小反刍兽疫N5蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

【目的】建立一种适用于PPRVN蛋白抗体的间接ELISA检测方法,应用于PPR防疫.【方法】根据GenBank中登录小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株N基因序列进行人工合成,设计1对特异引物对N5基因扩增,经测序分析后将N5基因片段和原核表达载体pET-32a(+)相连接,成功构建pET-32a-N5质粒.将pET-32a-N5转化于TransB(DE3)原核表达感受态细胞后用IPTG诱导表达获得重组蛋白,经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定,重组蛋白分析具有良好的反应原性.【结果】利用原核表达纯化的PPRV N重组蛋白作为包被抗原,初步建立了一种能够检测针对PPRV N蛋白抗体的间接ELISA方法.用建立的方法对112山羊份血清进行了抗体检测,该方法与竞争ELISA试剂盒对比,临床符合率94.8%.【结论】该方法具有较好的敏感性、重复性和特异性.     

重组大肠杆菌表达外源蛋白包涵体复性的研究进展

重组蛋白在宿主系统中高水平表达时,都可形成无活性的包涵体,须经洗涤、溶解、复性后才能得到生物活性蛋白。本文阐述了包涵体传统复性方法和近年来发展的层析复性法、反胶团复性法等新的复性方法。     

兰州市发展都市现代化畜牧业的若干思考

随着城市化进程的发展和生态环境保护要求的日益提高,发展都市现代化畜牧业对城市运行具有重要意义。本文在分析当前兰州市畜牧业发展现状和特点的基础上,总结了其发展过程中存在问题,并提出了发展都市现代化畜牧业的建议,以供参考。     

牦牛卵巢组织学结构的观察

本试验对牦牛的卵巢结构进行了研究,主要是通过大体解剖和显微结构的观察。通过研究,把牦牛的卵泡分为了原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和囊状卵泡。研究发现,牦牛的卵巢中数量较多的是原始卵泡,它主要分布在皮质的浅表层。原始卵泡是由卵母细胞以及周围单层的扁平卵泡细胞组成。初级卵泡体积增大,透明带开始形成。次级卵泡体积迅速增大,透明带厚度明显增加,卵泡膜增厚。囊状卵泡腔体大,卵母细胞位于卵泡一侧,形成放射冠状的卵丘。