐药表型与耐药基因检测结果基本相符；PmCW1中存在的毒力基因总数为201个，主要是脂寡糖/脂多糖（LOS/LPS）、荚膜、黏附因子等编码基因；此外，还检测到IV型菌毛基因（ptfA、comE、hofB、hofC、vfr）、铁摄取相关蛋白基因（ccmABCEF、hgbBC、fur、hscB等）以及部分外膜蛋白基因（ompP5等）等；PmCW1具有典型的A：L1型多杀性巴氏杆菌的特征。综上表明，本研究分离得到的ST128型鸭源多杀性巴氏杆菌目前鲜有报道，对其耐药性及毒力的研究可为鸭霍乱的临床用药及疫苗研发提供理论依据。     

中药石苦秦散及其有效成分对水禽源细菌的体外抑菌效果

为研究中药复方制剂石苦秦散及其主要活性成分单体对水禽源多重耐药菌株的体外抑菌效果,采用K-B法对试验菌株进行耐药性检测,并采用微量肉汤二倍稀释法和琼脂平板培养计数法研究石苦秦散及其6种主要活性成分单体对鸭疫里氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌5种细菌的体外抑菌作用和杀菌作用。结果显示,90%的分离株为多重耐药菌株,肠杆菌属的大肠杆菌和沙门氏菌分离株耐药性最强,耐药种数均高于8种。石苦秦散对5种细菌的最小抑菌浓度(MIC)介于1.95～62.50 g/L,最小杀菌浓度(MBC)介于1.95～125.00 g/L;其中,对鸭疫里氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的MIC较低,介于1.95～15.63 g/L。6种中药单体中,抑菌能力最强的为秦皮乙素,其次为苦参碱、没食子酸;6种中药单体杀菌效果存在较大差异,当质量浓度达到31.25 g/L时,没食子酸能杀死所有供试菌株,整体杀菌效果优于其他5种单体;6种中药单体对鸭疫里氏杆菌的MIC和MBC均小于其他菌株。由此可见,石苦秦散对供试的5种细菌均有抑菌作用和杀菌作用,其中对鸭疫里氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的效果最好;6种中药单体对鸭疫里氏杆菌的抑菌效果和杀菌效果均优于其他菌种。     

猪大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

为了解贵州省猪源大肠杆菌对抗生素耐药的情况,有效防控猪场大肠杆菌性拉稀和腹泻。本试验采集2018—2019年贵州省5个市县规模猪场/养殖户的粪便和样品1 202份,经分离培养和生化鉴定,获得大肠杆菌532株,药敏试验结果显示大部分大肠杆菌分离株对抗生素多重耐药,这对指导贵州大肠杆菌病防治具有重要的临床意义。     

贵州部分地区猪伪狂犬野毒感染的血清学调查

为了解贵州猪伪狂犬病(Pseudorabies)的感染情况并为其防控及净化提供依据,采用酶联免疫吸附(ELISA)法,对贵州主要猪场及屠宰场的1078份猪血清样品进行PRVɡE抗体检测。结果表明:1 078份猪血清样品中PRVɡE抗体阳性检出率为8.5%,其中,养殖场的PRVɡE抗体阳性检出率为18.1%,屠宰场为4%;不同地区猪场的PRVɡE阳性检出率以黄平县的最高,为64.4%,镇远县和贵阳市的次之,分别为14.3%和5.4%,瓮安县和贵定县均未检出;不同猪群育肥猪、妊娠母猪、保育猪的PRVɡE抗体阳性率略高于仔猪。