蒙古沙冬青1R-MYB基因AmMYB1R的克隆与表达分析

MYB家族转录因子与植物抗逆性密切相关。本研究利用RT-PCR方法从强抗逆沙漠植物蒙古沙冬青中克隆到AmMYB1R基因的编码区cDNA(903 bp)。推测其编码蛋白含一个由单一MYB重复单元(含端粒盒)组成的DNA结合域和一个H15结构域,故属于1R-MYB亚族的端粒结合型转录因子。利用半定量RT-PCR方法进行表达分析,表明该基因在正常培养的蒙古沙冬青幼苗中有一定量的基础表达,低温胁迫可迅速诱导其表达量明显上调,干燥胁迫诱导其表达上调较为迟缓,而盐胁迫可诱导其表达量波浪式少量上调。将克隆到的cDNA片段成功构建到植物表达载体上,为深入研究其功能奠定了基础。     

饲用玉米抗旱性水分生理指标的研究

在水分胁迫下，抗旱性不同的饲用玉米基因型幼苗叶片的部分水分生理指标存在差异。本着有效、简便和重复性好的原则，从是１１项指标中评选了叶片鲜干比和相对含水量可作为重要抗旱鉴定指标；叶片自然含水量，临界饱和亏，水势和幼苗水分利用效率可作为参考鉴定指；而叶片自然饱和亏、需水程度、束缚水含量及其与自由水含量的比值和离体叶片物保水率一般均不宜作为饲用玉米的抗旱鉴定指标。     

荞麦愈伤组织的高频率诱导和植株再生研究

研究了高频率诱导荞麦愈伤组织和再生植株的组培技术。在附加０．５ｍｇ／Ｌ ２．４－Ｄ和ＫＴ的ＭＳ４培养基上,胚轴和子叶外植体愈伤组织的诱导率高达８１．３％￣９１．２％,胚轴不定芽的诱导率为３４．５％￣４１．２％。将胚轴在附加０．５ｍｇ／Ｌ ２．４－Ｄ的ＭＳ２上预培养１５ｄ左右再转到ＭＳ４上,不定芽诱导率可达５３．３％。不定芽也可从培养于ＭＳ５（附加０．５ｍｇ／Ｌ ＫＴ）中的外植体上直接产生,当不定芽转到附加０．５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的ＭＳ７培养基上可诱导生根。本研究为进一步开展荞麦细胞工程和基因工程研究提供了较成熟的组培技术。     

蒙古沙冬青胰蛋白酶抑制剂基因AmTI的克隆及其功能分析

蛋白酶抑制剂(Protein inhibitors,PIs)是一类小分子多肽或蛋白质,在植物抵抗生物和非生物逆境中起中起重要作用.利用PCR方法从强抗逆植物蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)中克隆到一个胰蛋白酶抑制剂(Trypsin inhibitors,TI8)基因AmT7,分析了其在非生物胁迫下的表达变化,构建了其植物表达载体.结果表明,AmTI的编码蛋白含197个氨基酸残基,分子质量为21.5kDa,在N端有信号肽序列,属于Kunitz型;在正常生长条件下,该基因只有微量的基础表达,但在脱水、低温和盐胁迫处理下,其表达量显著上调.本研究为进一步揭示AmTI的功能奠定了基础.     

农杆菌介导的smt1富硒基因转化紫花苜蓿研究

利用遗传转化,将硒富基因转入紫花苜蓿（Medicago sativa）是提高苜蓿富硒能力,解决当前硒不足问题的有效途径之一。本研究以“中苜1号”紫花苜蓿为受体材料,通过农杆菌介导法将来自硒超富集植物二沟黄芪(Astragalus bisulcatus)的硒代半胱氨酸甲基转移酶基因(smt1)转入苜蓿,并以3 mg·L-1潮霉素进行筛选,获得转化植株10株。结果表明,5株均能扩增出与smt1基因大小相符的条带。RT PCR检测结果表明,2株目的基因表达呈阳性,这表明smt1基因已成功转入紫花苜蓿基因组中,且可以在植株中正常表达。     

小麦DNA导入玉米引起性状变异的研究

提取小麦DNA用4种不同的方法导入玉米植株,受体后代可产生6.09×10~(-4)～8.7×10~(-3)的变异株。变异性状多数为株高、生育期、株型、分蘖、育性等由多基因控制的数量性状。大部分变异性状随自交代数的增加而渐趋消失,有些性状在后代呈不规律的分离,只有少数变异性状可稳定遗传。本实验还对不同导入方法的转化效果进行了比较,若以变异率大小衡量,4种方法的依次顺序为花粉粒法>柱头法>籽粒注射法>生长点法。     

RAPD在油用向日葵自交系鉴定和遗传分析中的应用

利用RAPD标记对8个油用向日葵自交系进行了鉴定和遗传分析。从40个UBC引物中筛选出12个能产生稳定遗传多态性的引物，利用其中3个引物提供的RAPD标记可将8个自交系逐一加以鉴别。12个引物对8个自交系共扩增出41条带，其中39条（占95．1％J）具有多态性，每个引物可扩增出1－7条带，平均为3．4条带，不同自交系之间的RAPD遗传距离在0．13－0．85之间，平均为0．42。按UPGMA方法可将8个自交系聚为2大类、4个亚类。