三个籼型杂交水稻糊化温度的遗传分析

本文以KOH扩散法分析了汕优3号、汕优6号、赣化2号等三个杂交水稻双亲、F_1和F_2的糊化温度。结果表明五个供试亲本分别归属于二种不同的糊化温度类型。珍汕97A、献党1号的平均糊化温度级别是1.68、1.88,为典型的高糊化温度类型;而IR661、IR26、IR24的平均糊化温度级别为6.13、6.94、6.14,是典型的低糊化温度类型。三个F_1无论是高×低,还是低×高,它们的平均糊化溫度级别是1.73、1.65、1.71,均表现为高糊化温度。三个F_2糊化溫度分离都呈偏态双峰曲线分布。根据各组合中高、中、低三种类型的籽粒数,可以得到12:1:3的分离比,经X~2测定,三个X~2值都小于PO.01,无显著性差异。因此,可以认为,高糊化温度是个显性性状,是由二对基因控制的,而且,基因间具有上位效应。另外,利用高糊化温度是显性的特点,测定了赣化2号(IR24×献党1号)组合的种子纯度。结果表明,杂种和母本间的差异显著。因此,通过糊化温度测定可以测定该组合F1杂种的纯度。同时,本文还针对杂交水稻米质差的情况,提出了改进意见。     

大花蕙兰(Cymbidium hybridium)离体快速繁殖技术

以大花蕙兰茎尖和茎节段作外植体进行了离体快速繁殖技术研究。结果显示:茎尖诱导芽的效果优于茎节段;适宜诱导培养基为MS BA4.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.6g·L-1,茎尖在该培养基上芽的诱导率为71.4%;丛芽增殖适宜培养基为MS BA2.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC03.g·L-1,增殖率为3.79;原球茎增殖、分化的适宜培养基为MS BA1.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.3g·L-1,增殖率为6.1,分化率为71.1%;生根和壮苗的适宜培养基为MS NAA0.5mg·L-1 AC0.3g·L-1,试管苗生根率达100%。     

水稻Ds转座子转基因后代的抗性筛选

以水稻Ds转基因后代的种子为抗性筛选材料，建立了种子浸润发芽的抗性检测方法，研究表明以340～450mg·L     

水稻蜡质基因(Wx)反义片段在转基因后代中的遗传稳定性

用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化方法，将携带水稻蜡质基因反义片段导入中花11号粳稻中，分析了20个独立转化的转基因植株。经GUS染色、PCR分子检测，证明蜡质基因反义片段已整合到这些植株的染色体组中；在转基因植株后代T1的籽粒外观糯性检测中，有8个转基因植株检测到糯性籽粒的存在；在12个转基因植株T2后代直链淀粉含量测定中，有5个T3的直链淀粉含量比对照有明显的降低；在T3、T4的直链淀粉含量测定中，获得了直链淀粉含量比对照低1％的株系；来自T2的糯稻株系其后代能相对稳定遗传。在籽粒GUS检测和外观糯性检测中，发现二者的分离比存在差异。     

去除标记基因的水稻转基因研究

以p1300(含潮霉素抗性标记基因)和p13W8(含反义蜡质基因)为供体DNA，通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的方法，对水稻品种寒丰B的幼胚愈伤组织进行共转化，获得35份转基因植株。经PCR检测，有5份检测到反义蜡质基因和潮霉素抗性基因共存。在其T1代材料中，通过PCR检测获得24份只带有反义蜡质基因而无潮霉素标记基因的转基因植株。结果证明：在共转化植株后代中，通过筛选可获得无抗性标记基因的水稻转基因植株。     

根癌农杆菌介导的水稻遗传转化(综述)

回顾了水稻遗传转化的历程,对根癌农杜菌介导的目的基因的水稻遗传转化,以及外源基因的遗传行为作了较为详细的概述,提出了现存的问题,并对进一步的研究作出展望。     

水稻粳糯杂交新组合的选育及其特征特性

选用综合农艺性状优良的粳型寒丰糯（HFWx）,与同型的寒丰不育系（HFA）进行杂交、回交转育成粳型糯质新不育系寒丰糯A（HFwxA）,与自主选育的粳型糯质恢复系糯恢2号配组育成了杂交粳型糯稻新组合糯杂2号。小区试验和生产示范结果表明,该组合具有高产、优质、抗性强等特点。介绍了糯杂2号的选育经过、产量表现和特征特性。     

水稻密穗突变体A989突变基因克隆和转基因植株分析

从水稻T-DNA插入突变群体中分离得到一个密穗突变体A989,表现晚开花、穗二级枝梗和小花数增加以及包颈。分子检测证明A989中T-DNA是单拷贝插入,通过inverse PCR的方法分离得到A989中T-DNA的旁邻序列,表明T-DNA插入在RCN2基因polyA加A位点后330bp处;RT-PCR检测发现在A989中,RCN2基因的表达被显著上调。利用2×35S启动子在野生型水稻Zhonghua 11中超表达RCN2基因,转基因植株表现为不抽穗,通过细胞学观察发现转基因植株能完成营养生长向生殖生长的转变,但是生殖生长期的分生组织在分化出二级枝梗原基后停止分化和生长。此外,通过比较部分开花相关基因在野生型Zhonghua 11、突变体A989中的表达,推测了RCN2基因可能的作用途径。     

籼稻不同品种的遗传转化和植株再生

用携带水稻蜡质基因反义 RNA片段的 p1 3 W4质粒的根癌农杆菌 EHA1 0 5 ,分别感染籼稻品种龙特甫 B、协青早B、珍汕 97B和 -3 2 B的幼胚愈伤组织 ,经共培养和在潮霉素 2 5～ 5 0 mg/L浓度下的二次筛选后 ,获得了对潮霉素表现抗性的愈伤组织 ,抗性愈伤组织的频率在 2 0 .1 %～ 2 7.1 %之间 ;抗性愈伤组织经分化培养 ,分化频率在 1 2 .0 %～ 2 1 .2 %。品种间绿菌分化情况存在较大差异 ,龙特甫 B的抗性愈伤组织分化成绿苗的频率为 8.8% ;珍汕 97B的抗性愈伤组织虽能分化 ,但是 ,无法获得绿苗。对转基因植株分别进行了 GUS活性测定和 PCR检测 ,结果显示 :获得的转基因植株 ,92 %的植株GUS检测呈阳性反应 ,并能正常结实 ,在 T1种子的胚乳中也能检测到 GUS染色的分离 ,证明外源基因确已导入这些植株中 ,而且 ,能正常遗传。在抗性愈伤组织的分化中 ,试验了潮霉素对分化的影响 ,结果显示 :不添加潮霉素 ,能明显地提高绿苗频率 ,但转基因植株的可靠性也随之下降。     

根癌农杆菌介导反义蜡质基因的水稻遗传转化

通过根癌农杆菌介导法.将水稻反义蜡质基因导入6个水稻品种(系)幼胚的愈伤组织.这些愈伤组织经连续两次25～50mg/L潮霉素抗性筛选,获得抗性愈伤组织的转化频率为30.75%～59.09%,经分化培养,不同品种的绿苗转化频率分别为3.85%～8.97%.分化成苗的植株经GUS检测,80%以上的植株叶片呈阳性反应,显示蓝色.部分呈阴性反应的植株经PCR检测,也能扩增出外源基因相应的DNA片断,结果证明外源基因已整合到转基因植株中.