楚雄州2012～2014年6种猪繁殖障碍性疫病的血清流行病学调查

[目的]了解楚雄州猪繁殖障碍性疫病的流行情况.[方法]采用血清学方法调查了楚雄州2012～2014年6种猪繁殖障碍性疫病的感染情况.[结果]楚雄州猪圆环Ⅱ型病毒病总阳性率达到89.41％,猪伪狂犬病总阳性率达到47.00％,猪细小病毒病阳总性率达到47.46％,猪乙型脑炎病总阳性率达到49.39％,猪衣原体病总阳性率达到24.36％,猪弓形虫病总阳性率达到23.98％.[结论]6种繁殖障碍性疫病广泛存在于楚雄州,此调查结果为控制繁殖障碍性疫病的流行提供了一定的参考依据.     

云南省新发猪圆环病毒3型感染状况调查与全基因进化分析

为了解猪圆环病毒3型(PCV3)在云南省不同地区猪群中的流行情况,针对PCV3基因保守区域设计特异性引物,优化反应条件,建立PCR快速检测方法,并采用该方法对采自云南省不同地市431份样品进行检测,将获得的部分毒株全基因序列进行遗传进化分析。结果显示:本研究成功建立了一种快速、特异和灵敏的PCV3检测方法;云南省12个地(市)29县(区)中,8个地(市)12个县(区)检测出阳性样品;431份样品中有43份PCV3阳性样品,阳性率为9.98%;获得的3株PCV3全基因组序列与参考毒株之间的核苷酸同源性为98.6%~99.5%,进化树显示3株云南毒株形成一个小的进化分支,属于PCV3a基因型。本研究结果表明,PCV3在云南省多个地区呈一定的流行趋势,流行毒株以PCV3a基因型为主,有必要进一步开展云南地区PCV3流行病学调查,并提出防控对策。     

楚雄州猪圆环病毒2型病血清学调查

为了解楚雄州猪圆环病毒病流行情况,采用ELISA方法对采自楚雄州9县1市规模化猪场及散养户猪只血清共362份,进行猪圆环病毒2型感染的血清流行病学调查.结果表明：共检出阳性347份,阳性率为95.86％.其中采自规模猪场的222份样品中,阳性210份,阳性率为94.56％;农户散养140份样品,阳性137份,阳性率为97.86％;表明猪圆环病毒2型病在楚雄州广泛流行.     

抗原浓缩纯化工艺对口蹄疫灭活疫苗免疫效果评价

为增强牛口蹄疫O型、Asia-Ⅰ型二价灭活疫苗免疫效果,本试验应用超滤技术浓缩口蹄疫(FMD)抗原来制备浓缩疫苗,通过免疫血清学检测及本动物攻毒保护试验来评价所制疫苗效果.结果显示,浓缩抗原疫苗安全检验合格,全剂量(2 mL)、1/3剂量(0.67 mL)、1/9剂量(0.22 mL)组牛血清抗体水平均较常规疫苗有显著提升(P＜0.05),阳转率高于常规灭活疫苗;本动物攻毒保护试验效果明显,Asia-Ⅰ型、O型抗原PD50值分别达到了每剂12.51和10.32.结果表明,应用超滤技术浓缩FMD抗原可提高FMDV二价灭活疫苗的免疫效果.     

猪Mx1基因真核表达载体的构建及表达

根据GenBank中猪Mx1基因序列设计并合成引物,对Mx1基因ORF区全长1 992个碱基进行扩增。将扩增片段与pVax1载体连接,构建pVa-Mx1-ORF真核表达载体。将构建的表达载体导入BHK-21和HEK-293细胞进行表达,用RT-PCR和间接免疫荧光对表达产物进行鉴定。结果表明,所构建的pVa-Mx1-ORF表达载体在BHK-21和HEK-293细胞中成功表达。     

不同保存方法对RT-PCR检测蜜蜂病毒的影响

本研究从已知感染蜜蜂黑王台病毒(Blackqueen cell virus;BQCV)和蜜蜂畸翅病毒(Deformed WingVirus,DWV)的东方蜜蜂蜂群中采集工蜂个体,将其纵向剖成3份,一份存于-79℃,一份加入1.2 mL无水乙醇保存,第三份加入1.2 mL TRIzol保存。对3组样本每隔3 d同时进行RNA提取,并使用RT-PCR方法检测蜜蜂黑王台病毒和蜜蜂畸翅病毒。结果表明在TRIzol中保存的样品和-79℃冰冻保存的样本所提取RNA相对完整,病毒检测结果一致;在无水乙醇中保存的样品RNA质量相对较差,病毒检测阳性率低于前两者。该研究为蜜蜂病毒检测的采样保存方法提供一定的理论依据。     

云南省猪圆环病毒2型感染状况调查

为了解云南省猪圆环病毒2型(PCV-2)的感染状况,试验采用间接ELISA方法对从云南省部分规模化猪场采集的未经PCV-2疫苗免疫的猪只血样进行抗体阳性率检测.结果表明:所有被检猪场均存在PCV-2感染,PCV-2抗体总阳性率为41.5%.哺乳仔猪PCV-2抗体阳性率最高,为45.8%;后备母猪最低,为35.7%.表明...     

链球菌的分离鉴定及药敏试验

为分离和鉴定疑似链球菌感染病料,该试验采用革兰氏阳性菌选择性培养基进行分离培养,并进行生化试验鉴定及药敏试验。结果表明:6份病料中分离出6株链球菌菌株,根据生化试验鉴定表推断出,有4株为C群,1株为D群,1株为E群。药敏试验结果表明,先锋必和青霉素对链球菌有较好的抑制作用,此结果为链球菌病的研究和防治提供一定的理论依据。     

山羊源伪狂犬病病毒的分离与鉴定

为确诊一例发病山羊是否感染伪狂犬病病毒,采集发病羊体的肺脏和脑组织进行伪狂犬病病毒gE基因PCR检测,并将病料接种至PK-15细胞分离病毒,以及进行小鼠感染试验和gD基因分析。结果表明,PCR检测结果 PRV阳性,病料接种PK-15细胞24h后,细胞开始出现细胞病变;将病毒感染小鼠,36h后小鼠出现局部奇痒、死亡;gD基因序列分析发现,分离毒株与GenBank中的PRV gD基因序列同源性均在98%以上,氨基酸同源性在99%以上;在分离毒株gD基因的808bp~837bp位置上存在缺失与变异、高变重复区。本研究成功分离获得一株羊源伪狂犬病毒,为云南省羊伪狂犬病防控和基础研究提供资料。