小鼠β-酪蛋白基因载体的构建与表达

通过RT-PCR方法扩增β-酪蛋白基因,扩增产物插入质粒载体pET-28a中构建成表达载体,转化入大肠杆菌BL-21,经IPTG诱导表达.利用限制性内切酶酶切图谱分析、DNA序列测定及SDS-PAGE,结果表明,成功地用RT-PCR方法从小鼠乳腺组织中克隆出β-CN基因并构建了重组β-CN的表达载体,并在大肠杆菌获得表达.     

转基因玉米的脉冲电泳技术检测及遗传分析

采用脉冲电泳技术将外源Bar基因和 B.t基因转化玉米种胚并直接成苗,对T0代、T1代经除草剂筛选的抗性植株进行PCR检测.结果表明,T1代转基因植株频率明显低于T0代PCR阳性植株率,T0代植株的PCR阳性率与T1代转基因植株频率呈显著正相关(r =0.9874).T1代表现为PCR阳性的植株Southern杂交结果显示脉冲电泳法介导的外源基因在受体中多为单拷贝,且能从T1代遗传到T2代,外源基因在T2代呈典型的孟德尔分离方式.     

红麻基因组提纯方法研究

本文在多种基因组提取方法的基础上,针对红麻基因组提取中的难点即富含酚类、萜类、单宁、果胶等物质。提出了利用１％抗坏血酸保护单宁、多酚类物质不被褐化,避免了其褐化产物与ＤＮＡ形成不可逆的复合物,提高了ＤＮＡ得率;并且,提取缓冲液采用高ｐＨ条件下Ｎａ２ＣＯ３存在可加速果胶碱解,分离果胶等杂质,获得了高纯度基因组ＤＮＡ,适合ＰＣＲ扩增等分子生物学要求