黑胫病菌诱导的烟草SSH文库构建及其分析

黑胫病是危害严重的世界性烟草主要病害之一,探究烟草对黑胫病的抗病机制,可以为该病的综合防治提供理论依据。本研究以烟草黑胫病抗性品种革新3号为材料,利用黑胫病0号生理小种诱导其水平抗性,分别在接种后0.5、1、3、6、10和16 d取样,通过抑制差减杂交技术(SSH)构建cDNA文库,获得了960个阳性克隆。利用反向Northern斑点杂交技术对其中240个阳性克隆进行杂交筛选,筛选出57个表达差异明显的基因,序列拼接后获得33条高质量EST,测序及其比对分析表明,革新3号对烟草黑胫病抗性相关基因主要涉及抗病防卫、光合作用、信号传导和能量代谢等方面。进一步基因功能分析显示,病程相关PR1b蛋白、半胱氨酸蛋白、延伸因子1-α、α-微管蛋白、细胞色素P450、精胺合成酶、水通道蛋白、过氧化物酶体膜蛋白、甘氨酸延伸因子等可能参与了烟草与黑胫病菌非亲和互作过程。     

生长肥育猪日粮铜添加水平与生产性能动态关系的研究

采用54头杂交猪(杜×长×约)研究日粮铜添加水平对生产性能的影响,建立日粮铜添加水平与生产性能之间的动态模型,探讨促生长的最适铜添加量。试验采用单因子设计,分别设0、100、200、300、400mg/kg的铜添加水平,试验从20kg开始,100kg结束。结果表明:在20～100kg的生长肥育猪日粮中添加100～300mg/kg的铜,都可不同程度的起到改善生产性能的作用。与对照组相比,试猪全期ADG提高7.67%～10.59%,F/G降低4.58%～11.76%(P>0.05)。ADG(y1,单位g)和F/G(y2)与铜添加水平(x,单位mg/kg)的动态关系回归方程分别为:y1=737.21+0.9343x-0.0025x2(R2=0.900,P=0.100);y2=3.1063-0.0036x+8.7×10-6x2(R2=0.795,P=0.205)。根据回归方程可知,在试猪20～35kg、35～80kg、80～100kg和20～100kg各阶段,当铜添加水平分别为223、269、147和186mg/kg时,ADG最高,分别为910、808、803和825g。当铜添加水平分别为300、311、158和206mg/kg时,F/G最优,分别为1.86、2.79、3.28和2.73。     

添加高铜对生长肥育猪组织铜残留量及病理学变化影响的研究

选用60头杂交猪(杜×长×约)研究日粮铜添加水平对生长肥育猪组织铜残留量和病理学变化的影响。试验采用单因子设计,分别设0、100、200、300、400 mgCu/kg饲粮的添加水平,试验从20 kg开始,100 kg结束。结果表明:添加100~400 mg/kg的铜不同程度地增加了组织中铜的残留量,试验猪肝脏和肾脏中的铜含量随着饲粮铜添加水平的增加极显著的增加,呈二次曲线的变化规律,肝脏铜含量(y1,mg/kg)和肾脏中铜的含量(y2,mg/kg)与饲粮铜添加水平(x,mg/kg)之间的回归方程分别为:y1=11.3963-0.2920x+0.0022x2(R2=0.814,P=0.036);y2=8.7583-0.0043x+0.0002x2(R2=0.975,P=0.025)。根据回归方程可知,为了保证肝脏或肾脏中铜的含量不超过10 mg/kg,饲粮铜添加水平应不高于127.76或90.27 mg/kg。饲粮铜添加水平与组织器官铜浓度之间相关关系依次为:肝脏>肾脏>脾脏>心脏。添加100~400 mg/kg的铜,对肝脏、肾脏、心脏和脾脏造成了不同程度的病理性损伤,主要表现为不同程度的细胞变性、炎性细胞浸润和毛细血管出血。     

几种商品有机肥在新烟区的对比试验

[目的]为探索商品有机肥在新烟区对烤烟的影响,筛选出适合红塔集团遮放烟叶基地单元使用的商品有机肥。[方法]对4种商品有机肥进行大面积对比试验示范,调查各处理烤烟主要大田生育期、农艺性状、经济性状,并且对初烤烟叶进行外观质量和内在化学成分检测分析。[结果]施用有机肥能够促进烟叶落黄成熟,缩短KRK26品种大田生育期,且能提高烟叶产值,提高初烤烟叶外观质量光泽度和烟叶产值量,初烤烟叶化学成分趋于协调。[结论]在几种商品有机肥中,李杨牌有机肥的总体表现较好,可以在基地单元作进一步试验示范。     

应用GatewayTM技术构建烟草抗真菌病相关基因的RNAi载体

根据抗病基因(Resistance genes,R基因)的功能保守域,利用生物信息分析方法在绒毛状烟草(Nicotiana tomentosiformis)全基因组上获得6个完整可靠的抗真菌病候选基因.在这6个基因的非保守区设计特异引物,以普通烟草品种红花大金元反转录cDNA为模板克隆抗真菌病相关基因的干扰片段,利用GatewayTM克隆技术构建上述候选基因的RNAi载体,经酶切和测序证明载体构建正确,为进一步鉴定这6个候选基因的具体抗病性,并为将其应用于烟草抗病新品种的选育工作奠定了基础.     

生长肥育猪日粮铜添加水平与组织铜残留量动态关系初探

采用54头杂交猪(杜×大×约)研究大剂量日粮铜添加水平对组织铜含量的影响,建立日粮铜添加水平与组织铜残留量之间的动态模型,探讨保证猪肉及其副产品食用安全性的最适铜添加量。试验采用单因子设计,分别设0、100、200、300、400mg/kg的铜添加水平,试验从20kg开始,100kg结束。结果表明:添加100～400mg/kg的铜不同程度地增加了组织器官中铜的残留量,肝脏和肾脏中铜含量随饲粮添加水平的增加呈二次曲线变化规律。肝脏铜残留量(y,单位为mg/kg)与日粮铜添加水平(x,单位为mg/kg)之间的回归方程为:80kg体重时,y=5.4697-0.0814x+0.0009x2(R2=0.930,P=0.07);100kg体重时,y=11.3963-0.2920x+0.0022x2(R2=0.814,P=0.036)。肾脏铜残留量(y,单位为mg/kg)与日粮铜添加水平(x,单位为mg/kg)之间的回归方程为:y=8.7583-0.0043x+0.0002x2(R2=0.975,P=0.025)。在80kg屠宰时,为了保证肝脏中的铜含量不超过10mg/kg,饲粮铜添加水平不应高于129mg/kg。在100kg屠宰时,为了保证肝脏或肾脏中的铜含量不超过10mg/kg,饲粮铜添加水平不应高于128或90mg/kg。     

UV-B紫外辐射与烟叶生理指标的关系研究

[目的]为探究紫外辐射与烟叶生理指标之间的关系.[方法]在云南玉溪模拟海拔高度600、1100、1600和2100m进行烤烟生产大棚试验.在烤烟生长的不同时间,测定烟叶光合参数、光合色素、可溶性蛋白含量、类黄酮和比叶重等指标.[结果]在自然环境（CK）下种植的K326对UV-B辐射响应敏感.[结论]适当强度的UV-B辐射有利于提高K326净光合速率（Pn）、同化能力（AC）和光合色素含量.     

不同类型高产小麦植株、籽粒可溶性糖含量 与其干物质积累的关系?

为了研究小麦育种的高产途径,此试验以大穗型(01-35),中间型(62008,4133-2)和多穗型(02-48)高产小麦品种为实验材料,在大田条件下,研究了小麦植株和籽粒可溶性糖含量变化及干物质积累动态.结果表明:不同类型的品种植株、籽粒可溶性糖含量变化与其地上部分及籽粒干物质积累速率和积累总量有密切关系.就群体而言,多稳型品种地上部分干物质积累量最多,产量也最高,中间型次之,大穗型最低.大穗型品种具有较强的营养物质外运能力,其千粒重最高,多穗型次之,中间型最低.充分协调源库流的关系,选育出大穗型和多穗型相结合的、综合农艺性状更佳的品种,将实现小麦高产、优质、高效的育种目标,从而更好地服务于大田生产.     

烟草抗马铃薯Y病毒病相关基因NtPsaN的克隆及表达分析

【目的】从高抗PVY烟草品种VAM中克隆抗病相关基因,分析该基因的序列特征、进化关系和表达特性,研究其在烟草抗PVY防御反应中的作用,为培育抗PVY烟草新品种奠定基础。【方法】利用SSH结合cDNA芯片筛选出来的病害诱导特异表达基因片段,通过RACE技术克隆烟草抗病相关基因;生物信息学分析该基因保守结构域以及序列特征;采用MEGA4.0软件构建系统进化树;利用实时荧光定量RT-PCR技术研究该基因的表达特性。【结果】克隆了1个烟草抗病相关基因,命名为NtPsaN,该基因具有PsaN基因家族保守结构域,OFR长度507bp,编码168个氨基酸;构建了PsaN亚基系统进化树;实时荧光定量RT-PCR结果显示接毒之后该基因表达与不接毒对照相比有明显上调趋势。【结论】克隆得到一个烟草PVY抗病相关基因NtPsaN,其表达受PVY侵染诱导,该基因可能在烟草抵御PVY病害侵染过程中起重要作用。     

MADS-box基因控制植物成花的分子机理

植物花器官的发育和开花是植物生殖发育中最重要的过程,植物在长期的进化过程中产生了春化（低温）途径、自主途径、光周期途径以及不依赖于光温环境条件的赤霉素信号途径来适应多变的环境和调控植物开花过程。本文综述了模式植物拟南芥中由LEAFY（LFY）、CONSTANS（CO）、FLOWERING LOCUSC（FLC）、FLOW ERING LOCUS T（FT）和SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO1（SOC1）等基因构成的双子叶植物响应光温条件变化的开花调控网络;以及大麦、小麦中由VERNALIZATION1（VRN1）、VRN2、ODD-SOC2（OS2）和拟南芥CO、FT同源基因构成的禾本科植物开花调控网络。其中最重要的是转录调控因子MADS-box基因FLC、SOC1、VRN1和OS2,并发现组蛋白的乙酰化/脱乙酰化,赖氨酸的甲基化/脱甲基化在调控FLC、VRN1染色质活性状态及基因表达,从而产生开花控制的机理。这些研究发现将有助于对具有重要经济价值的单双子叶植物,通过生物技术手段改良其品种特性以应对非生物逆境,特别是低温胁迫的指导。