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基于磁珠和时间分辨荧光免疫分析的微囊藻毒素LR单链抗体筛选与鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
【目的】从鼠源合成噬菌体抗体库中,快速分离获得微囊藻毒素LR单链抗体。【方法】采用磁珠筛选和负筛选方法,设计两轮微囊藻毒素LR单链抗体的筛选方案。用噬菌体产出投入比和多克隆噬菌体免疫分析,对每轮筛选后微囊藻毒素LR特异性噬菌体的富集效果进行鉴定。再将第2轮筛选获得的次级库提取单链抗体基因,转入可溶性表达载体;诱导表达后,采用时间分辨荧光免疫法,对单个噬菌体克隆鉴定并测序。【结果】两轮筛选的噬菌体产出投入比分别为4.8×10-8和2.88×10-6。第2轮筛选后的次级库,经多克隆噬菌体免疫分析得到的荧光信噪比,比原始抗体库提高了22.8倍。最终鉴定得到5株不同的阳性噬菌体克隆,其中最佳的克隆对微囊藻毒素LR的检测灵敏度(IC10)为13 ng•mL-1,抑制中浓度(IC50)为435 ng•mL-1,线性范围在31—5 952 ng•mL-1。【结论】本研究筛选到的单链抗体,有潜力应用于微囊藻毒素LR的免疫学检测或免疫亲和柱的制备,同时也探索了一种高效的微囊藻毒素LR单链抗体的库筛选、鉴定方法。 相似文献
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畜禽疾病防控工作是协调畜禽养殖业可持续发展的基础性工作。兽医及养殖人员必须充分认识到加强畜禽疾病防控的重要性,认真分析当前存在的问题,并采取相应的防控措施,以确保畜禽健康成长,促进畜禽养殖业的可持续发展。主要分析当前畜禽疾病防控工作中存在的问题,针对具体问题提出相应的应对措施,以期为做好畜禽疾病防控工作提供参考,不断促进我国畜禽养殖业的可持续发展。 相似文献
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