丙烯酰胺对小鼠成体神经发生及增殖相关基因的影响

【目的】探讨丙烯酰胺对成年小鼠海马成体神经发生及增殖相关基因的影响,为了解丙烯酰胺的毒性机理提供参考。【方法】将20只10周龄雄性成年昆白小鼠(体质量(30±2)g/只),随机均分为丙烯酰胺染毒组和生理盐水对照组,丙烯酰胺染毒组通过腹腔注射丙烯酰胺进行染毒,注射剂量为50mg/kg,连续注射14d,第15天注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU,50mg/kg,2次/d,共3d),观察2组小鼠体质量及行为活动的变化。用BrdU标记和免疫组织化学染色方法分析丙烯酰胺染毒对小鼠齿状回神经干细胞数量的影响,用RT-PCR法研究丙烯酰胺对小鼠海马增殖相关基因JNK3、Akt1、Gsk-3β、RhoA和Rac1mRNA表达的影响。【结果】丙烯酰胺染毒组小鼠体质量极显著低于对照组,精神萎靡、后肢无力,走路时后肢偶成劈叉姿势;与对照组相比,丙烯酰胺染毒组小鼠齿状回亚颗粒细胞层中的BrdU阳性细胞数量极显著降低(P0.01),海马组织中JNK3和Rac1的mRNA表达量显著升高(P0.05),Akt1、Gsk-3β和RhoA的mRNA表达量极显著升高(P0.01)。【结论】丙烯酰胺中毒能显著抑制小鼠齿状回中成体神经干细胞增殖,可使海马组织中增殖相关基因JNK3、Akt1、Gsk-3β、Rac1和RhoA的表达量发生明显变化。     

亚硝酸盐中毒抑制小鼠成体神经发生

雄性成年昆明小鼠分为亚硝酸盐染毒组和生理盐水对照组,通过灌胃进行亚硝酸盐染毒,用BrdU腹腔注射和免疫组织化学方法研究齿状回神经干细胞的增殖和新生细胞的存活状况,用多重免疫荧光标记研究神经干细胞的分化和迁移方向。结果显示,染毒组小鼠齿状回颗粒层中的BrdU阳性细胞数量、存活率均极显著低于对照组(P<0.01),表明亚硝酸盐中毒对小鼠新生神经干细胞的增殖和存活产生了影响。染毒组BrdU/NeuN双阳性细胞的数量极显著低于对照组(P<0.01)。与对照组相比,染毒组中神经干细胞的迁移方向无显著性差异(P>0.05)。结果表明,亚硝酸盐中毒能显著抑制小鼠神经干细胞增殖,降低新生细胞的存活率。     

中国仓鼠卵巢细胞和人胚肾T细胞骨架及其迁移特性的比较

【目的】比较中国仓鼠卵巢(CHO)细胞和人胚肾T(HEK293T)细胞的迁移能力,筛选适用于细胞骨架形态和外源基因对细胞迁移影响研究的细胞系。【方法】通过免疫荧光组织化学比较CHO和HEK293T细胞骨架的形态差异,通过延时成像和划痕试验比较细胞迁移能力,通过免疫印迹比较2株细胞系细胞骨架基因的相对表达,并从细胞骨架差异和结构基因的选择性表达方面解释细胞迁移能力的差异。【结果】CHO和HEK293T细胞系的细胞骨架在形态上存在较大差异,HEK293T细胞系的核质比是CHO细胞的2.25倍;CHO细胞比HEK293T细胞的迁移能力强,是HEK293T细胞的2.9倍;2种细胞内α-Tubulin/β-Actin的比率存在较大差异,CHO是HEK293T的1.2倍。【结论】细胞中微管微丝的差异性分布及结构基因Tubulin和Actin的选择性表达是细胞迁移特性不同的关键因素。CHO细胞适用于涉及细胞骨架形态和外源基因对细胞迁移影响的研究,HEK293T细胞不适用于此类研究。     

枸橼酸氢钾钠颗粒与八正散对小鼠三聚氰胺中毒模型的治疗效果

【目的】观察八正散(bazheng powder,BZP)和枸橼酸氢钾钠颗粒(potassium sodium hydrogen citrate,PSHC)单独或联合用药对三聚氰胺中毒小鼠模型的治疗效果,为三聚氰胺中毒的临床治疗提供参考。【方法】以1 500 mg/kg三聚氰胺连续15 或30 d对小鼠灌胃0.4 mL/（只·d）,构建小鼠三聚氰胺中毒模型,然后将其分成生理盐水对照组和药物治疗组,用质量浓度为1.12,0.56,0.28 g/mL的BZP和含量为1.44,0.72,0.36 g/kg的PSHC单独或联合治疗,每天1次,灌胃量0.4 mL/（只· d）,7 和15 d后测定血清肌酐(CRE)、尿素氮( BUN)和尿酸(UA)浓度,治疗15 d后处死小鼠,取肾脏称质量,计算肾脏系数。【结果】治疗7 d后,治疗组血清指标CRE、BUN、UA值均比对照组低;与治疗7 d相比,治疗15 d 时,CRE、BUN、UA值进一步降低,且仍低于对照组。 除0.56 g/mL BZP+0.72 g/kg PSHC和1.44 g/kg PSHC组外,其他各治疗组小鼠总肾脏系数均显著低于对照组（P<0.05）。【结论】BZP和PSHC单独或联合用药对小鼠三聚氰胺（1 500 mg/kg）中毒有治疗效果。治疗7 d 时,0.56 g/mL BZP+0.72 g/kg PSHC组和0.28 g/mL BZP+1.44 g/kg PSHC组的联合治疗效果较好;治疗15 d 时,以0.28 g/mL BZP组的单独治疗效果及0.28 g/mL BZP+1.44 g/kg PSHC和0.28 g/mL BZP+0.36 g/kg PSHC组的联合治疗效果较好。