自拟健脑安神汤治疗原发性失眠的临床观察

目的 观察健脑安神汤治疗原发性失眠的临床疗效。方法 将65例原发性失眠患者随机分为观察组35例（健脑安神汤）及对照组30例（酸枣仁汤）,疗程均为1周,并以匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）、简易睡眠个人信念与态度量表（DBAS-16）、简易智力状况检查法（MMSE）、中医临床证候计分表,4种量表比较临床疗效。结果 经治疗后观察组总有效率78.8%,对照组总有效率63.6%;观察组的PSQI和中医证候疗效优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;观察组在改善DBAS-16和MMSE积分方面均明显优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组均未见明显不良反应。结论 健脑安神汤治疗原发性失眠疗效显著,安全性好,值得临床推广应用。     

大豆GmHDL57基因的克隆及抗盐功能鉴定

HD-Zip I类转录因子在植物抵御非生物胁迫过程中发挥重要功能, 本研究克隆得到1个大豆HD-Zip I类基因GmHDL57 (Glycine max homeodomain-leucine zipper protein 57)。序列分析表明, GmHDL57基因包含1个1038 bp的开放读码框, 编码345个氨基酸, 具有HD-Zip类家族蛋白典型的保守结构域。基因时空表达分析表明, 大豆GmHDL57基因在大豆植株的各个不同时期及不同器官中均有表达, 在花中表达量最高。采用实时荧光定量PCR技术分析了4种非生物胁迫(脱落酸、NaCl、PEG、冷)对幼苗期大豆根中GmHDL57基因表达的影响。结果表明, 该基因表达量受高盐胁迫诱导显著升高, 在脱落酸及干旱胁迫下上升幅度较小, 但在冷胁迫下呈下降趋势。盐胁迫前后GmHDL57基因在根中的表达量明显高于茎和叶, 在盐胁迫48 h时达到峰值, 72 h和96 h时表达量缓慢下降。此外, 构建GmHDL57基因的植物超表达载体, 利用根癌农杆菌转化法获得转基因百脉根, 200 mmol L ^-1 NaCl处理条件下, 转基因百脉根的株高、根长、叶绿素含量、根系活力以及阳离子K ⁺、Ca ²⁺含量显著高于野生型, 而丙二醛含量、相对质膜透性以及Na ⁺的含量明显低于野生型。以上研究结果表明, GmHDL57基因参与了大豆对非生物胁迫的应答过程, 过量表达GmHDL57基因能够显著提高百脉根的抗盐能力。     

愈痫灵方对难治性癫痫大鼠多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp、LAP、MCP-1表达的作用

目的 探讨“愈痫灵”方对红藻氨酸（KA）致痫难治性癫痫模型大鼠海马及颞叶皮质区多药耐药相关蛋白1（MRP₁）、P糖蛋白（P-gp）、层黏连蛋白（LAP）以及单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）表达的影响。方法 （1）造模：在脑立体定位仪引导下,海马区微量进样器注入KA1.0μL（即1.0μg）点燃发作,选取发作行为级别在Racines标准Ⅳ级以上者,以丙戊酸钠及卡马西平灌胃干预14 d后,再次以亚惊厥剂量KA0.5μL复燃,筛选再次发作级别在Ⅳ级以上或持续状态大鼠,且脑电图检测有癫痫样波放电者为造模成功的耐药难治性癫痫模型鼠。（2）分组与处理：造模成功鼠随机分为愈痫灵方干预组、拉莫三嗪对照组、模型组,另设假手术对照组、空白对照组共5组,分别给予“愈痫灵”汤剂、拉莫三嗪及同等体积的蒸馏水（2 mL/d）灌胃30 d。（3）标本处置与检测：采用免疫组织化学技术,检测多药耐药相关蛋白MRP₁、P-gp、LAP、MCP-1在海马与颞叶皮层的表达。结果 与假手术对照组、空白对照组间比较,造模成功组海马区及颞叶皮质区MRP₁、P-gp、LAP、MCP-1的表达均明显升高,差异有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较,愈痫灵、拉莫三嗪干预处理后能显著降低模型鼠海马区MRP₁、P-gp表达水平（P<0.05）,海马区及颞叶皮质区LAP、MCP-1的表达差异均无统计学意义（P>0.05）;愈痫灵方组与拉莫三嗪组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;各组间颞叶皮质区LAP、MCP-1表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 耐药性癫痫大鼠模型海马及颞叶皮质区多药耐药相关蛋白MRP₁、P-gp、LAP、MCP-1表达均明显升高,逆转与降低海马区MRP₁、P-gp的表达可能是“愈痫灵”方抗耐药性癫痫作用机制之一。     

补肾祛痰活血汤对缺血再灌注损伤大鼠Occludin、ZO-1蛋白的调节作用

目的 观察补肾祛痰活血汤对预处理脑缺血再灌注损伤的大鼠脑组织水肿、血脑屏障通透性及损伤区咬合蛋白（Occludin）、闭锁小带蛋白（zonula occludens-1,ZO-1）的影响。方法 SD成年雄性大鼠50只,按随机数字表法分为正常组、模型组、假手术组、治疗组、对照组,每组10只。治疗组给补肾祛痰活血汤、对照组给消栓通络胶囊,正常组、模型组、假手术组给与相应量的双蒸馏水。采用线栓法复制脑缺血再灌注损伤模型,72 h后,干湿重法测定脑含水量反映脑水肿程度,用免疫组织化学方法测定损伤区Occludin、ZO-1蛋白的表达量,并对各结果进行相关性分析。结果 与正常组、假手术组比较,模型组、治疗组、对照组72 h时间点大鼠脑组织含水量较正常组、假手术组要增高一些,脑组织损伤区周围Occludin、ZO-1蛋白表达明显降低（P<0.01）。脑组织含水量与脑组织损伤程度正相关,脑组织损伤区周围Occludin、ZO-1蛋白与脑组织损伤程度呈负相关。结论 补肾祛痰活血汤对缺血性脑损伤发生后损伤区Occludin、ZO-1蛋白含量降低有抑制作用,抑制血脑屏障通透性增高,减轻脑水肿形成。     

穴位埋药线对难治性癫痫大鼠癫痫样波的发放及大脑海马和颞叶皮质多药耐药相关蛋白MRP1、P-gp表达的影响

目的 探讨穴位埋药线对难治性癫痫大鼠癫痫样波的发放及大脑海马和皮质中多药耐药相关蛋白MRP₁、P-gp表达的影响。方法 （1）造模：大鼠海马区注射红藻氨酸（KA）,经过点燃和再次亚惊厥剂量点燃造模,且脑电图检测有癫痫样波发放者筛选为造模成功耐药难治性癫痫模型鼠。（2）分组与处理：普通线组（PTX组）与药线组（YX组）,先埋一侧穴位,间隔15 d后埋对侧穴位。拉莫三嗪组（LTG组）按照人用拉莫三嗪剂量换算灌胃大鼠,每日2次;空白对照组（Normal组）和模型组（Model组）给予灌胃同等体积的蒸馏水,均灌胃30 d。（3）采用VEEG-1518K型数字化视频脑电监测分析系统检测脑波基本节律的波幅与频率变化。（4）标本处理与检测：采用免疫组织化学技术,检测多药耐药相关蛋白MRP₁、P-gp在海马与颞叶皮层不同部位的表达。结果 各组治疗前比较差异无统计学意义（P>0.05）;各组治疗后,YX组、LTG组分别与Model组、PTX组比较差异有统计学意义（P<0.05）,YX组与LTG组比较差异无统计学意义（P>0.05）;与Model组相比,LTG组和YX组干预后能降低致痫鼠EEG痫波放电持续时间与发放频率以及海马区和颞叶皮质区多药耐药蛋白MRP₁、P-gp的表达水平（P<0.05或P<0.01）;YX组与PTG组比较差异无统计学意义（P<0.05）。结论 （1）埋药线使KA致痫鼠EEG痫波放电持续时间缩短,发放频率减少。（2）KA点燃难治性癫痫模型大鼠大脑海马区存在多药耐药蛋白MRP₁、P-gp的表达较皮质区明显升高。（3）埋药线逆转与降低致痫鼠海马区多药耐药蛋白MRP₁、P-gp的表达水平,可能是其抗癫痫生物学作用机制之一。     

愈痫灵方对PTZ致痫鼠认知功能障碍与海马p-CREB、CaMK IV表达的影响

目的 分析愈痫灵方对海马磷酸化环磷腺苷应答元件结合蛋白（CREB）、钙调蛋白依赖性蛋白激酶IV（CaMK IV）的关系和表达变化,探讨愈痫灵方改善戊四氮（PTZ）致痫鼠认知功能障碍的影响。方法 取健康雄性SD大鼠120只,从中随机选取10只作为正常对照组,其余大鼠用戊四氮造模,将符合模型标准的大鼠随机抽取60只分为愈痫灵组、拉莫三嗪组、丙戊酸钠组和模型组,每组15只。灌胃后用水迷宫实验测试大鼠的学习记忆能力,采用免疫组织化学方法检测p-CREB、CaMK IV在海马体CA1区的表达变化。结果 各组大鼠水迷宫实验潜伏期和总路程的学习记忆成绩比较有显著统计学意义（P<0.001）：模型组与正常组比较,差异有显著统计学意义（P<0.001）;拉莫三嗪组、愈痫灵组与模型组比较,差异有显著统计学意义(P<0.001)。愈痫灵方对致痫鼠海马CA1区P-CREB、CaMK IV表达的影响：各组之间表达的比较,差异有显著统计学意义（P<0.01）;模型组与正常组比较,差异有显著统计学意义（P<0.01）;愈痫灵组、拉莫三嗪组与模型组比较,差异有显著统计学意义（P<0.01）。结论 愈痫灵方可以通过增强海马区p-CREB的水平,提高P-CREB的上游通路CaMK IV,改善致痫大鼠的学习记忆能力。     

"毒邪致痫"之我见

脑为清窍,不容毒侵,侵之染之,有损元神,元神失控,发为癫痫。毒邪致痫,有内外毒之分：“外毒”包括物理与化学因素毒物、寄生虫毒、药物聚毒、湿热疫毒;“内毒”包括痰瘀内阻、血败脑腐、气机不利酿为毒,风火逆乱、灼伤脉络、升降失宜酿为毒;此外,禀赋不足、脾运不健、湿浊内聚酿为毒,胎产不当、胞元受损、形败难救酿为毒。临床治之多以解毒治痫之法以应对。     

眩晕定颗粒对后循环缺血性眩晕家兔

目的 探讨眩晕定颗粒对家兔气虚血瘀型后循环缺血性眩晕模型前庭神经核区Bax、Bcl-2及脑源性神经生长因子（BDNF）表达的影响。方法 建立气虚血瘀型后循环缺血性眩晕家兔模型,以西比灵为西药对照,眩晕宁为中药对照,免疫组化法测定前庭神经核区Bax、Bcl-2和BDNF表达。结果 造模后模型组家兔脑干前庭神经核Bcl-2及BDNF表达显著下降,Bax表达上调,差异有统计学意义（P＜0.05）;药物干预后,与模型组比较,眩晕定颗粒使家兔脑干前庭神经核Bcl-2及BDNF表达上调,并可抑制Bax的表达。结论 眩晕定颗粒治疗家兔实验性眩晕的作用与其促进脑组织Bcl-2、BDNF表达,抑制Bax表达有关。