肠道微生物宏基因组文库构建及酯解酶基因筛选

利用宏基因组学方法,以人肠道微生物样品为原材料,构建了1个约30 000个克隆的fosmid文库.以三丁酸甘油酯为底物,通过功能筛选,获得1个酯解酶阳性克隆.对该阳性克隆构建亚克隆,挑选具有酯解酶活性的阳性亚克隆进行测序分析,最终获得1个肠道微生物来源的酯解酶基因(GenBank登录号:JQ972699).结果表明,文库克隆的平均插入片段约为40 kb,没有重复插入片段克隆.获得的酯解酶基因推演蛋白与Pyramidobacter piscolens W5455的patatin样磷脂酶同源性最高,氨基酸一致性为95％.生物信息学分析结果表明该基因可能通过Vd型分泌方式进行分泌并发挥功能.本研究是通过构建人肠道微生物宏基因组大片段文库并结合重组子功能筛选获得酯解酶的首次报道,可为食品工业提供新的酯解酶来源和筛选方法.     

尤瑞克林联合奥扎格雷钠对大鼠脑梗死急性期脑血量的影响

目的:观察尤瑞克林联合奥扎格雷钠对大鼠脑梗死急性期脑血量的影响。方法:将健康SD大鼠32只随机平均分为尤瑞克林组、奥扎格雷钠组、联合用药组和生理盐水组,进行脑梗死成模,在成模后30min后尾静脉注射给药,尤瑞克林组给予8.75×10-3 PANU/kg尤瑞克林、奥扎格雷钠组给予80mg奥扎格雷钠、联合用药组给予尤瑞克林8.75×10-3 PANU/kg和奥扎格雷钠80mg,生理盐水组给予生理盐水给药;测定用药后10、30、60min局部脑血流(rCBF)、缺血后24h时脑梗塞面积,脑组织切片HE染色结果。结果:尤瑞克林组和奥扎格雷钠组、联合用药组在用药后10、30、60min时,模型脑缺血半暗带rCBF较基线值提高百分比高于生理盐水组(P0.05),联合用药组高于尤瑞克林组和奥扎格雷钠组(P0.05);尤瑞克林组、奥扎格雷钠组、联合用药组模型脑梗死面积明显小于生理盐水组(P0.05),联合用药组脑梗死面积小于尤瑞克林组、奥扎格雷钠组奥扎格雷钠组联合用药组;HE染色可见生理盐水组神经细胞大量变性、坏死、固缩,细胞轮廓不清晰,联合用药组缺血区有部分神经细胞衰亡,较尤瑞克林组和奥扎格雷钠组单独给药相比有明显的改善。结论:尤瑞克林和奥扎格雷钠对于大鼠脑梗死急性期脑血量能明显改善,联合用药时效果更为明显。